罗马洋甘菊蒸馏废渣光保护能力研究①

董小慧，汪 莹，王国凡，庞凌予，钟书琪，谭明涛，叶 彩

(佳木斯大学药学院，黑龙江 佳木斯 154007)

0 引 言

皮肤衰老的主要表现就是皮肤老化。由皮肤的表皮萎缩及其与真皮的交界处逐渐变平而引起的皮肤结构和功能的老化是自然老化。当皮肤长期暴露在阳光中的紫外线下时，会呈现出皱纹、松弛、色斑和毛细管扩张等老化现象，这称为光老化[1-3]。紫外线(UV)主要分为三部分：UVC(200～280 nm)、UVB(280～315 nm)和UVA(315～400 nm)。紫外线波长越大，透入人体皮肤的深度也越大。

罗马洋甘菊传统用途为治疗肠胃气胀、感冒、止吐、解痉和镇静剂等。由于根据对罗马洋甘菊挥发油的GC-MS分析[4],其精油和纯露的功效极佳，被消费者广泛使用，但是其生产过程中会产生大量废渣，这些副产物中含有大量的生物活性化合物，会造成环境问题和生物污染，因此合理利用废渣并解决环境污染是急需解决的问题[5]。

近年来消费者越来越关注产品的作用和成分来源，相比于化学合成化妆品，更青睐于温和、低价的植物提取成分化妆品，对天然成分化妆品的需求也越来越多。在实验中发现多酚类化合物是罗马洋甘菊蒸馏废渣的主要成分之一，而多酚类化合物已被现有的文献证明是潜在的抗氧化剂、美白剂、抗衰老剂和防晒剂。但迄今为止尚未有关于罗马洋甘菊蒸馏废渣在化妆品方面的研究。实验将从体外紫外分光光度计法，测定罗马洋甘菊蒸馏残渣醇提物及各级萃取物的SPF值，评估其作为防晒剂的潜力。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

721G紫外分光光度计(上海精科有限公司)；SQP型电子天平(北京赛多利斯科学仪器有限公司)；SZ-97A自动三重纯水蒸馏器(上海亚荣生化仪器厂)；甲醇(分析级；天津凯通化学试剂有限公司)；三蒸水(实验室自制)；各级萃取物：乙醇提取物、石油醚萃取物、erlvjiawan 萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和萃余物

1.2 罗马洋甘菊蒸馏残渣提取

得出最佳提取工艺参数为乙醇浓度50%，提取温度60℃，液固比50 mL/g。所得的醇提物分别用PE、CH2Cl2、EAC、NBA依次萃取，从而得到各部分萃取物。

1.3 罗马洋甘菊蒸馏残渣萃取物的光保护试验

测定样品的防晒因子(SPF)的常用方法分为人体测试法和体外测试法。其中，体外测试法中的紫外分光光度法测定SPF值简单、快速、经济。实验用体外紫外分光光度计法，测定罗马洋甘菊蒸馏残渣醇提物及各级萃取物的SPF值，评估其作为防晒剂的潜力。

1.3.1 样品及溶剂的配制

样品的配制：精密称取罗马洋甘菊蒸馏残渣醇提物及各级萃取物各2.0 mg于离心管中，用甲醇(萃余物用三蒸水)溶解并定容至20 mL，则样品浓度为100 μg/mL。

1.3.2 试验过程

以与样品相同溶剂为空白进行基线校正，使用1 cm石英比色皿于紫外分光光度计下在200～400 nm(间隔5 nm)波长范围内扫描样品。使用Mansur等人的公式计算其SPF值，即：

式中:EE(λ)-红斑效应谱；I(λ)-太阳强度光谱；Abs(λ)样品的吸光度；CF校正因子(= 10)。 EE × I的值是恒定且已知的，由Sayre等人确定，列于表1中。通过不同波长的吸光度值相加即得到SPF值。所有样品重复三次。

表1 在波长从290到320 nm中以每隔5nm共七点的EE×I (模拟太阳光)乘积值

1.4 统计分析

每次实验都做三次并取平均值，所有数据均由平均值 ± 标准偏差(Mean ± SD，n= 3)表示，并用SPSS16软件的方差分析(ANOVA)评价统计学差异，将P<0.05的值作为统计显著性水平。

2 结果与讨论

2.1 罗马洋甘菊蒸馏残渣萃取物总多酚含量的分析

各样品中总多酚的含量见表2，从表可知，总多酚的含量顺序为：乙酸乙酯萃取物 > 正丁醇萃取物 > 醇提物 > 二氯甲烷萃取物 > 石油醚萃取物 > 萃余物。醇提物中的总多酚经过萃取而达到分离，在乙酸乙酯及正丁醇中富集的较多。

表2 罗甘蒸馏残渣醇提物及各级萃取物总多酚含量

不同样品之间差异显著用不同字母a,b,c…表示(p< 0.05)，样品间差异不显著用同一字母表示

2.2 罗马洋甘菊蒸馏残渣萃取物的光保护活性分析

2.2.1 罗马洋甘菊蒸馏残渣萃取物的全光谱扫描图谱分析

紫外线(UV)波长范围200～280 nm、280～315 nm和315～400 nm，可分别对应UV辐射的UVC、UVB和UVA三类。UVC可被臭氧层吸收，UVA主要使皮肤晒黑，而UVB则会把皮肤晒伤，因此，防晒范围为UVA与UVB。罗马洋甘菊蒸馏残渣醇提物及各级萃取物的全光谱扫描如图1。从图中可看出，乙酸乙酯萃取物在UVA与UVB范围内具有强吸收，并且明显高于其他样品，其次是正丁醇萃取物及醇提物，而石油醚与二氯甲烷萃取物及萃余物几乎无作用。此顺序与其化学成分中总酚含量的高低相一致。通常，植物提取物，特别是含有黄酮和色素的提取物，因为本身带有颜色，可以在某些特定的波长下吸收对应的光。

图1 罗马洋甘菊醇提物及各级萃取物在200-400 nm波长的吸光度

2.2.2 罗马洋甘菊蒸馏残渣萃取物的SPF值分析

通过Mansur公式，求得醇提物及各级萃取物在100 μg/mL的SPF，将其结果列于表3中。

表3 罗马洋甘菊醇提物及其各级萃取物在100 μg/mL下的SPF值

不同样品之间差异显著用不同字母a,b,c…表示(p< 0.05)，样品间差异不显著用同一字母表示

由实验结果可知，乙酸乙酯萃取物在100 μg/mL时SPF达到了29.754，其次为正丁醇萃取物，为12.658，乙醇提取物的SPF值仅为8.265。通过与其他作者报道的芳香植物提取物相比，罗马洋甘菊乙酸乙酯萃取物的SPF值远远高于其他植物，如桂树皮醇提物，其在100 μg/mL时的SPF值3.462[6]，生姜醇提物在 200和400 μg/mL的SPF值分别为1.44和1.82[7]，胡萝卜的乙酸乙酯萃取物在2000 μg/mL时的SPF值为24.25[8]，因此罗马洋甘菊蒸馏残渣可用于化妆品中的防晒成分，尤其是乙酸乙酯萃取物，具有极高的光保护价值。

3 结 论

将罗马洋甘菊蒸馏残渣提取物进行溶剂梯度萃取，分析各萃取物的总多酚含量，发现乙酸乙酯萃取物所含的总多酚含量最多。通过紫外分光光度计法结合Mansur公式计算，得出罗马洋甘菊乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物及醇提物均有较好的光保护活性，且乙酸乙酯萃取物效果最好。