中老年女性梅毒检测结果分析

瞿莉

【摘要】目的 探讨化学发光微粒子免疫法（CMIA）、甲苯胺红不加热血清试验 （TRUST） 和梅毒螺旋体明胶凝集试验 （TPPA） 在中老年女性梅毒检测中的运用价值。方法 选取2021年6月至2022年2月在南京市妇幼保健院进行梅毒检测的40岁以上女性人群107例为研究对象，用CMIA作为梅毒筛查方法，对梅毒阳性标本用TRUST和TPPA方法进一步复查。结果 CMIA检出 105 例梅毒阳性标本， TPPA确证阳性 96 例， 阳性符合率为 91.43% （96/105） ；其中31 例TRUST阳性， 且TPPA确证试验均为阳性； 76 例TRUST阴性， TPPA确证 67 例阳性， 9 例为阴性。结论 CMIA初筛中老年女性梅毒检测中存在着一定比例的假阳性， CMIA初筛阳性标本第一步应做TRUST验证， 然后再进一步用TPPA金标准确证， 以降低梅毒的误诊率和医患纠纷。

【关键词】化学发光微粒子免疫法（CMIA）；甲苯胺红不加热试验（TRUST）；梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）；梅毒

Analysis of syphilis test results in middle-aged and elderly women

QU Li

Maternity Hospital affiliated to Nanjing Medical University （Nanjing Maternal and Child Health Care Hospital）， Nanjing， Jiangsu 210004， China【Abstract】Objective To investigate the application value of CMIA combined with treponema pallidum red unheated serum test （TRUST） and treponema pallidum gelatine agglutination test （TPPA） in the detection of syphilis in middle-aged and elderly women.Methods Selection in June 2021 to February 2022 in nanjing maternity and child health care hospital for syphilis detection of female population aged over 40 107 cases as the research object，CMIA for syphilis screening method，The positive specimens were further examined by TRUST and TPPA.Results CMIA detected 105 syphilis positive specimens， TPPA confirmed positive 96 cases， positive coincidence rate was 91.43% （96/105）. Among them， 31 cases were positive for TRUST and TPPA confirmatory test.TRUST was negative in 76 cases， TPPA confirmed positive in 67 cases and negative in 9 cases.Conclusions CMIA screening of syphilis in the middle-aged and old women syphilis detection there is a certain proportion of false positive results，CMIA positive specimens should be verified by TRUST in the first step， and then confirmed by TPPA gold standard to reduce the misdiagnosis rate of syphilis and doctor-patient disputes.

【Key Words】Syphilis； Chemiluminescence microparticle immunoassay（CMIA）； Toluidine red unheated test （TRUST）； Treponema pallidum gelatin agglutination test （TPPA）

近年来梅毒在我国各地飛速增长，已然成为报告病例总数最多的性病。梅毒是人类特有的疾病，绝大部分由性接触传播，传染危险性极强，危害严重性较重，是传染病防控的重中之重[5]。随着社会理念的改观和生活水平的改善，梅毒已经不是男性朋友的专利，女性感染梅毒的病例比重数也在日益增加。尤其是在40岁以上的中老年女性当中，阳性人数呈现增长趋势。南京市妇幼保健院为本地区最大的三级甲等妇幼保健院，肩负着本区域70%以上女性健康安全保健工作。本研究统计分析近半年来在南京市妇幼保健院就诊的40～80岁中老年女性患者的梅毒抗体检测结果，对比分析目前实验室最常用的三种梅毒血清学检查方法，包括化学发光微粒子免疫法（CMIA）、甲苯胺红不加热血清试验 （TRUST）和梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA），探求不同梅毒血清学检查方法在中老年女性病例中的应用分析，现报道如下。

1.1 一般资料

选取2021年6月至2022年2月在南京市妇幼保健院进行梅毒检测的人群107例为研究对象，其均为40岁以上女性患者，平均年龄为 50.13岁。

1.2仪器和试剂

仪器：ARCHITECT 全自动化学发光免疫检测仪（美国雅培公司生产）；恒温箱为新苗三用恒温水箱，其型号为H.SWX-600BS；生物安全柜型号为ESCO-A2型。所用仪器设备的检测性能均能满足实验要求。

试剂：CMIA是由美国雅培原装进口的配套试剂；TRUST是英科新创（厦门）科技有限公司生产的梅毒甲苯胺红不加热血清试验诊断试剂盒；TPPA是由日本富士瑞必欧株式会社体外诊断用医药品梅毒螺旋体抗体诊断试剂。上述试剂盒均在有效期内。

1.3方法

患者均于清晨采集静脉血至少2ml，采血前避免剧烈运动，采集完成进行离心后取上清液进行检测，分别利用化学发光微粒子免疫法（CMIA）、甲苯胺红不加热试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）进行检测，所有检测遵循试剂盒说明书进行。

1.4觀察指标

以TPPA结果作为金标准，计算CMIA和TRUST的准确率、灵敏度并进行比较。

1.5统计学方法

采用SPSS25.0统计学软件进行数据统计分析。计数资料采用（%）表示，进行χ2检验，计量资料采用（χ±s）表示，进行t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

研究对象经TPPA检测出 98例阳性，9例阴性。CMIA检出 105例阳性，2例阴性，阳性率为98.13%；TRUST检测出阳性31例，阴性76例，阳性率28.97% 。CMIA检测的准确率89.72%，灵敏度97.96% ；TRUST检测的准确率37.38%，灵敏度31.63%，详细数据见表1、表2。

人体感染梅毒后，会产生一类特异性抗体和另一类针对类脂质的非特异性抗体。除感染梅毒之外，患另外一些疾病如风湿性心脏病、钩端螺旋体病等，体内也可能产生微量抗类脂质抗体导致TRUST阳性[6]。这些疾病均是中老年患者常见的内科疾病，特别是伴有心脑血管疾病的中老年人，CMIA和TRUST同时出现假阳性的情况有一定概率。目前实验室检测梅毒螺旋体抗体主要以血清学检查为主。检测特异性抗体常用的方法有TPPA、ECLIA和CMIA， 而TRUST为检测非特异性抗体的常用方法。TPPA是在明胶粒子上包被着Nichols 株的精制菌体，然后样本中的特异性抗体与载体菌株结合，产生凝集反应，从而评判抗体效价，检测出TP值[1]。虽然TPPA检测梅毒具有较高的可靠性和稳定性， 但由于检测耗费较长时间，手工操作流程繁琐，试剂成本较高且在判定两孔对比颜色时受主观控制，因此不合适大批量的初筛试验。甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）的原理是该甲苯胺红溶液试剂能与梅毒患者血清或血浆中的反应素形成凝集反应，试剂操作简易，成本较低，结果容易观察，此试验可作为梅毒血清学快速检测及临床疗效之参考[4]。TRUST是一种常用的梅毒非特异性抗体的血清学检测方法[2].但是非特异性抗体在临床上出现类似硬性下疳表征4周后才能检出，对神经性和潜伏期梅毒极不敏感，假阴性率较高而容易漏诊。因此不适合作为梅毒的初筛试验，但在判断病程和抗体滴度方面有重要应用价值。化学发光微粒子免疫法（CMIA）检测是样本与重组梅毒螺旋体抗原（TpN15、TpN17 和 TpN47）包被的微粒子和项目稀释液结合，样本中抗体与微粒子相互结合，冲洗。再加入标记物标记形成的抗体复合物再次冲洗后，最后与预激发液和激发液形成复合物，测量其发光值（RLUs）表示。ARCHITECT 系统根据各样本和质控品的 RLU 值与 Cutoff RLU 值得比值（S/CO）计算出ARCHITECT 梅毒螺旋体抗体检测结果。CMIA明显具有较高的准确性和重复性，同时CMIA具有自动化程度高、流程简易、时间较短、高稳定性等优点，可作为临床实验室大批量检测梅毒抗体的初筛方法[3]。

本次实验结果显示，研究对象经TPPA检测出 98例阳性，9例阴性。CMIA检出 105例阳性，2例阴性，阳性率为98.13%；TRUST检测出阳性31例，阴性76例，阳性率28.97%。CMIA检测的准确率89.72% ，灵敏度97.96% ；TRUST检测的准确率37.38% ，灵敏度 31.63%。由此说明，CMIA在中老年女性患者梅毒检测中的准确率和灵敏度远高于TRUST，且差异有统计学意义（P<0.05）。说明CMIA具有较高的梅毒螺旋体感染诊断应用价值，适用于临床检测标本的大规模筛查。但需注意的是，该检测方法存在着一定比并例的假阳性结果，比例多少主要取决于试剂盒的特异性、样本完整性和筛查当地人群的特征，所以在ARCHITECT梅毒螺旋体抗体项目的检测结果与临床症状不符时，需要通过TRUST和TPPA来复查验证检测结果，以降低假阳性率。CMIA与TRUST、TPPA相比自动化程度较高， 检测流程简便 ，时间短并且手工环节更少，人工干扰因素较少，数据的重复性和一致性较高，结果数值具稳定性，适用于基层大规模的标本筛查，同时检测结果也更易于留存。且实验过程中可将标本处理对结果的影响降到最低[7]。标本量比较少时推荐用TPPA法检测，若为急诊手术患者或用于大规模筛查的实验室，推荐用CMIA法检测以确保检验结果的及时性和可靠性。但CMIA作为初筛试验存在有一定的假阳性，若对这些假阳性结果不加以修正就随意发出报告，容易导致医患矛盾，并对患者和家属也易造成无法挽回的伤害[8]。当ARCHITECT梅毒螺旋体抗体项目的检测结果与临床症状不符时，为了指导临床医生正确判读患者感染的真实情况，实验室需制订CMIA检查需要通过附加其他血清学检测来验证检测结果。对于我院这107例病例主要针对近半年来40岁以上女性研究对象，样本总数较少且性别单一等方面限制了本次试验的完整性，这些不足之处会在以后的研究中加以改善及补充。需注意的是，不管何种检测方法均无法百分之百确保样本中包含的低量梅毒抗体，因此在梅毒感染初期或者潜伏期，如果已被怀疑为感染时，即使本试剂的判定结果为阴性，也要经过一段时间再进行检查并与其他的检查结果和临床症状结合起来加以综合判断。因此任何时候取得的阴性结果都不能排除梅毒感染的可能性，需要结合其他信息进行诊断。对于我院这107例病例，主要针对在我院门诊、体检和住院的妇女，地区筛查特征性不足之处会在以后的研究中加以改善及补充。

综上所述，梅毒是越早发现越好。凡有过高危性接触者应及早去医院就诊抽血检查，为了获得最佳治疗诊断，最好重复进行多次梅毒血清学检查。在三种梅毒血清学检查中，从试剂成本， 操作流程，结果判读，数据保存，以及检测结果的准确性，灵敏度等方面综合考虑，CMIA可作为大批量梅毒标本筛查的理想检测手段，用于梅毒螺旋体特异性抗体筛查试验有助于提高准确性与阳性检出率，但允许一定的假阳性率。在临床试验中，为了提高检测结果的准确率， 必须辅以TPPA法对可疑标本进行二次确证复查[9]。CMIA初筛中老年女性梅毒检测中存在着一定比例的假阳性，CMIA初筛阳性标本第一步应做TRUST验证，TRUST有相对较高特异性，可以指导临床根据滴度对梅毒的治疗效果进行评价，然后再进一步用TPPA金标准确证，以降低梅毒的误诊率和医患纠纷。

参考文献

[ 1 ] 赖宇丽，杨志鹏，王禹淇.酶联免疫吸附试验 梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验 甲苯胺红不加热血清学试验三种梅毒检测的方法学比较[J].实用医技杂志，2016，23（01）：68-70.

[2] 朱学英.3种梅毒检测方法在检测梅毒螺旋体中的应用价值[J].医疗装备，2018，31（17）：74-75.

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[4] 賴宇丽，杨志鹏，王禹淇.酶联免疫吸附试验 梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验 甲苯胺红不加热血清学试验三种梅毒检测的方法学比较[J].实用医技杂志，2016，23（01）：68-70.

[5] 王倩，孟庆晗，赵晋文，丁晓娜，刘朋，王欣俞.探讨两种全自动化学发光免疫分析仪检测方法在梅毒检测中的应用价值[J].中国医学装备，2021，18（03）：47-50.

[6] 伍尚华，莫国新，徐亮，王澜，陈英.老年人群不同梅毒血清学检查的诊断效能[J].深圳中西医结合杂志，2020， 30（13）：8-9.

[7] 甘钊杏，黎丽红，何景英.梅毒螺旋体抗体的CMIA法与TPPA检测比较[J].临床医学工程，2011，18（08）：1262-1263.

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[9] 任晖晖，益西措姆，次仁央金，巴桑央金，李慧.CMIA法筛查梅毒抗体[J].基础医学与临床，2018，38（02）：235-236.