止痒搽剂质量控制标准的方法研究

叶吉明，杨景然，刘 宇，陈米林，冉忠梅*，周培德，柏永强

(1．云南省第一人民医院 药学部 ，云南 昆明650032；2．宁波工程学院 理学院，浙江 宁波315211；3．昆明赛诺制药股份有限公司 质量部，云南 昆明650051)

止痒搽剂是某医院皮肤科的外用经验方，临床上已使用多年.其主要由薄荷脑、麝香草酚、甘油，溶于75%乙醇制成.该搽剂具有清凉止痒作用，主要用于治疗蚊虫叮咬及瘙痒性皮肤病患者.作为医院的传统制剂，其具有疗效确切、价廉物美的优势.但对其质量标准的鉴定仍停留在对薄荷脑、麝香草酚等使用化学显色法所做的定性鉴别上，导致质量控制环节相对单一，不能对制剂质量进行全面有效管理和控制.目前，对薄荷脑、麝香草酚和乙醇等的相关测定报道[1-6]很多，但作为复方制剂协同处方，应该从止痒搽剂制剂自身入手，对制剂中的关键药物成分进行分析和评价，而非仅对单一成分进行监测.为此，采用毛细管气相色谱法对止痒搽剂进行系统稳定性考察，以期为止痒搽剂的质量控制、安全性和有效性提供科学依据.

1 仪器与方法

1.1 仪器与试剂

GC-2010气相色谱仪、FID检测器、氢气发生器、AO-20i自动进样器(均为日本岛津有限公司)；CA-2空气发生器(武汉科林普丰仪器有限公司)；CPA225D型电子天平(赛多利斯)；高纯氮气(昆明广瑞达特种气体有限责任公司，9.999%).

薄荷脑对照品(中国食品药品检定研究院，批号：100508-201603)；麝香草酚对照品(中国食品药品检定研究院，批号：110728-201707)；止痒搽剂(云南省第一人民医院制剂，批号：20181217；20181218；20181219.规格：100 mL/瓶，含麝香草酚、薄荷脑各 1 g).

萘、乙醇、无水乙醇(均为分析纯，天津市风船化学试剂有限公司)；正丙醇(分析纯，汕头市西陇化工厂有限公司，批号：0805312)；甘油(药用辅料，江西益普生药业有限公司，批号：20181201)；其他试剂为分析纯；水为纯化水.

1.2 方法

1.2.1 制剂样品的色谱条件

色谱柱：6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱，以聚乙二醇2000(或极性相近)为固定液.起始温度为 130 ℃，维持 8 min，再以 50 ℃/min 的速率升温至 200 ℃，维持 6 min.进样口温度 250 ℃，检测器温度 250 ℃，不分流进样，载气为氮气，流速 3.0 mL/min，进样体积 1 μL，按内标法以峰面积计算.

1.2.2 溶液的制备

1)内标溶液制备：取萘适量，精密称定，加无水乙醇溶解并定量稀释制成每 1 mL 中含 0.4 mg 的溶液，作为内标溶液.

2)对照品溶液制备：精密称定薄荷脑对照品 20 mg ，置于 50 mL 容量瓶中，然后加无水乙醇稀释至刻度，制成每 1 mL 含 0.4 mg 的溶液；精密称定麝香草酚对照品 20 mg，置于 50 mL 容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，制成每 1 mL 含 0.4 mg 的溶液；取甘油 25 mg，精密量取，置 50 mL 量瓶中，然后用无水乙醇稀释至刻度，制成每 1 mL 中含甘油 0.5 mg 的溶液；精密吸取薄荷脑对照品溶液、麝香草酚对照品溶液、甘油溶液和内标溶液各 5 mL ，置于 25 mL 容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，作为混合对照品溶液.

3)供试品溶液制备：精密吸取止痒搽剂(规格：100 mL/瓶，批号：20181217；20181218；20181219)2 mL，置于 50 mL 容量瓶中，再用无水乙醇稀释至刻度，摇匀.精密量取上述溶液 5 mL，置于 25 mL 容量瓶中，再加入内标溶液 5 mL 后，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀作为供试品溶液.

4)阴性样品溶液制备：麝香草酚阴性样品溶液制备.取薄荷脑 1 g、甘油 6 g，加75%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成 100 mL 溶液.精密吸取上述溶液 2 mL 置 50 mL 容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，制成麝香草酚阴性样品溶液.

薄荷脑阴性样品溶液制备：取麝香草酚 1 g、甘油 6 g，加75%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成 100 mL 溶液.精密吸取上述溶液 2 mL 置 50 mL 容量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，制成薄荷脑阴性样品溶液.

甘油样品溶液制备：取甘油 6 g ，加75%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制成 100 mL 甘油样品溶液.

1.2.3 测定乙醇的色谱条件

6%氰丙基苯基-94%二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱.起始温度为40 ℃，维持 2 min，以 3 ℃/min 的速率升至 65 ℃，再以 25 ℃/min 的速率升温至 200 ℃ ，维持 10 min；进样口温度 200 ℃，分流比为1∶1；检测器(FID)温度 220 ℃；载气为氮气，流速 3.0 mL/min；顶空进样，进样体积 1 μL，平衡温度 85 ℃，平衡时间 20 min.

2 试验结果

2.1 系统适用性试验

按1.2.2项下方法配制各溶液，按1.2.1项下色谱条件进样分析，记录色谱图，见图1～图9.结果表明，麝香草酚对照品溶液、薄荷脑对照品溶液、甘油样品溶液、内标溶液、供试品溶液(无内标)、供试品溶液(有内标)、麝香草酚阴性样品溶液和薄荷脑阴性样品溶液各峰形良好，分离度大于1.5，理论塔板数按薄荷脑、麝香草酚峰计算不低于 1 500.

图1 麝香草酚对照品溶液色谱图

图2 薄荷脑对照品溶液色谱图

图3 甘油样品溶液色谱图

图4 内标溶液色谱图

图5 供试品溶液(无内标)色谱图

图6 供试品溶液(有内标)色谱图

图7 麝香草酚阴性样品溶液色谱图

图8 薄荷脑阴性样品溶液色谱图

图9 混合对照品溶液色谱图

2.2 标准曲线的绘制

分别精密吸取薄荷脑、麝香草酚对照品溶液(0.4 mg/mL)1，2，5，8，10 mL 置 25 mL 量瓶中，加内标溶液 5 mL，加无水乙醇定容至每 1 mL 含薄荷脑、麝香草酚0.016，0.032，0.080，0.129，0.162 mg 的溶液.精密吸取上述溶液各 1 μL，按1.2.1项下色谱条件进样分析，以峰面积(Y)为纵坐标，质量浓度(X)为横坐标，进行线性回归计算，得到薄荷脑和麝香草酚回归方程分别为：Y=10.855X-0.021 4，R2=0.999 5；Y=12.304X-0.032 4，R2=0.999 4.

结果表明，薄荷脑、麝香草酚质量浓度在0.016～0.161 mg/mL 内与峰面积呈良好线性关系.

2.3 精密度试验

取对照品溶液1 μL，在上述色谱条件下，重复进样5次，记录峰面积，计算得到麝香草酚、薄荷脑峰面积的RSD分别为0.33%和0.16%.

2.4 重复性考察

取批号为20181217制剂样品，重复进样6次，记录峰面积，计算得到麝香草酚、薄荷脑峰面积的RSD分别为0.80%和0.21%.

2.5 稳定性考察

取供试品溶液(批号：20181217)于室温下存放，分别于0，2，4，6，24 h 进行测定，得到麝香草酚、薄荷脑峰面积的RSD分别1.14%和0.40%.

2.6 加样回收试验

2.6.1 麝香草酚加样回收试验

精密吸取按1.2.2项下方法制备的麝香草酚阴性样品溶液 5 mL，置 25 mL 量瓶中，共6份，分别精密加入4，5，6 mL 麝香草酚对照品溶液和 5 mL 内标溶液，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀.精密吸取上述溶液各 1 μL，按1.2.1项下色谱条件进样分析，结果见表1.

2.6.2 薄荷脑加样回收试验

精密吸取按1.2.2项下方法制备的薄荷脑阴性样品溶液 5 mL，置 25 mL 量瓶中，共6份，分别精密加入4，5，6 mL 薄荷脑对照品溶液和 5 mL 内标溶液，用无水乙醇稀释至刻度.精密吸取上述溶液各 1 μL，按1.2.1项下色谱条件进样分析，结果见表2.

表1 麝香草酚加样回收试验结果

表2 薄荷脑加样回收试验结果

2.7 样品质量分数测定及限度确定

取止痒搽剂(规格：100 mL/瓶，批号：20181217；20181218；20181219)，按1.2.2项下方法配制溶液，按1.2.1项下色谱条件进样分析，其质量分数测定结果见表3、表4.

表3 3批止痒搽剂中薄荷脑的质量分数测定

2.8 校正因子测定

准确量取恒温至 20 ℃ 的无水乙醇 5 mL ，2份平行.置于 100 mL 量瓶中，准确加入恒温至 20 ℃ 的正丙醇(内标物质)5 mL，加水稀释至刻度，摇匀，精密吸取该溶液 1 mL，并置于 100 mL 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液.准确吸取上述溶液 3 mL，置于 10 mL 顶空进样瓶中，密封，按1.2.3项下测定乙醇的色谱条件，进样分析，每份对照品溶液各进样3次，测定其峰面积，并计算平均校正因子.由计算结果可知，校正因子相对标准偏差为1.3%.

2.9 乙醇体积分数测定

精密吸取恒温至 20 ℃ 的供试品适量(相当于乙醇 5 mL)，置于 100 mL 量瓶中，准确加入恒温至 20 ℃ 的正丙醇 5 mL，加水稀释至刻度，摇匀，准确吸取该溶液 1 mL，置于 100 mL 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液.精密吸取上述溶液 3 mL，置 10 mL 顶空进样瓶中，密封，按1.2.3项下测定乙醇的色谱条件，进样分析，测定峰面积，按内标法以峰面积计算，结果见表5.

3 小结

本研究表明，采用毛细管气相色谱法能够同时测定薄荷脑、麝香草酚、甘油和乙醇的含量，且方法简便、准确，精密度好、准确度高，具有专属性和耐用性.此外，无论是理论塔板数还是分离度对薄荷脑、麝香草酚的分离能力都较为适合，且分析时间短，能够快速准确地进行定性和定量分析，有利于制剂质量的控制.

医院制剂有着强烈的“地方特色”，其作为医院使用多年的协定处方，具有临床疗效确定、价格便宜等优势.目前，由于医院制剂大多为品种多、数量少、周期短，为避免在制剂制备过程中出现“短板”，应该对制剂质量标准、工艺、生产和使用等过程进行严格管控，以保证其临床疗效和安全[7].而在现行制剂质量标准中，对质量的控制方法简单、粗糙，长久以往，将大大影响临床疗效和制剂的发展.因此，对制剂质量标准进行提升，进一步保障患者安全用药[8]是当务之急和必然趋势.