血清NO、LXA4、Apelin表达水平对糖尿病视网膜病变严重程度的判定价值

丁红萍，季晓燕，陈之阳，黄 江

苏州大学附属第二医院眼科，江苏苏州 215000

糖尿病(DM)是临床常见的代谢性疾病，其主要并发症为微血管及大血管病变，其中微血管病变的发生率较高[1]。糖尿病视网膜病变(DR)是最常见的DM微血管并发症之一，据统计，超过60%的DM患者会并发DR[2]。目前DR的发病机制尚未完全阐明，有研究表明，一氧化氮(NO)、脂氧素A4(LXA4)、脂肪因子(Apelin)可能与DM及其多种并发症的严重程度相关[3-5]，但目前该3项指标与DR的关系仍鲜有报道。本研究通过检测DR患者血清NO、LXA4、Apelin表达水平，分析其与DR严重程度之间的关系，旨在为DR的诊断及病情监控提供依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取本院2017年1月至2019年2月收治的85例DR患者作为观察组，另选择同期80例非DR的DM患者作为对照组，50例体检健康者作为健康组。纳入标准：(1)患者符合2型DM诊断标准；(2)入院前患者无眼部手术及外伤史；(3)DR患者经眼底荧光血管造影检查确诊为视网膜病变；(4)患者年龄≤70岁；(5)患者精神正常并配合本研究。排除标准：(1)患者合并恶性肿瘤疾病；(2)患者合并脉络膜脱离、青光眼、角膜新生血管等眼部疾病；(3)存在严重心、肝、肾功能异常；(4)患者脑血流图、CT扫描检查发现视网膜之外的血管出现动脉粥样硬化等并发症；(5)存在严重代谢综合征；(6)主动申请退出本研究。观察组男39例，女46例，平均年龄(60.29±5.38)岁，平均DM病程(21.38±6.49)个月，平均体质量指数(BMI)为(24.73±2.09)kg/m2，平均收缩压(124.38±13.28)mm Hg，平均舒张压(76.59±6.94)mm Hg；对照组男36例，女44例，平均年龄(60.75±6.14)岁，平均DM病程(21.72±7.13)个月，平均BMI(24.71±2.13)kg/m2，平均收缩压(125.23±14.19)mm Hg，平均舒张压(77.19±7.43)mm Hg；健康组男22例，女28例，平均年龄(61.29±8.32)岁，平均BMI(24.12±1.93)kg/m2，平均收缩压(121.89±15.12)mm Hg，平均舒张压(78.19±8.97)mm Hg。受试者组间一般资料比较，差异无统计学意义，具有可比性(P>0.05)。本研究经医院伦理委员会批准，所有研究对象均签署知情同意书。

1.2方法 所有受试者在入组后采集空腹静脉血，采用硝酸还原酶比色法检测血中NO水平(试剂盒，意大利PANERA公司，批号：AAPR194-1)，采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测患者血中LXA4(试剂盒，德国IBL公司，批号：IC-LXA4-Ge)、Apelin(试剂盒，武汉CUSABIO公司，批号：CSB-E14334h-1)水平，检测前遵照检验项目标准操作规程并使用原厂试剂进行操作和质控，严格遵照试剂盒说明书进行检测操作并绘制标准曲线行定量分析。并在患者入组后对观察组患者DR病情严重情况进行评估，包括Ⅰ期：后极部位中心出现小出血点及微血管瘤；Ⅱ期：出现出血斑及黄白色硬性渗出；Ⅲ期：有白色棉绒斑并伴随出现出血斑；Ⅳ期：眼底出现纤维增殖和新生血管；Ⅴ期：眼底玻璃体出血，出现纤维增殖和新生血管；Ⅵ期：眼底有纤维增殖和新生血管，并出现视网膜脱离显像。

2 结 果

2.13组各指标检测结果比较 观察组NO及Apelin水平明显高于对照组和健康组，LXA4水平明显低于对照组和健康组，且差异均有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 3组各指标检测结果比较

2.2观察组不同病情严重程度患者各指标检测结果比较 Ⅰ～Ⅲ期DR患者NO及Apelin水平明显低于Ⅳ～Ⅵ期患者，LXA4水平明显高于Ⅳ～Ⅵ期患者，且差异均有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 观察组不同病情严重程度患者各指标检测结果比较

2.3DR严重程度与NO、Apelin及LXA4表达水平的相关性分析 DR严重程度与NO和Apelin的表达水平呈正相关(r=0.863、0.541，P<0.001)，与LXA4表达水平呈负相关(r=-0.869，P<0.001)，见表3。

表3 DR严重程度与NO、Apelin及LXA4表达水平的相关性分析

3 讨 论

DR是常见的DM微血管并发症之一，其临床症状主要有视物模糊、视力下降等，严重者会出现失明[6]。眼底检查是临床常用的确诊方法，但普及率较低[7]。随着血清学检查技术在疾病诊断中的应用越来越广泛，探寻与DR病情相关的血清特异性指标对DR的筛查具有重要意义[8]。

DR病情的发展主要体现为微血管内皮基底膜变厚以及微循环发生障碍。研究表明，毛细血管管腔变窄会导致血流改变，从而使视网膜出现缺氧缺血状态并促进新生血管的形成[9-10]。有研究发现，抑制NO可以避免视网膜出现缺血损伤，提示NO可能参与DR的发生发展[11]。Apelin在葡萄糖稳态维持、免疫调节等方面均发挥重要作用，而LXA4具有较强的抗炎作用[12-13]。

本研究结果显示，与对照组和健康组相比，观察组NO及Apelin水平升高，而LXA4水平显著降低，提示患者NO、Apelin以及LXA4水平对DR的发生发展具有一定的影响。进一步对DR患者进行分析发现，随着患者病情加重，其血清NO及Apelin水平逐渐升高，而LXA4水平则明显降低，相关性分析结果显示，DR严重程度与血清NO及Apelin水平呈正相关(r=0.863、0.541，P<0.001)，而与LXA4水平呈负相关(r=-0.869，P<0.001)。NO作为血管活性物质，属于内皮依赖性血管收缩因子和血管舒张因子，有研究表明，DR患者血清NO水平异常升高可能导致患者体内一氧化氮合酶活性增加，加速患者视网膜出现缺血性损伤[14]。有研究报道，血清Apelin与血管紧张素Ⅱ通过影响氧化应激对血管内皮造成损伤，导致血管腔狭窄，限制视网膜组织血流，最终导致DR的发生以及病情加重[15]，与本研究结果一致。此外，有研究报道，LXA4水平的降低则可能导致核因子κB水平被有效抑制，导致血管生成相关细胞因子被进一步调控，进而使患者病情加重[16]。有学者指出，LXA4可有效调节体内多种物质的释放和表达，对DM的发生发展起到重要的调节作用[17]。本研究结果显示，随着患者病情加重，其血清LXA4水平也显著降低，与既往研究结果一致。

综上所述，DR严重程度与血清NO及Apelin水平呈正相关，而与LXA4水平呈负相关，临床上可通过检测患者血清NO、LXA4、Apelin水平对患者病情进行评估。但本研究临床样本量较小，且并未对患者进行长期随访，有待后续进一步研究。