聚维酮碘、戊二醛对牛结核杆菌的杀灭效果

文│孙钗闻 付玉洁（沈阳工学院生命工程学院）

养殖业是我国重要的产业构成，在养殖工作开展中对各类致病菌进行合理消杀十分必要。笔者探讨的牛结核杆菌是在养殖过程中一种常见的病害原因，养殖场采用的常用消杀药品有聚维酮碘和戊二醛，故探究两种药品对牛结核杆菌的作用十分必要。笔者通过试验的形式明确聚维酮碘和戊二醛对牛结核杆菌的杀灭效果。

一、试验意义与目标

牛结核杆菌是危害养殖业的细菌种类之一，同时是一种人畜共患病的病原，随着医疗条件的提高，该病菌对人类危害较小，但养殖密度较大时会在畜牧之间形成迅速传播，从而造成严重的经济损失。此外除畜牧之间传染外，携带牛结核杆菌的人类也会形成逆向传播。本试验的主要意义是探究两种常见消杀药品（聚维酮碘和戊二醛）对牛结核杆菌的杀灭效果，根据试验结果为养殖场消杀工作提出可行性建议。

二、试验流程与观测结果

1.试验设计。本试验旨在观测聚维酮碘和戊二醛两种药物对牛结核杆菌的杀灭效果，基于此目的至少进行两组试验，分别培养相同条件的两组牛结核杆菌，而后使用两种不同的药物来观察其杀菌效果。但为了使试验结果更具应用价值与现实意义，本试验在开展过程中同样计划通过改变药物浓度的形式观测其具体应用效果。聚维酮碘和戊二醛在生物杀菌中常用的浓度为1%左右，本试验以此为基准设置多种对照组。

试验设计思路：先培养结核杆菌，而后设置8组试验，1～4组为聚维酮碘杀菌试验，5～8组为戊二醛杀菌试验。浓度分别为0.1%、0.5%、1%、2%。此外设置足够的备用组和空白对照组。

试验观测对象：在上述试验组别中加入对应浓度的药物后，通过适宜的环境培养牛结核杆菌，而后在一定时间后进行观测，若牛结核杆菌繁殖，则代表对应浓度的对应药物无法起到杀菌效果。

试验流程：准备阶段→培养基构建→菌液与药物准备→细菌培养→观测。

2.试验准备。试验前期通过查阅资料的形式来明确牛结核杆菌的生物暴露危害，经综合确定，该试验可在普通无菌试验室内进行，试验开始前后，参与人员均需进行全面消杀。

本试验所需求的试验器材：灭菌锅，用来杀灭培养基中的杂菌，以防止干扰试验效果；水浴锅，用来培养基制作；无菌试验操作台，用来操作上述试验流程，保障全过程中不会被细菌污染；移液枪，用来转移药物和细菌培养液；此外还有生物试验所需的其他必用性试验器材。

本试验所需求的药品：聚维酮碘和戊二醛，两种杀菌药物也是本试验中的重点内容；谷氨酸钠、硫酸镁、淀粉、鸡蛋清，主要用来制作培养基；生理盐水与蒸馏水，在该试验中多个环节使用。此外还有一般生物试验所必需的基础性药品和必要的消杀药品。

本试验使用的细菌为牛结核杆菌，为生物试验室所提供的非灭活细菌。

表1 培养基的药品清单

3.培养基的制作。为便于试验开展，本试验各组均采用同一培养基，所选取的培养基类型为改良的罗氏培养基。培养基的药品清单如下表所示：

首先，将A批次全部药品添加在600毫升蒸馏水中，且静止后无明显沉淀后，加入B批次药品。

B批次药品加入后进行加热至沸腾，约1小时后停止加热，待其自然冷却。

而后加入C批次药品，混合均匀，分装待用。

上述培养基制作流程均需在无菌操作环境下进行。

4.细菌培养过程。制作好上述培养基后，使用之前要进行两次85℃灭菌，而后转移到无菌环境中开始细菌培养工作。前期试验设计阶段确定的试验组药物浓度分别为0.1%、0.5%、1%、2%，目前试验室提供的聚维酮碘为5%的，戊二醛为2%的，可通过外加蒸馏水稀释的形式来分别取得上述浓度药品。每个浓度的药品制备2毫升待用。

该试验细菌数为1.5×108的细菌浓度，使用试验室提供的牛结核杆菌样本进行菌液配制。

而后取得培养基试管，将2毫升药品与一个单位的细菌液共同加入培养基中，此外设置2个空白对照组，在培养基中加入一个单位的细菌液和2毫升生理盐水作为对比试验。

在培养基试管上注明药品及浓度，而后将试管转移到培养环境中。本试验采用恒温培养，培养箱温度为37℃，培养14天。

5.试验观测与数据统计。14天后进行试验观测工作，先观测对照组，结果发现，牛结核杆菌生长良好，肉眼未见其他杂菌生长，判定该时间有效，试验所取得的结果如下表。

该试验设置的10个试验组，2个对照组均观测到牛结核杆菌正常生长，证明该试验有效。其余8个试验组中有6个试验组观测到牛结核杆菌生长，2个未观测到。其中聚维酮碘0.5%组的细菌量少于其他组别。

三、试验结论

由该试验结果可知，聚维酮碘对牛结核杆菌具有杀菌效果，浓度为0.5%时即可起到一定的作用，但仍不能完全杀死牛结核杆菌；当浓度达到1%时，能有效消杀牛结核杆菌，在试验环境下，可观测到有牛结核杆菌无法生存。在试验中，使用的戊二醛浓度为0.1%～2%，均无法消杀牛结核杆菌，初步判定小于2%的戊二醛对牛结核杆菌无效。

四、试验思考

本试验围绕牛结核杆菌的消杀药品展开研究，聚维酮碘和戊二醛均是在养殖业中常用的消杀药品，因牛结核杆菌产生的一系列病害问题也是值得引起重视的。在目前养殖中，所采用的药品浓度大部分为1%左右，从本试验可初步得出结论，小于1%浓度的聚维酮碘无法完全消杀结核杆菌，小于2%浓度的戊二醛对牛结核杆菌的消杀无效，需要在养殖过程中合理选择药品并配备到合适浓度才能起到病害防治的目的。

表2 试验结果

但从行业现状看，目前有部分养殖场对消杀工作不够重视，并未针对每种细菌选取合适的药品进行消杀，在药品配置时，浓度的精准度不够，而事实上，药品种类与药品浓度都将会影响牛结核杆菌的消杀效果。通过查阅资料可知，牛结核杆菌构成复杂，外壳较厚，在细胞壁位置有糖类成分和各类细胞质发生反应，形成顽固的保护层，化学药品对其渗透难度较大，而这也是低浓度药品无法对牛结核杆菌造成任何影响的原因之一。

本试验还观测到小于2%浓度的戊二醛对牛结核杆菌无效，因存在对照组，且聚维酮碘试验结果正常，可基本排除试验设计和试验操作失误所导致。通过查阅资料可知，戊二醛在碱性环境下自身稳定性较弱，而酸性戊二醛的消杀能力极其有限，且牛结核杆菌自身有一定抵抗消毒药品的能力，故此结果并不是试验操作错误导致的。这也引发了对养殖业消杀工作的思考，在实际消杀工作中往往是多种药品同时使用，同时酸性药品居多，而酸性环境可能会导致戊二醛失效。

五、结语

笔者旨在探究聚维酮碘和戊二醛对牛结核杆菌的杀灭效果，作为一种养殖业常见的病原体，明确常用药品对其具体消杀效果的表现具有一定的现实意义。根据本试验结果可初步为养殖场消杀工作提供建议。但也必须明确的问题是，养殖场环境极为复杂，真实情况也并不是仅存在一种细菌，多种细菌间的相互作用、不同消毒药品之间的化学反应、药品使用对养殖畜牧的危害等都是需要考虑的问题。明确各致病菌的消杀机理，探究适宜的消杀方式，对维护养殖业发展、保障食品健康具有现实意义。