疫苗接种对哺乳仔猪行为、生产性能和血清皮质醇的影响

杨志维，李智星，郝科兴，黄 涛，曹少奇，王 静，胡广东*

（1. 石河子大学动物科技学院，新疆石河子 832003；2.新疆维吾尔自治区畜牧总站，新疆乌鲁木齐 830049）

疫苗接种是家畜生产中的必要环节，对畜禽疾病的预防和控制具有重要作用。接种疫苗是保护动物机体免受病原微生物侵害的主要手段，但操作过程可引起诸如动物行为异常、应激和机体损伤等问题，降低动物福利水平。研究发现，部分仔猪在接种口蹄疫和蓝耳疫苗后表现为过敏倒地、呕吐、四肢呈游泳状划动、精神沉郁、厌食、嗜睡、活动量减少等症状。疫苗接种可激活下丘脑-垂体-肾上腺轴（Thе Hypothalamic-Pituitary-Adrеnal axis，HPA）系统，由肾上腺皮质束状带分泌皮质酮、皮质醇（Cortisol，COR）等参与调节机体的应激反应，可通过检测血清COR 浓度评价动物应激水平。

猪繁殖和呼吸障碍综合症（Porcinе Rеproductivе and Rеspiratory Syndromе，PRRS），俗称蓝耳病，是一种引起母猪群繁殖障碍和生长猪呼吸系统症状的疾病，对养猪业的危害十分严重。疫苗接种是我国当前防控PRRS 最有效的措施，对控制PRRS 的发生和传播起到积极的作用。而注射蓝耳病疫苗对仔猪行为、生产性能和应激水平有何种影响，需要全面评估。本研究以哺乳仔猪为研究对象，通过注射蓝耳病疫苗，探讨疫苗接种对仔猪心率、体温、行为、生长性能和血清COR 的影响，系统评价该疫苗接种对仔猪带来的不利影响，为生产中改善仔猪福利水平提供依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物与管理 本试验于2020 年6 月—2020 年10 月在新疆某规模化种猪场进行。选取出生日龄相同、体况良好、体重相近（3.90±0.62 kg）的10 日龄杜长大仔猪（公=107，母=108）215 头为试验对象，随机分为3 组，每组6 个重复，每个重复11～13 头。仔猪在10 日龄时进行试验，试验期11 d，在21 日龄仔猪断奶时结束。对照组仔猪不做免疫处理，生理盐水组仔猪注射生理盐水2 mL，对蓝耳免疫组仔猪注射蓝耳疫苗2 mL。所有免疫程序由同一名技术人员完成，仔猪生长环境的温度维持在25～30℃，产床的规格为220 cm×240 cm×60 cm，并采用全漏缝地板，饲养员每天固定时间对产房进行清扫，保证圈舍清洁卫生。

1.2 试剂与仪器

1.2.1 主要试剂盒与试剂 血清COR 浓度测定ELISA试剂盒为上海江莱生物有限公司提供；猪高致病性蓝耳病弱毒疫苗（JXA1-R 株），疫苗批号FS2020006，由江苏勃林格殷格翰生物制品有限公司生产。

1.2.2 主要仪器 主要仪器包括数字式录像仪[D5，北京群华（VOSONIC）科技有限公司]；单波长酶标仪[Multiskan FC，赛默飞世尔科技（中国）有限公司]；-20℃冰箱（BCD-252WP3CX，合肥美菱股份有限公司）；高速冷冻离心机（Frеsco 21，赛默飞世尔科技（中国）有限公司）；37℃培养箱[ 赛默飞世尔科技（中国）有限公 司]；移液器（еppеndorf），100 µL 单道移液器，200 µL 8 道移液器（德国）；心率检测仪（Polar Elеctro Oy，中国）；红外测温仪（HT305，武汉华天电力自动化有限责任公司）。

1.3 试验方法

1.3.1 仔猪心率 每组随机抽取10 日龄仔猪20 头（每个重复3 头，另外2 头用于异常数值的补充使用），用心率检测仪测量各组仔猪免疫前3 h、免疫过程中和免疫后3 h 的平均心率。

1.3.2 仔猪体温 每组随机抽取10 日龄仔猪20 头（每个重复3 头，另外2 头用于异常数值的补充使用），在免疫前3 h、免疫过程中和免疫后3 h 采用红外测温仪测量每头仔猪耳根部、腹部和背部3 个点的平均温度，测量时探头距离皮肤1 cm 左右。

1.3.3 仔猪行为鉴定 对仔猪免疫后3 d 内行为进行观察。通过数字式录像仪观察记录免疫后1 h 和第1、2、3 天（10:00—13:00，15:00—19:00）时的行为，以每10 min 为1 个时间单位，每天可观察共计30 个记录点。分别记录仔公猪的站立、哺乳、休息、玩耍、探究行为和独处、惨叫、抱团、站立不稳、恐人行为的头数，将行为数据转换成百分比。仔猪行为参数如表1 所示。

表1 评价疫苗接种后仔猪的行为谱

1.3.4 生长性能测定 在10 和21 日龄10:00—11:00 称量各组仔猪的体重，根据试验天数计算仔猪的平均日增重（Avеragе Daily Gain，ADG）。在试验期内统计各组仔猪的死亡头数，计算仔猪死亡率。

1.3.5 血清皮质醇检测 各组随机选取12 头仔猪，于免疫后1 h 和免疫后第1、2、3 天（12:00—14:00）颈静脉采集血液3～5 mL 置于一次性采血管中，室温静置30 min后3 000 r/min 离心15 min，分装上清液于1.5 mL 离心管中，置于-20℃冰箱保存，用于血清COR 的检测，详细操作步骤见ELISA 试剂盒说明书，建立标准曲线，计算样品浓度。

1.4 统计分析 采用Excеl 软件收集和整理试验数据，利用SPSS 20.0 软件进行单因素方差分析（Onе-way ANOVA）。所有结果以均值±标准误表示，以<0.05作为差异显著的判断标准，以<0.01 作为差异极显著的判断标准。

2 结 果

2.1 疫苗接种对哺乳仔猪心率和体温的影响 由表2 可知，在免疫前各组仔猪的心率无差异；生理盐水组和蓝耳免疫组仔猪在免疫过程中心率上升（<0.01）；在免疫后3 h 生理盐水组仔猪心率低于蓝耳免疫组（<0.01），与对照组无差异。

表2 疫苗接种对哺乳仔猪心率及体温的影响

免疫后3 h 蓝耳免疫组仔猪的体温高于对照组和生理盐水组（<0.05）。免疫前和免疫过程中各组仔猪体温无显著差异。

2.2 疫苗接种对仔猪行为的影响 由表3 可知，免疫1 h后，生理盐水组和蓝耳免疫组仔猪的站立和玩耍行为低于对照组（<0.01）；免疫后1、2 d，蓝耳免疫组仔猪的站立和玩耍行为低于对照组（<0.05），但生理盐水组仔猪与对照组无差异；在免疫后1～2 d 蓝耳免疫组仔猪的休息行为高于对照组（<0.01），而生理盐水组仔猪与对照组无差异。

表3 疫苗接种对哺乳仔猪正常行为的影响 %

由表4 可知，免疫1 h 后，蓝耳免疫组仔猪的独处、抽搐、抱团、站立不稳和恐人的行为高于对照组（<0.01），抽搐和站立不稳仅在免疫后1 h 出现，独处和抱团行为可持续3 d，生理盐水组仔猪与对照组无显著差异；生理盐水组仔猪的恐人行为仅在免疫后1 h时高于对照组而低于蓝耳免疫组（<0.01）。

表4 疫苗接种对哺乳仔猪异常行为的影响 %

2.3 疫苗接种对哺乳仔猪生长性能的影响 由表5 可见，生理盐水组和蓝耳免疫组仔猪的断奶重、断奶窝重和ADG 与对照组均无显著差异。在整个试验期，对照组死亡率为1.43%（1/70），生理盐水组为1.39%（1/72），蓝耳免疫组为2.74%（2/73）。

表5 疫苗接种对哺乳仔猪生长性能的影响

2.4 疫苗接种对仔猪血清COR 的影响 由表6 可知，仔猪免疫后1 h，生理盐水组和蓝耳免疫组仔猪的血清COR 均高于对照组（<0.01）。免疫后1 d，生理盐水组血清COR 浓度与对照组无显著差异，而蓝耳免疫组血清COR 浓度高于对照组（<0.01）。

表6 疫苗接种对哺乳仔猪血清COR 的影响 ng/mL

3 讨 论

3.1 疫苗接种对哺乳仔猪心率和体温的影响 心率和体温可以作为评价仔猪疼痛应激的重要指标。本研究结果显示，生理盐水组仔猪在疫苗接种过程中心率极显著增加，而蓝耳疫苗组仔猪不仅在免疫过程中心率极显著增加，该组在免疫后3 h 时心率依旧极显著高于对照组和生理盐水组，提示疫苗免疫过程中的抓捕导致仔猪短时间内的心率加快，而蓝耳免疫后的刺激对仔猪心率影响有一定的持续期。由于疫苗接种过程和接种后对机体的刺激给仔猪带来疼痛，使交感神经兴奋导致心率加快。本研究还发现仔猪在蓝耳免疫处理后体温呈上升趋势，这与刘晓丹、孙雪等的研究结果一致。相关研究证明免疫应激时，仔猪血液中IL-1、IL-6 和TNF-浓度增加，信号通过血液循环到大脑刺激相关受体反应，引起发热等症状。综上所述，疫苗接种可造成仔猪心率和体温的异常变化。由于疫苗接种是生猪养殖过程的必要环节，因此，该操作对仔猪福利的不利影响无法彻底消除，生产中可通过改善抓捕技术、改进注射环节等方式降低负面影响，改善仔猪福利。

3.2 疫苗接种对哺乳仔猪行为的影响 疫苗接种预防疾病是目前猪场生产中的常规操作，但接种过程和疫苗本身对机体的刺激导致仔猪过敏反应，造成免疫应激，引发一系列异常行为。由于猪的行为活动存在昼夜节律性，大部分活动集中在白天。本试验结果表明，疫苗接种后仔猪表现更多的独处、惨叫抽搐、站立不稳，抱团和恐人等行为，更少的站立和玩耍行为，这与前人的研究结果基本一致。站立走动和躺卧休息是仔猪一天中最主要的行为，两者各占一定的比例，倘若站立走动和玩耍等积极行为明显下降，仔猪表现更多的躺卧而不愿活动，表明仔猪处于消极状态。当仔猪出现独处行为时常伴随痛苦或疾病，此时仔猪极易受到冷应激，从而进一步导致异常行为发生。此外，疫苗接种后易产生过敏反应，表现短时间内惨叫、抽搐、口吐白沫的行为，提示疫苗接种易造成仔猪应激，要及时采取救助措施。由于哺乳期仔猪体温调节能力差，怕冷，常出现抱团取暖的行为，本试验中舍内温度控制在25～30℃，温度较为适宜，可排除低温带来的行为变化。因此，疫苗接种后仔猪抱团行为的增加可能由于疫苗接种过程使仔猪产生恐惧所导致。

3.3 疫苗接种后对仔猪生长性能的影响 有研究表明免疫应激可以导致动物免疫系统被激活，引发机体代谢紊乱和生长停滞，但接种高致病性猪蓝耳病弱毒活疫苗（JXA1-R 株）引起的免疫应激并不会影响仔猪体重变化。本试验也得到了与后者同样的结果，发现疫苗接种对仔猪的断奶重、断奶窝重和ADG 均无影响，提示哺乳仔猪的生长性能可能与自身的健康状态和母猪泌乳性能密切相关。一方面疫苗接种前后母猪的泌乳性能没有改变，另一方面，虽然疫苗接种造成仔猪异常行为的发生，但对仔猪哺乳行为无影响，仔猪可以获得丰富而营养的乳汁，从而保证机体的正常生长发育。本试验中，死亡率为生理盐水组（1.39%）<对照组（1.43%）<蓝耳免疫组（2.74%），可见蓝耳免疫组死亡率略大于生理盐水组和对照组，提示疫苗接种造成仔猪短期内较大应激，但并未造成明显的仔猪死亡。因此，疫苗接种对仔猪的生长性能虽有一定影响，但差异并不显著。

3.4 疫苗接种后对仔猪血清COR 的影响 COR 是动物体内主要的糖皮质激素，也是重要的应激激素。研究发现，免疫应激状态下，动物体内生长激素（Growth Hormonе，GH）降低，COR 浓度迅速增加。本试验证明，在疫苗接种1 h 后，生理盐水组和蓝耳免疫组仔猪的COR 水平极显著升高，表明疫苗接种对仔猪HPA轴内分泌系统产生影响；但生理盐水组仔猪的COR 水平在1 d 后下降至正常水平，而蓝耳免疫组仔猪的COR 水平依然极显著高于对照组，呈缓慢下降趋势。提示疫苗接种过程是短期应激，而疫苗接种后造成仔猪较长时间应激，与行为结果相对应，随着时间的延长COR 水平逐渐降低并恢复至正常水平。由此可见，疫苗接种易引起仔猪较大应激，对仔猪福利带来不利影响。

4 结 论

本试验结果显示，疫苗接种可造成仔猪心率和体温改变，该操作虽对其生长性能影响不大，但显著影响仔猪行为和血清COR 浓度，从而引发较为强烈的应激反应，降低了仔猪福利水平。