MMP-9、NLRP3、热休克蛋白70在子痫前期患者血清表达及相关性

聂艳琴 许小华 张 兰

联勤保障部队第九〇九医院,厦门大学附属东南医院(漳州，363000)

子痫前期属较严重的产科并发症，临床症状常表现为妊娠20周后产妇进行性加重的蛋白尿、高血压、水肿等，可导致母婴重要器官功能损伤，且随着疾病进展围生儿死亡风险增加[1]。临床对子痫前期的发病机制尚不完全明确。基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在血管重铸、胎盘滋养层细胞浸润中有重要意义[2]。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)，在机体炎症反应中有关键性作用[3]。热休克蛋白70(HSP70)属细胞保护因子，参与细胞生物学行为过程[4]。本研究分析MMP-9、NLRP3、HSP70在子痫前期患者血清中的表达及其关系，为临床诊治提供参考。

1 材料与方法

1.1 研究对象

选取2018年1月—2019年12月本院产科住院的子痫前期患者120例(子痫前期组)。纳入标准：符合子痫前期诊断标准[5]。排除标准：合并糖尿病；合并产科并发症及合并症；胎膜早破、存在感染征象；合并心、肝、肺功能不全；存在精神障碍和沟通障碍。另选同期产前检查正常妊娠产妇100例为对照组。所有孕妇及家属对本次研究均知情并签署知情同意书。本研究获院伦理委员会批准通过。

1.2 检测方法

抽取产妇清晨空腹静脉血分离血清。血清MMP-9、HSP70水平酶联免疫吸附试验法检测。实时荧光定量RT-PCR检测血清中NLRP3 mRNA表达，2-△△Ct法计算NLRP3 mRNA表达量。NLRP3引物序列：上游：5’-AAAGAGATGAGCCGAAGTGGG-3’，下游：5’-TCAATGCTGTCTTCCTGGCA-3’；内参基因GAPDH引物序列：上游：5’-AACAGCCTCAAGATCATCAGCAA-3’，下游：5’-GACTGTGGTCATGAGTCCTTCCA-3’。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 一般临床资料

子痫前期组年龄(30.2±1.5)岁，孕周(33.2±1.6)周，体质指数(BMI)(25.8±1.0)kg/m2；早发型65例，晚发型55例；轻度49例，重度71例；初产妇67例，经产妇53例；有子痫前期家族史38例，有高血压家族史30例；有水肿症状78例，尿蛋白水平+59例，++36例，+++25例。对照组年龄(31.8±1.2)岁，孕周(33.5±1.5)周，BMI(25.6±1.2)kg/m2。两组年龄、孕周、BMI比较无差异(P>0.05)。

2.2 两组血清NLRP3mRNA、MMP-9、HSP70水平

如表1所示，子痫前期组血清NLRP3 mRNA表达量、HSP70水平高于对照组，MMP-9水平低于对照组(P<0.05)。

表1 两组血清NLRP3mRNA、MMP-9、HSP70水平比较

2.3 不同类型子痫前期患者血清NLRP3mRNA、MMP-9、HSP70水平

如表2所示，子痫前期患者中，早发型血清NLRP3 mRNA表达量、HSP70表达水平高于晚发型，MMP-9水平低于晚发型(P<0.05)；重度子痫前期患者血清NLRP3 mRNA表达量、HSP70表达水平高于轻度子痫前期患者，MMP-9水平低于轻度子痫前期患者(P<0.05)。

表2 不同类型子痫前期患者血清NLRP3mRNA、MMP-9、HSP70水平比较

2.4 不同临床特征子痫前期患者NLRP3mRNA、MMP-9、HSP70水平

如表3所示，NLRP3 mRNA、MMP-9、HSP70表达水平在不同年龄、BMI、孕产次子痫前期患者间无差异(P>0.05)，而在患者存在家族史、高血压家族史、尿蛋白水平等方面存在差异(P<0.05)。

表3 不同临床特征子痫前期患者NLRP3mRNA、MMP-9、HSP70表达比较

2.5MMP-9、NLRP3、HSP70之间相关性分析

如图1所示，MMP-9、NLRP3、HSP70行Pearson相关性分析，MMP-9与NLRP3负相关(r=-0.212,P=0.020)，MMP-9与HSP70负相关(r=-0.226,P=0.013)，NLRP3与HSP70正相关(r=0.199,P=0.023)。

图1 MMP-9、NLRP3、HSP70相关性分析

3 讨论

目前研究认为[6]子痫前期发生与胚胎着床期母体对同种异体胚胎免疫耐受不全、胎盘形成期滋养细胞侵袭子宫肌层能力不足以及孕晚期母体血管内皮功能障碍和过度全身炎症反应相关。

MMP是细胞外基质蛋白水解酶，其中MMP-9属于一种滋养细胞所分泌的最为有效的蛋白水解酶，含量高低与滋养细胞侵袭能力、血管重铸相关[7-8]。在妊娠过程中，胚胎滋养层细胞会侵入至母体蜕膜组织及蜕膜组织中的螺旋动脉，以代替血管内皮细胞建立母婴营养交互循环，是妊娠顺利进行的必须环节[9]。有研究认为[10]，滋养细胞自身不可溶解或者吞噬基质，主要依赖于MMP-9的分泌量，进而选择性的将子宫内膜基质成分、基底膜水解，当MMP-9的分泌量减少时会到导致滋养细胞浸润不足，进而影响滋养细胞浸润子宫内膜功能，最终导致子痫前期的发生。本研究结果显示子痫前期患者血清中MMP-9低表达，且与患者子痫前期家族史、高血压家族史、尿蛋白水平相关，与蒋韬等[11]研究中认为MMP-9参与重度子痫前期的发生相关的研究结果一致。

核苷酸结合寡聚化结构域样受体(NLR)家族会对IL-1β等可溶性促炎因子产生诱导作用，在机体炎症反应、自身免疫综合征中具有重要的作用[12]。NLRP3属NLR家族中较重要的成员之一，当其被激活后会使ASC等接头蛋白催化caspase-1，当caspase-1被活化后会促进IL-1β成熟，当IL-1β异常表达会引发产妇发生内皮炎症反应，进而对螺旋动脉重塑、滋养层入侵[13]。临床有研究发现，当NLRP3被激活后可导致子痫前期的发生[14-15]。本研究中子痫前期患者血清中NLRP3高表达，且与患者子痫前期家族史、高血压家族史、尿蛋白水平相关，与C Weel I等[16]研究中认为NLRP3参与重度子痫前期的发生相关的研究结果一致。

HSP属于热休克反应在转录过程中所合成的一组蛋白，在多种不利于自身因素的刺激下会促进细胞快速翻译合成，进而激活机体内源性保护机制，最终起到抗应激损伤的作用[17]。HSP70属HSP家族成员之一，机体正常状态下细胞内HSP70含量较少，当机体受到外界感染、炎症因子刺激、组织损伤等可促进HSP70过度表达，以维持细胞正常功能[18]。临床研究认为[19]，HSP70的机体内源性保护机制包括稳定细胞膜、抗氧化、促进正常蛋白合成、辅助蛋白质正确折叠以及抑制细胞凋亡等。本研究结果显示，子痫前期患者血清中HSP70高表达，且与患者子痫前期家族史、高血压家族史、尿蛋白水平相关，与刘霞[20]研究中认为HSP70参与重度子痫前期的发生结果一致。

本文相关性分析显示，MMP-9与NLRP3、HSP70均呈负相关，NLRP3与HSP70呈正相关，说明NLRP3、MMP-9、HSP70存在一定的相关性，可能共同参与子痫前期的发生发展。

综上所述，NLRP3、MMP-9、HSP70在子痫前期患者血清中呈异常表达，且与患者子痫前期家族史、高血压家族史、水肿、尿蛋白水平有关，为临床上子痫前期的诊治提供理论参考。