贺州市规模养殖场种猪伪狂犬病毒抗体水平检测与分析

虞与理 王孝德 李志贤 禹婷婷 李而珍/广西贺州市动物疫病预防控制中心 542899

伪狂犬病(Pseudorabies,PR) 是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的多种动物共患的急性传染病，广泛分布于我国各个地方，该传染病对整个养猪业具有极为严重的危害性。临床上主要表现为妊娠母猪流产、产死胎、木乃伊胎及弱仔，新生仔猪出现明显的神经症状以及腹泻死亡，育肥猪发热和呼吸道等症状。PRV 可以通过种猪交配以垂直传播的方式感染新生仔猪，因此做好种猪的PR 防控尤为重要。目前疫苗免疫是猪PR 中、高风险地区防控及规模猪场净化的主要手段。大量文献研究表明PRV gB 抗体水平能有效抑制猪场PR 的发病率。为了进一步全面了解贺州市规模养殖场种猪PRV 疫苗免疫效果及gB 抗体水平，从贺州市8 个规模种猪场的免疫猪群中随机采集480 份血清样品进行PRV gB 抗体检测与分析，其结果有助于为种猪PR 的防控及净化提供依据，以便为规模养殖场提供科学的生物防疫指南。

1 材料方法

1.1 检测试剂猪伪狂犬病毒gB 抗体检测试剂盒，由北京金诺百特科技有限公司生产。

1.2 血清样品480 份血清样品采集时间为2020 年6～8月，分别采自贺州市不同地区8 个规模种猪场（伪狂犬野毒抗体均为阴性）的后备母猪、经产母猪和种公猪。疫苗使用：武汉科前活疫苗，免疫程序：后备母猪（1日龄鼻滴，35日龄），经产母猪和种公猪每隔4 个月补免一次。

1.3 主要器材帝肯（上海）贸易有限公司 sunrise 酶标仪、上海ZDP-A2080 电热恒温培养箱、Thermo Scientific MicroCL 21 离心机、BRAND 单道移液器(20～200 uL)、BRAND 多道移液器(20～200uL)。

1.4 检测方法采用间接ELISA 试验，检测程序严格按照北京金诺猪伪狂犬病毒gB 抗体检测试剂盒使用说明进行，所有检测工作均在贺州市动物疫病预防控制中心血清学实验室完成。

1.5 结果判定当阴性对照OD450值≥0.7、阳性对照OD450值≤0.4，实验有效。S/N 值≤0.6 判为阳性；S/N 值大于等于0.6判为阴性。S/N 值=样品的OD450/阴性对照的平均 OD450值。

2 结果

通过抽检贺州市不同地区的8 个规模养殖场480份种猪血清，PRV gB 抗体平均阳性率为76.7%，其中后备母猪PRV gB 抗体阳性率最低仅为66.3%，种公猪PRV gB 抗体阳性率为76.9%，经产母猪PRV gB 抗体阳性率最高为86.9%（见表2），不同规模养殖场之间种猪的PRV gB 抗体阳性率差异较大（见表1）。

表1 规模场种猪PRVgB 抗体检测情况

表2 规模猪场后备母猪、经产母猪、种公猪PRVgB 抗体情况

3 讨论

目前，我国用于预防伪狂犬病毒的疫苗主要是PRV gE基因缺失苗，该疫苗的使用可以通过ELISA 方法区分免疫猪和自然感染猪 。北京金诺PRV gB 抗体检测试剂盒也是一种极其敏感的 PRV 全抗体检测方法，非常微量的抗体水平就能够产生阳性结果。此次检测的PRV gB 抗体猪群均为PR 野毒抗体阴性猪群，因此 PRV gB 抗体水平能够真实反映疫苗免疫效果。

我们在贺州市地区抽检的8 家规模猪场480 份种猪血清，PRV gB 抗体平均阳性率为76.7%，略高于之前报告的广西部分地区猪群猪伪狂犬病免疫抗体阳性率71.25%。其中后备母猪PRV gB 抗体阳性率最低仅为66.3%，经产母猪PRV gB 抗体阳性率最高为86.9%，与段正赢等人报道PRV gB 抗体阳性率最高的猪为后备母猪存在差异，这可能与规模猪场经产母猪每年普免3～4 次有关，经过多次免疫，抗体效价较高。不同规模养殖场种猪PRV gB 抗体阳性率差异较大，其中最低仅为18.3%，最高的为100.0%，这些数据说明贺州市近年来对猪PR净化成效已经达到了一定的高度，但是仍然存在不尽人意的地方。例如H 场种猪整体的PRV gB 抗体阳性率极低，并且后备母猪和种公猪的PRV gB 抗体阳性率为0，这样长期以来也不利于仔猪出生后获得充足的母源抗体，可能造成仔猪会易感PRV 野毒，从而给猪场造成严重的经济损失。为此对规模化猪场进行实时动态监测PRV 抗体水平或制定科学的疫苗免疫制度预防策略显得尤为迫切。另外检测数据表明同一个规模养殖场的后备母猪、经产母猪和种公猪之间的PRV gB 抗体也存在差异。究其原因，猪场技术员是否严格按照免疫程序，按时按量对猪群进行免疫，值得我们去考虑。要想达到预期的疫苗效果，需要把握细节方面，例如要让疫苗恢复常温后才能接种，免疫前要对被免疫猪群进行健康检查，然后要选择合适的针头，免疫时要及时更换针头等，同时，要加强监测，掌握猪群的伪狂犬疫苗抗体水平及野毒情况，对疫苗抗体水平低下的个体或抗体水平层次不齐的猪群进行补免。整体而言，贺州市规模养殖场种猪伪狂犬疫苗免疫效果比较理想,免疫程序合理。

4 结语

2012 年国务院办公厅颁布的《国家中长期动物疫病防治规划 2012—2020》中要求，到 2020 年全国所有种猪场猪伪狂犬病要达到净化标准。虽然现阶段我国的免疫水平相当高，防治技术也比较成熟，但该病并没有得到彻底的根治，形势依然严峻。因此，加强疫苗，是预防和控制猪伪狂犬病的根本措施，猪场要制定科学的、适合自己的免疫程序，采取严格的生物安全措施，加强猪场饲养管理，加强消毒，并通过PRV gB 抗体的监测工作，为猪场的安全生产保驾护航。