贵州习水国家级自然保护区地衣型真菌初报*

李 敏，李 飞，李崇清，孟庆峰，贾泽峰▲

(1聊城大学生命科学学院，山东 聊城 252059；2贵州习水国家级自然保护区管理局，贵州 遵义 564600；3遵义医科大学公共卫生学院，贵州 遵义 563000)

贵州习水国家级自然保护区位于贵州省北部，地处习水县境内西北部，东经105°50′～106°29′，北纬28°07′～28°34′，海拔在420～1756 m之间，以中亚热带常绿阔叶林森林生态系统为主要保护对象，是目前贵州省面积最大的国家级自然保护区。区内岩石主要为红砂岩；水系属长江水系，主要河流为赤水河和习水河；土壤系紫色土最多；属亚热带湿润季风性气候；年降水量在900～1300 mm之间；动植物资源丰富[1]。然而，该地区的地衣型真菌不曾有人报道过，尚为空白。

地衣型真菌，简称地衣，是真菌与藻类和/或蓝细菌共生而形成的复合体，共生菌为光合生物(藻类或蓝细菌)提供可溶性矿物盐和可逆保护，光合生物提供给共生菌碳素营养[2]。目前世界范围内记载的地衣型真菌有28000余种[3-5]；中国记载有3000余种[6]。地衣型真菌在食用、药用、生化试剂和冰核降雨等方面具有广泛的应用价值[7-10]。

本研究对采自贵州习水自然保护区的200余份标本进行形态学、解剖学、化学、地理学和分子生物学方面等分类学研究，共鉴定出16科22属，其中贵州省新记录3个，即斑果裂衣(Chapsaleprocarpa)，锡兰裂隙衣(Fissurinacingalina)和扁果黑文衣(Phaeographisplatycarpa)，该研究填补了该保护区内地衣型真菌物种多样性研究之空白，为其进一步研发提供了基础资料。

1 实验材料

所用材料为采自贵州习水国家级自然保护区的200余份地衣标本，现全部保存于聊城大学生命科学学院地衣标本馆。

2 实验方法

2.1 形态及解剖学研究

在形态学研究中使用体视显微镜OLYMPUS SZX16对地衣的外部形态进行了观察；在解剖学研究中使用光学显微镜OLYMPUS BX53对地衣子囊器结构进行了观察。

2.2 化学研究

综合化学显色反应法和薄层色谱法对地衣的代谢产物进行鉴定[11-14]。

2.3 分子生物学研究

以高效植物基因组DNA提取试剂盒提取的地衣DNA为模板，分别用ITS1F、ITS4和AL2R、LR6作为引物扩增其ITS和LSU序列，送铂尚生物技术有限公司(济南)测序后，通过NCBI进行blast。

3 实验结果

通过分类学研究，共鉴定出16科22属地衣，如表1所示。

表1 贵州习水国家级自然保护区地衣型真菌科属统计Tab.1 Checklist of families and genera of lichenized fungi in Xishui National Nature Reserve in Guizhou

贵州新记录种：

3.1 锡兰裂隙衣(图1)

Fissurinacingalina(Nyl.)Staiger，Biblthca Lichenol.85：128(2002).

≡Graphinacingalina(Nyl.)Zahlbr.，Cat.Lich.Univers.2：401(1923)[1924].

≡GraphiscingalinaNyl.，Acta Soc.Sci.Fenn.26(10)：21(1900).

A：地衣体和子囊果；B：子囊果纵切；C：子囊和孢子标尺：A=1 mm；B=50 μm；C=100 μm。图1 锡兰裂隙衣Fig.1 Fissurina cingalina

地衣体树皮生，壳状，具裂缝，表面灰绿色，光滑，有光泽。

子囊果线状，黄褐色，单一，时具常分支，埋生，长1.8～2.5 mm，宽约0.2 mm。盘面闭合至裂缝状。固有盘被与地衣体同色；体质盘被不炭化，囊层被不明显；子囊层无色，清晰状，高95～150 μm；囊层基无色，15～20 μm。子囊梭形，含8个孢子；子囊孢子无色透明，砖壁型，椭圆形，常在一段加宽，20～30 μm×9～16 μm，具光晕，非淀粉质。

化学：地衣体 K+黄褐色，C-，P-；薄层色谱法未检测出。

标本：丹霞谷，1130～1145 m，树皮，GZ19525、GZ19526、GZ19527、GZ19528、GZ19529、GZ19559。

文献记载：福建、云南[15]。

分布：东方泛热带[15]，印度、斯里兰卡、委内瑞拉、巴西[16]。

讨论：该种主要特征是子囊果黄褐色，盘面闭合至裂缝状，子囊含8个孢子，子囊孢子砖壁型，无色透明。该种与Fissurinaadscribenshe和Fissurina.columbina相似，不同的是Fissurinaadscribenshe皮层无裂缝且子囊孢子更窄，而Fissurinacolumbina子囊果突生且分支不规则，子囊孢子淀粉质[15]。

3.2 扁果黑文衣(图2)

PhaeographisplatycarpaMüll.Arg.，Bot.Jb.20：284(1894).

D：地衣体和子囊果；E：子囊果纵切；F：子囊和孢子标尺：D=0.5 mm；E=200 μm；F=50 μm。图2 扁果黑文衣Fig.2 Phaeographis platycarpa

地衣体树皮生，壳状，黄绿色至浅黄褐色，表面光滑，有光泽。

子囊盘线状，灰黑色，半埋生至贴生，簇生，单一至具分支，长1.5～4.5 mm，宽约0.25 mm；盘唇发育不良；盘面可见，灰褐色，微覆有灰白色粉霜。盘被不明显；囊层被褐色，厚20～26 μm；子囊层渗入状，高 80～100 μm，非淀粉质；囊层基微褐色，40～50 μm。子囊棒状，含8个孢子，子囊孢子浅褐色，横隔透镜型，长椭圆形，22～30 μm×6～10 μm，淀粉质。

化学：地衣体 K+红褐，C-，P+黄色；薄层色谱法检测到norstictic acid。

标本：丹霞谷，1130～1160 m，树皮，GZ19534、GZ19535、GZ19556-1。

文献记载：海南[14]。

世界分布：泛热带分布[14]，巴西、坦桑尼亚、澳大利亚[17]。

讨论：该种主要特征是线盘簇生、盘被不明显或缺乏，子实层渗入状，子囊孢子横隔透镜型、浅褐色、具6～8胞室、22～30 μm×6～10 μm，含norstictic acid。该种与Paeographisdendritica和Paeographisintricans近似，不同之处是Paeographisdendritica子实层 I+红褐色至紫褐色、线盘不呈现簇生状，而Paeographisintricans具明显的子座区域、较小的子囊孢子(15～20 μm×5～7 μm)[14]。

3.3 斑果裂衣(图3)

Chapsaleprocarpa(Nyl.)Frisch，Biblthca Lichenol.92：108(2006).

≡Graphinaleprocarpa(Nyl.)Zahlbr.，Cat.Lich.Univers.2：412(1923)[1924].

≡GraphisleprocarpaNyl.，Acta Soc.Sci.Fenn.7(2)：472(1863).

≡Thelotremaleprocarpum(Nyl.)Tuck.，Gen.Lich.(Amherst)：139(1872).

G：地衣体和子囊果；H：子囊果纵切；I：子囊和孢子标尺：G=1 mm；H=100 μm；I=50 μm。图3 斑果裂衣Fig.3 Chapsa leprocarpa

地衣体树皮生，壳状，连续，表面浅灰色到灰绿色，轻微不平至具疣体，无皮层。

子囊盘有角到轻微加长，直径0.3～1.5 mm，边缘高起，深裂到具裂片，裂片后弯，具白色毡状的内表面；盘面褐色，覆有白色粉霜。盘被杯状；囊层被无色，8～15 μm高；子囊层无色，非渗入状，高100～150 μm；侧丝单一，顶部念珠状；缘丝长达40 μm。子囊棒状，含1个孢子；子囊孢子无色，砖壁型，60～110 μm×20～40 μm，轻微光晕，非淀粉质。

化学：地衣体 K+黄，C-，P-；薄层色谱法未检测出。

标本：丹霞谷，1145 m，树皮，GZ19520、GZ19521、GZ19522、GZ19530、GZ19531、GZ19536、GZ19537、GZ19538。

文献记载：广西[18]。

世界分布：泛热带分布到亚热带[18]；喀麦隆、坦桑尼亚、斯里兰卡、婆罗洲、美国、巴西[18]。

讨论：该种的主要特征是地衣体无皮层，表面浅灰色到灰绿色，子囊盘具后弯的裂片，盘面覆有白色粉霜，子囊含1个孢子，子囊孢子砖壁型，60～110 μm×20～40 μm，不含地衣化学。该种与Chapsaniveocarpa和Chapsapatens相似，不同的是Chapsaniveocarpa子实层渗入状，子囊含1(2)个孢子，子囊孢子更大(80～190 μm×20～50 μm)[19]，Chapsapatens海拔更高，子实层更厚，子囊孢子更大[20]。

4 地衣型真菌名录

(一)Cladoniaceae 石蕊科

(1)Cladia筛蕊属

1)Cladiaaggregata(Sw.)Nyl.聚筛蕊

标本：丹霞谷，1040 m，土层，GZ19498；天鹅池，950 m，土层，GZ19458；天鹅池，950 m，石生，GZ19477。

(2)Cladonia石蕊属

1)CladoniafenestralisNuno 繁鳞石蕊

标本：天鹅池，950～960 m，土层，GZ19465、GZ19466、GZ19467、GZ19483、GZ19485。

2)CladoniamacilentaHoffm.瘦柄红石蕊

标本：天鹅池，960 m，布条，GZ19486、GZ19491；天鹅池，960 m，土层，GZ19488；天鹅池，960～1230 m，腐木，GZ19489、GZ19490、GZ19552、GZ19553。

3)CladoniarappiiA.Evans 宽杯石蕊

标本：蔺江村，640 m，土层，GZ19580。

4)CladoniasubconisteaAsahina 拟小杯石蕊

标本：天鹅池，950 m，土层，GZ19456。

(二)Collemataceae 胶衣科

(1)Collema胶衣属

标本：天鹅池，950 m，土层，GZ19479。

(三)Gomphillaceae 楔形衣科

(1)Tricharia毛蜡衣属 (该属贵州未有报道，曾报道于香港、云南和台湾[6])

标本：丹霞谷，1040～1160 m，树叶，GZ19500、GZ19501、GZ19541、GZ19542。

(四)Graphidaceae 文字衣科

(1)Fissurina裂隙衣属

1)Fissurinacingalina(Nyl.)Staiger 锡兰裂隙衣(贵州新记录)

标本：丹霞谷，1130～1145 m，树皮，GZ19525、GZ19526、GZ19527、GZ19528、GZ19529、GZ19559。

(2)Graphis文字衣属

1)GraphisassimilisNyl.黑脉文字衣

标本：蔺江村，850 m，树皮，GZ19571。

2)GraphiscognataMüll.Arg.钝盘文字衣

标本：丹霞谷，1130 m，树枝，GZ19556、GZ19557、GZ19558。

3)GraphisimmersicansA.W.Archer 半陷文字衣

标本：蔺江村，850 m，树皮，GZ19569、GZ19570。

4)GraphislongirameaMüll.Arg.长枝文字衣

标本：丹霞谷，1130 m，树皮，GZ19519。

5)GraphisoligosporaZahlbr.寡孢文字衣

标本：丹霞谷，1040 m，树皮，GZ19511。

6)GraphissubdisserpensNyl.亚纹皮文字衣

标本：丹霞谷，1040 m，树皮，GZ19506。

7)GraphisvittataMüll.Arg.条纹文字衣

标本：丹霞谷，1040 m，树皮，GZ19512。

(3)Phaeographis黑文衣属

1)Phaeographisintricans(Nyl.)Staiger 缠结黑文衣

标本：蔺江村，850 m，树皮，GZ19565、GZ19566、GZ19567、GZ19568、GZ19576、GZ19577。

2)PhaeographisplatycarpaMüll.Arg.扁果黑文衣(贵州新记录)

标本：丹霞谷，1130～1160 m，树皮，GZ19534、GZ19535、GZ19556-1。

(五)Lecanoraceae茶渍科

(1)Lecanora茶渍属

1)LecanorapacificaTuck.太平洋茶渍

标本：蔺江村，850 m，树皮，GZ19574。

(六)Lecideaceae 网衣科

(1)Porpidia假网衣属

1)Porpidiaalbocaerulescens(Wulfen)Hertel & Knoph 白兰假网衣

标本：丹霞谷，1040 m，石生，GZ19505。

(七)Opegraphaceae 孔文衣科

(1)Cresponea鸡冠衣属 (该属贵州未有报道，曾报道于香港和台湾[6])

标本：天鹅池，640～1050 m，石生，GZ19492、GZ19495、GZ19450、GZ19581、GZ19582。

(八)Parmeliaceae 梅衣科

(1)Parmotrema大叶梅属

1)Parmotremacetratum(Ach.)Hale 睫毛大叶梅

标本：天鹅池，950 m，土层，GZ19462、GZ19475；蔺江村，640 m，树皮，GZ19587。

(2)Punctelia星点梅属

1)Puncteliaborreri(Turner)Krog 粉斑星点梅

标本：天鹅池，1050 m，石生，GZ19446。

2)Puncteliarudecta(Ach.)Krog 粗星点梅

标本：天鹅池，970 m，石生，GZ19453；天鹅池，950 m，土层，GZ19459、GZ19461、GZ19464、GZ19470、GZ19476。

(3)Usnea松萝属

标本：天鹅池，960 m，土层，GZ19487；天鹅池，1050 m，树皮，GZ19497。

(九)Peltigeraceae 地卷科

(1)Peltigera地卷属

1)Peltigeracanina(L.)Willd.犬地卷

标本：天鹅池，950 m，土层，GZ19471；丹霞谷，1130～1230 m，土层，GZ19544、GZ19548、GZ19555、GZ19551；蔺江村，640 m，土层，GZ19578、GZ19588。

2)Peltigerahymenina(Ach.)Delise 赭腹地卷

标本：天鹅池，950 m，土层，GZ19455；丹霞谷，1040 m，土层，GZ19504。

(十)Pertusariaceae 鸡皮衣科

(1)Pertusaria鸡皮衣属

标本：天鹅池，950 m，石生，GZ19463、GZ19472、GZ19473、GZ19484。

(十一)Physciaceae 蜈蚣衣科

(1)Heterodermia哑铃孢属

1)Heterodermiaobscurata(Nyl.)Trevis.暗哑铃孢

标本：蔺江村，640 m，土层，GZ19584。

2)Heterodermiapseudospeciosa(Kurok.)W.L.Culb.拟哑铃孢

标本：蔺江村，640 m，土层，GZ19583。

(十二)Porinaceae 污核衣科

(1)Porina污核衣属

标本：丹霞谷，1145～1160 m，树皮，GZ19524、GZ19539、GZ19540。

(十三)Ramalinaceae 树花衣科

(1)Bacidia杆孢衣属

标本：丹霞谷，1160 m，树皮，GZ19532、GZ19533。

(十四)Stereocaulaceae 珊瑚枝科

(1)Lepraria癞屑衣属

标本：丹霞谷，1040 m，树皮，GZ19499、GZ19502；天鹅池，1050 m，土层，GZ19448。

(2)Stereocaulon珊瑚枝属

标本：天鹅池，960 m，土层，GZ19482。

(十五)Thelotremataceae 疣孔衣科

(1)Chapsa裂衣属

1)Chapsaleprocarpa(Nyl.)Frisch 斑果裂衣 贵州新记录

标本：丹霞谷，1145 m，树皮，GZ19520、GZ19521、GZ19522、GZ19530、GZ19531、GZ19536、GZ19537、GZ19538。

(十六)Verrucariaceae 瓶口衣科

(1)Verrucaria瓶口衣属

标本：蔺江村，590 m，石生，GZ19635、GZ19636。

5 致谢

感谢国家自然科学基金项目(31750001)的经费支持；感谢习水国家级自然保护区管理局所有工作人员的支持；感谢给予本研究提供材料的所有标本采集者。