B3亚型患者血型血清学及家系分析

王春海　　王文梅　　孙然

[摘要] ABO亚型主要表现为抗原凝集强度的减弱、混合视野的凝集反应、抗体效价降低、正反定型不符;其中混合视野的凝集反应是B3亚型最大的血清学特征，通过回顾性分析整理1例疑似B3亚型的血型血清学试验结果、唾液中和试验结果、亲和力试验结果、家系ABO血型调查结果，并结合病史，最终确定先证者及先证者儿子均为B3亚型。因此掌控B3亚型的实验室特征，B3亚型鉴别诊断要点，应用正确试验方法准确鉴定B3亚型，选择合适的血液输注，可以减少输血不良反应的发生。

[关键词] 血清学特征;B3亚型;混合视野;亲和力试验;输血不良反应

[中图分类号] R457.1          [文献标识码] C          [文章编号] 1673-9701（2021）11-0147-03

Analysis on the blood group serology and genealogy of B3 subtype patients

WANG Chunhai1   WANG Wenmei2   SUN Ran1

1.Department of Blood Transfusion， Inner Mongolia Baogang Hospital， Baotou   014010， China; 2.Intensive Care Unit， the First Affiliated Hospital of Baotou Medical College，Inner Mongolia University of Science and Technology， Baotou   014010， China

[Abstract] ABO subtypes are mainly featured by decreased antigen agglutination intensity，agglutination reaction in mixed vision， decreased antibody titer and inconsistent positive and negative typing. Among them， the agglutination reaction in mixed vision is the most important serological feature of B3 subtype. Through retrospective analysis and sorting out of the blood group serological test results， saliva neutralization test results， affinity test results and genealogical ABO blood type survey results of a suspected B3 subtype， and combining with medical history， it was finally determined that the proband and the proband′s son were both B3 subtypes.Therefore， controlling the laboratory features of B3 subtype， the key points of differential diagnosis of B3 subtype， applying the correct test methods to accurately identify B3 subtype， and selecting the appropriate blood transfusion can reduce the incidence of adverse reactions of blood transfusion.

[Key words] Serological features; B3 subtype; Mixed vision; Affinity test; Adverse reactions of blood transfusion

ABO血型是人類最重要血型系统，常见的表型有A、B、O、AB，但在这之外还存在着一小部分ABO亚型，亚型在人群中发生的频率不高，但常表现正反定型不一致、抗原凝集强度的减弱，导致血型鉴定困难[1-4]。B3是ABO血型较为常见的一种弱表现型，其最大特征是混合视野凝集，即B3细胞与抗-B和大多数抗-AB孵育后出现一些由数个红细胞形成的小凝集块，并被绝大部分游离的非凝集红细胞包围[5]。混合视野凝集常见以下几种情况：①A3/B3;②急性非淋巴细胞白血病;③ABO血型不合的骨髓移植;④非O型人近期输注了O型血，需结合病史加以鉴别。现将我院1例B3亚型先证者血清学及输血治疗原则回顾性病历资料，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

先证者，女，52岁，左卵巢囊肿，无输血史，2019年6月入住我院妇产科，拟行择期手术，常规备血，奥森多全自动血型仪鉴定结果：第二柱（抗-B）为混合外观2+mf，第五柱（A1细胞）为4+，出现正反定型不符，进一步作血清学复核，并随访采集先证者父亲、母亲、儿子的血型标本检测。先证者、家庭成员的血型标本采集均征得本人及家属知情同意。

1.2 试剂与仪器

抗-A、抗-B血型试剂、RhD（IgM）血型试剂、抗-H试剂，上海血液医药生物公司生产;ABO反定型、筛选细胞，长春博德生物技术有限责任公司;抗-AB试剂，法国;以上试剂均在有效期内，奥森多（Ortho AutoVuet）全自动血型及配血分析仪、台湾贝索离心机、水浴箱。

1.3 方法

ABO血型正反定型用奥森多全自动血型仪检测、抗AB、抗H用盐水试管法检测;唾液ABH血型物质检测按照文献操作[6];亲和力试验是指抗体与红细胞抗原混合后，开始出现肉眼可见凝集，这段时间一般以秒计算。可利用亲和力的不同来鉴别弱型抗原结合还是正常血型抗原结合的混合视野结果，具体按照文献[7]进行操作。

2 结果

2.1 ABO血型血清学结果

先证者与儿子红细胞存在的B抗原均非常弱，与抗-B和抗-AB均呈混合凝集（mf），并含有强的H抗原，血清与A1型红细胞呈4+，结合病史，基本考虑为B3，而先证者父亲为AB3亚型，母亲为O型。

2.2 亲和力试验结果

从表3结果可以看出正常B型红细胞的凝集平均时间为6 s，先证者凝集平均时间为25 s，先证者儿子凝集平均时间为27 s，均超过正常对照>3倍，亲和力显著降低，证实先证者及儿子血型均为B3亚型。

2.3 唾液型物质检测结果

从表4结果可以看出先证者及儿子唾液中含有B、H物质，但未检出A物质，符合B3特征。

2.4 家系ABO血型调查结果

通过表1～4中对家系4人血型血清学相关检测结果分析所得，先证者父亲符合AB3亚型血清学格局，母亲为O型，先证者父亲AB3亚型的B3基因遗传给先证者，先证者血型呈现B3亚型血清学格局，而先证者又将B3基因遗传给自已儿子，先证者儿子血型同样呈现B3亚型血清学格局。

2.5 血清学结论

先证者及儿子血型同属于B3亚型RhD（阳性）。

3 讨论

ABO亚型主要表现为抗原凝集强度的减弱、混合视野的凝集反应、抗体效价降低、正反定型不符;从分子生物学方面讲，ABO血型亚型是由ABO基因变异形成，A基因变异形成A1和其他A亚型，B基因变异形成B亚型，O基因不表达糖基转移酶活性，只能变异形成新的O等位基因[7]。

1972年，Wiener和Cioffi首先报道了1例非分泌型B3，这种表型以抗-B和抗-AB呈现混合凝集视野反应为特点，血清中缺乏抗B，唾液中含有正常含量的B抗原[9]。B3是最稀少的一种B亚型，由ABO位点上的稀有等位基因所致。在中国汉族人中，B3亞型比例约为1/900（B型），A1B3型比例约为1/1800（AB型），B3亚型以华南地区常见，而华北地区以B（A）亚型最常见[7]。据文献报道在中国台湾B3变异型具有较高频率[10]，而在中国大陆地区B3变异型频率较低。

B3亚型最大的血清学特征是与标准血清反应时出现“混合视野”或“双群”现象[5]，本例先证者在常规备血血型检测中被发现，红细胞在奥森多血型卡凝集中与抗-B发生反应时，出现部分红细胞完全凝集被阻隔在微柱上层，而部分红细胞完全沉降在微柱底层，中间无任何拖尾现象，在抗-B柱结果为混合外观（2+mf），显示正反定型不符。通过试管法复查血型，先证者红细胞与抗-B和抗-AB发生反应时，均出现部分凝集块，周围还会存在大量游离的非凝集红细胞;与抗-H反应结果为强凝集度4+，与抗-AB反应结果为混合外观（2+mf），从表1、表2考虑可能为B3亚型;通过亲和力试验鉴别本例先证者是否为B3亚型，判断标准：实验结果超出正常对照的3倍以上，则可能为A3血型或B3血型;否则可能是输不同血型的混合视野，或骨髓移植血型，或因白血病先证者造成的抗原减弱等情况[7]，由表3先证者红细胞亲和力平均时间25 s，正常对照平均时间6 s，超过正常对照达到4倍，则可以证实为B3亚型。

先证者血清中多无抗-B抗体，唾液中含有正常量的B物质[11];家系ABO血型血清学调查结果，先证者父亲为AB3亚型，先证者母亲为O型，先证者父亲将B3基因遗传先证者，先证者又将B3基因遗传给自已的儿子，是否具有亲代遗传特征，还需要分子生物学分析，基于实验条件所限，没有进一步做基因检测与测序，但基于血清学反应格局，完全可以确定B3亚型。先证者完全符合B3亚型的特征，同时既往无输血史，其临床诊断也排除了急性白血病、骨髓移植的存在，因此，先证者ABO血型为B3亚型。

B3亚型鉴别诊断要点：①与抗-B，抗AB，抗-H试剂反应的强度和类型;②血清中是否存在ABO同种凝集素;③用抗-B做吸收放散试验;④唾液中是否含有B物质;⑤分子检测;⑥认真查阅患者临床资料：无移植史、年龄、性别和诊断，基本排除不同ABO血型干细胞移植、换血治疗、胎母出血、疾病所致（白血病）、类B现象导致的混合外观，以上情况亲和力均正常，而B3亚型亲和力低，再结合亲和力试验加以区别。

B3亚型的实验室特征：①B3亚型红细胞与抗-B抗血清约有1+～2+混合视野凝集，与抗-AB抗体则可呈2+～3+混合视野凝集;②绝大部分B3血清中无抗-B抗体，但唾液中含有正常B抗原;③B3红细胞表面H抗原较强;④在B3人血清中可以查出B转移酶，但在B3红细胞上未查出B转移酶;⑤B3亚型红细胞与单克隆抗-B试剂亲和力比正常B细胞弱;⑥B3在基因水平上具有异质性。

对于ABO亚型患者，同型供血者无疑是最好的选择，但实际工作中难以实现[12]。而亚型输血原则，我国临床输血指南中尚无明确规定，根据相容性输注原则，选择交叉配血相合的血液输注[13]，由于本例先证者血清中没有产生抗-B，作为患者输注红细胞时可以选择使用O型RhD阳性洗涤红细胞，也可以选择使用B型RhD阳性悬浮红细胞，如果反复多次输注B型RhD阳性悬浮红细胞后容易产生抗-B，则只能输注O型RhD阳性洗涤红细胞，作为献血者若因多次输注B型RhD阳性悬浮红细胞后产生了抗-B抗体，献血后血浆不可以输注给B型RhD阳性患者，凡是亚型，在输入血小板的时候都要选择与其相对应的正常血型，依据输血的三大原则，即自身输血和同型输血以及配合型输血[8]。

综上所述，因ABO血型抗原表达的复杂性，B3亚型的诊断必须慎重，一定要在排除异型输血或可能的疾病状态干扰后方可下结论，对于ABO亚型的鉴定可采用血清学和分子生物学相结合的方法进行综合判断[14]。输血时应根据是否存在抗-B和可供选择的血液资源，遵循相容性输注的基本原则，确保输血安全[15]。

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[15] 汪德清，李卉.临床输血-个案精选[M].北京：人民卫生出版社，2011：7-8.

（收稿日期：2020-10-26）