HPLC小贴士—超声波制备HPLC试样时的影响因素

文/DR.Stavros Kromidas

超声波制备HPLC试样时的小贴士// HPLC高效液相色谱试样的正确制备对检验分析的结果有着决定性的影响。本期HPLC小贴士告诉你使用超声波制备试样时的影响因素有哪些？

在实验室中，超声波洗涤技术不仅适用于玻璃器皿的清洗、乳化液和悬浮液的分离，还可用于制备HPLC的试验样本。而HPLC试样的正确制备对检验分析的结果有着决定性影响，故不可小觑超声波的后期影响。那超声波制备HPLC试样时的影响因素有哪些呢？

1.物理因素

（1）使用的是自来水还是蒸馏水？水位、水温的高低？例如：水位低时，能量大、洗涤能力强；水位高时，能量小、但分布均匀。一般情况下，当水温较高时样本的水解、重排或者成分发生改变的风险更大，这种情况在某些活性成分的检测中都能看到，如乙酰氨基酚、维生素、氨基酸和着色剂等。

（2）超声波洗浴池的材料、大小、几何形状（圆形还是方形）、壁厚及放置位置，如直接放在试验台上还是有橡胶垫减震隔离等。

（3）洗涤时器皿的材料（烧杯还是实验室器皿架）、放置位置？例如，烧杯是直接放在洗浴池中与其底部接触还是距底部有5~20 cm的高度。

2.不同的实验手法

（1）当样本比较复杂时（如淀粉），在超声波洗涤过程中是否摇动样本溶液。

（2）当达到超声波洗涤时间后，是否让样本在洗涤液中停留一段时间再将其拿出？例如，到了规定的5分钟洗涤时间，立即将样本取出还是停留15分钟后再将其取出。

（3）超声波洗涤池中的水是否长时间没有更换或者是否有在洗涤液中加入少量的异丙醇，以减缓藻类的形成等。

作为“稳健”的实验分析，最好对超声波制备HPLC试样带来的影响进行全面的检查。如果对样本的稳定性和重复再现性产生了影响，一般是上面提到的因素之一。