运脾颗粒对功能性消化不良小鼠胃肠运动和胃泌素、抑胃肽的影响

陈燕云，李初谊，李 竞

1 中国人民解放军96604部队医院,甘肃 兰州730000;2 中国人民解放军联勤保障部队940医院；3 甘肃省中医院

功能性消化不良（functional dyspepsia，FD）是一种常见的慢性消化道疾病，生物化学和内镜检查无器质性病理改变，主要临床症状为餐后饱胀感、早饱、上腹痛和上腹烧灼感等。目前主要认为FD 是胃运动功能障碍、胃感觉过敏、精神社会因素和幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori，Hp）感染等一系列病理生理因素综合作用的结果，其他病因及其作用机制尚未明确［1］。现代医学对FD的治疗主要应用促动力药、调整内脏感觉药、酸抑制剂、抗Hp 和抗抑郁剂［2］。根据FD 的临床症状，中医学将其归于“痞满”“胃脘痛”等范畴［3］。《素问·至真要大论篇》曰：“太阴之复，厥气上行……心胃生寒，胸膈不利，心痛痞满。”《伤寒论·辨太阳病脉证并治》曰：“但满而不痛者，此为痞。”《景岳全书·痞满》曰：“凡有邪有滞而痞者，实痞也；无邪无滞而痞者，虚痞也。”现代医家多认为脾胃虚弱是该病发病的根本，并且与肝关系密切［4］。

运脾颗粒是王自立主任医师经验方。本研究采用饥饱失常和夹尾激怒法综合造模，观察运脾颗粒对FD 模型小鼠胃肠运动的影响，并从分子水平探讨运脾颗粒的作用机制。

1 材料与方法

1.1 动物SPF 级KM 种雄性小鼠100 只，体质量（22±2）g，由甘肃中医药大学动物实验中心SPF级实验室提供，实验动物合格证号：SCXK（甘）2011-0001。

1.2 药品及试剂运脾颗粒（甘肃省中医院，批号：20110906，规格：60 g/袋）。药物组成：党参10 g，茯苓8 g，白术10 g，石菖蒲6 g，佛手6 g，枳壳8 g，炒麦芽6 g，仙鹤草6 g。吗丁啉（西安杨森制药有限公司，批号：H1091000，规格：10 mg/片）；GAS 与GIP 酶联免疫分析（ELISA）试剂盒（上海源叶生物科技有限公司，批号：S0000-48T）；活性碳半固体营养糊［69-70］：1O g 羧甲基纤维素钠，溶于250 mL 蒸榴水中，分别加入奶粉16 g、糖8 g、淀粉8 g、活性炭末2 g，搅拌均匀，配制成300 mL约300 g的黑色半固体糊状物。

1.3 设备Benchmark Plus 型连续波长酶标仪（美国）；RB-5A 型电热恒温水浴箱（上海）；800 型离心机（上海）；BA-200型电子天平（美国）；BILON-86-150W型超低温冰箱（德国）。

1.4 方法

1.4.1 造模方法 根据文献［5-7］方法，采用夹尾激怒法和饥饱失常综合造模：将100 只小鼠适应性喂养3 天后随机抽取25 只作为空白对照组，正常饲养，提供充足的水和饲料，其余75 只小鼠单日给予充足的水和饲料，双日禁食不禁水，两天秤体质量1 次，同时每日用卵圆钳夹小鼠尾部外端1/3处，使其烦躁后与周围小鼠厮打，每次刺激1 h，每天4 次，造模过程中若小鼠厮打受伤则用碘伏涂抹伤口消毒。连续造模14 天后小鼠逐渐出现皮毛干枯发黄、进食量减少、粪便质稀臭秽、身体蜷缩少动、拱背、反应迟缓、体质量下降并加重表示造模成功。

1.4.2 动物分组及用药 将造模成功小鼠随机分为模型对照组、运脾颗粒组和吗丁啉组各25只。依据文献［8］，根据成人与小鼠体表面积比换算小鼠用药剂量，空白对照组和模型对照组分别灌胃生理盐水1 mL，运脾颗粒组灌胃运脾颗粒1 g/kg，吗丁啉组灌胃吗丁啉39 mg/kg，每日2次，各组连续灌胃14天。

1.4.3 检测指标

1.4.3.1 一般状况 观察小鼠治疗前后体质量、饮食、皮毛、反应、便质等，每2天称重1次，记录饮食量和体质量。

1.4.3.2 胃残留率 小鼠灌胃14天后，禁食12 h，于第2日早8 点各组小鼠称重后灌胃活性炭半固体营养糊，1 mL/20 g，0.5 h后依次断头取血，将胃摘取后结扎贲门和幽门并称重，然后从胃大弯处剪开，清水中漂洗干净，用吸水纸吸干水分，称重。计算胃内残留率：

胃内残留率（%）=（全胃重量-胃净重量）/灌服半固体糊重量×100%

1.4.3.3 小肠推进率 处死小鼠后在胃幽门与十二指肠连接处剪断，分别量取小肠长度，和墨汁在小肠中的长度，计算小肠推进率：

小肠推进率（%）=活性炭半固体营养糊在小肠中的长度（cm）/小肠全长（cm）×100%

1.4.3.4 GAS 和GIP 含量 小鼠断头取血编号后，以离心半径13.5 cm，3000 r/min 离心10 min，取血清，-20℃保存，待测。

1.5 统计学方法采用SPSS 15.0 统计软件分析数据，以±s表示，多组间比较采用单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般状况空白对照组小鼠皮毛色白光泽，反应灵敏，活动较多，食欲好，大便为颗粒状，体质量逐渐增加；造模组小鼠毛色发黄干枯，食欲逐渐减退，体质量下降，粪质稀而臭秽，活动较少，喜扎堆埋头，轻微刺激易打斗；吗丁啉组和运脾颗粒组小鼠治疗后食欲好转，体质量上升，毛色恢复光亮，活动增加，精神好转，粪质成形呈颗粒状。

2.2 体质量造模结束后空白对照组小鼠体质量大于造模小鼠，差异有统计学意义（P＜0.05）；治疗后运脾颗粒组和吗丁啉组小鼠体质量均上升，差异有统计学意义（P＜0.05），模型对照组小鼠无明显变化；运脾颗粒组和吗丁啉组小鼠体质量相比差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 各组小鼠体质量变化情况（±s） g

表1 各组小鼠体质量变化情况（±s） g

注：★表示与空白对照组比较，P＜0.05；▲表示与模型组比较，P＜0.05；※表示与运脾颗粒组比较，P＞0.05

组别空白对照组模型对照组运脾颗粒组吗丁啉组鼠数25 25 25 25治疗前25.16±1.32 21.30±0.78★21.11±0.69▲20.87±0.61▲※治疗后27.47±0.77 22.39±0.81★25.75±0.58▲25.13±0.77▲※

2.3 小鼠胃内残留率模型对照组小鼠胃内残留较高，排空率低于空白对照组小鼠，差异有统计学意义（P＜0.05）；与模型对照组相比，运脾颗粒组和吗丁啉组小鼠胃内残留低，排空率升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；运脾颗粒组和吗丁啉组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

2.4 小肠推进率与空白对照组相比，模型对照组小鼠小肠推进率下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；与模型对照组比较，运脾颗粒组和吗丁啉组小肠推进率提高，差异有统计学意义（P＜0.05）；运脾颗粒组和吗丁啉组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 各组小鼠胃内残留率及小肠推进率（±s） %

表2 各组小鼠胃内残留率及小肠推进率（±s） %

注：★表示与空白对照组比较，P＜0.05；▲表示与模型组比较，P＜0.05，※表示与运脾颗粒组比较，P＞0.05

组别空白对照组模型对照组运脾颗粒组吗丁啉组鼠数25 25 25 25胃内残留率47.61±0.04 69.00±0.01★47.50±0.05▲46.79±0.07▲※小肠推进率70.50±0.01 56.00±0.03★68.50±0.01▲67.20±0.01▲※

2.5 GAS 与GIP 含量与空白对照组比较，模型对照组GAS 含量降低，GIP 含量升高，差异均有统计学意义（P＜0.05）；与模型对照组相比，运脾颗粒组和吗丁啉组GAS 含量升高，GIP 含量降低，差异均有统计学意义（P＜0.05）；运脾颗粒组和吗丁啉组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表3。

表3 各组小鼠GAS及GIP含量（±s） pg/mL

表3 各组小鼠GAS及GIP含量（±s） pg/mL

注：★表示与空白对照组比较，P＜0.05；▲表示与模型组比较，P＜0.05，※表示与运脾颗粒组比较，P＞0.05

组别空白对照组模型对照组运脾颗粒组吗丁啉组鼠数25 25 25 25 GAS含量0.38±0.29 0.08±0.02★0.31±0.24▲0.33±0.19▲※GIP含量0.07±0.12 0.34±0.28★0.06±0.15▲0.06±0.22▲※

3 讨论

FD 病机主要是“本虚标实”，以脾胃亏虚为本，以气郁，痰浊、血瘀、食积和湿邪为标。饮食和情志是FD 最重要的致病因素。长期饮食饥饱失常、饮食无规律、嗜食辛辣之品是导致脾胃亏虚的主要因素；而易怒、抑郁则会引起肝气郁滞，肝气横逆犯胃，肝胃不和，出现嗳气、吞酸、胃脘胀满等症。现代病理生理学指出胃肠道运动主要受神经和胃肠激素两者共同调节，脑-肠肽进入血液，影响胃和小肠等平滑肌的收缩，在肠神经系统中兴奋性肽类（如胃泌素、缩胆囊素等）和抑制性肽类（如抑胃肽、脑啡肽等）相互抗衡，调节胃肠道运动。现代医学对FD 的研究主要包括对胃肠动力减弱和胃肠激素分泌失常等因素的研究。其治疗主要是促进胃肠动力、抑酸和清除Hp［9］。中医对FD 的治疗，标本兼顾，辨证论治，主要以健补脾胃固后天之本为主，同时或疏肝行气，或荡涤痰浊，或化瘀，或消积化滞，或祛除湿邪等。

王自立教授治疗脾胃病主张“以运为健、以运为补”，治疗原则为“健脾先运脾，运脾必调气”，“运脾”思想体现了脾胃的生理特点。脾胃是人体饮食物消化吸收的主要脏腑，其中受纳腐熟水谷，以及运化水谷精微是脾胃的主要生理功能。而脾胃功能也主要通过脾胃气机升降来实现，脾气以升为本，胃气以降为基，脾升胃降构成全身气机升降的枢纽，程杏轩言；“食物入胃……得脾气一吸，则胃气有助，食物之精，得以尽留”，指出胃的受纳腐熟水谷功能又赖脾气的健运正常，正如《素问·禁刺论》所说：“脾为之使，胃为之市”，所以脾气升清的功能又有助于胃的受纳和降浊。脾气虚则运化无力，胃的受纳和降浊功能受影响，疾病容易由虚致实。《素问·阴阳应象大论》曰：“清气在下，则生飧泄，浊气在上，则生膹胀”，又有《诸病源侯论·脾胃病诸侯》曰：“胃受谷而脾磨之，二气平调，则谷化而能食，若虚实不等，水谷不消，故令腹内虚胀而泄，不能饮食”，王孟英谓：“胃气壅滞，脾运艰难”，指出脾胃气机不利，则病由中生，同时脾胃在疾病的发生和发展过程中亦相互影响；《素问·太阴阳明论篇》曰：“实则阳明，虚则太阴。”在治疗中，不论何种病因引起的脾胃功能失常，均主要以脾胃气机失调为主，若一味补益脾胃，则会滋腻碍胃，使壅滞胀满更甚。运脾思想即强调恢复和加强脾胃气的运动，只有脾胃气机升降正常，升降有力，气机调畅，则其生理功能才能正常运行，因此王自立教授强调“以运为健，以运为补”，运脾即是通过恢复脾胃升降之力，从而达到治本除标之功［10-11］。