上海市松江区2 323例呼吸道感染患者病原体谱 抗体检测结果分析

沈雅萍，韦 薇

（上海市松江区中心医院检验科，上海 201600）

呼吸道感染属于常见病和多发病，临床表现多样，包括发热、咽痛、咳嗽、咳痰、喘息等，可由多种病原体引起。除了由常见的肺炎链球菌等细菌引起外，90%以上的呼吸道感染由非典型病原体引起，包括呼吸道合胞病毒（RSV）、腺病毒（ADV）、流感病毒A型（INFA）、流感病毒B型（INFB）、副流感病毒（PIV）、肺炎支原体（MP）、肺炎衣原体（CPn）及嗜肺军团菌（LP）[1]等。目前，对于疑似呼吸道感染的患者，进行相应的呼吸道病原体谱抗体检测已成为临床诊断的一种常用筛查手段。为探讨松江区呼吸道感染患者的病原体构成情况，本研究对2021年3月至2022年2月的2 323例呼吸道病原体谱抗体检测进行了分析，以期为临床提供参考，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2021年3月至2022年2月上海市松江区中心医院收治的2 323例呼吸道感染患者的呼吸道病原体谱抗体检测数据进行回顾性分析。按季节发病特点划分：春季（3～5月）551例，夏季（6～8月）539例，秋季（9～11月）597例，冬季（12～2月）636例；按患者性别划分：男性1 410例，女性913例；按患者年龄划分：0～14岁230例，15～59岁535例，≥60岁1 558例。本研究经上海市松江区中心医院医学伦理委员会批准。诊断标准：参照《内科学（第9版）》[2]中呼吸系统疾病的诊断标准。纳入标准：①呼吸道感染患者；②临床资料完整。排除标准：①合并恶性肿瘤；②有其他肺基础疾病。

1.2 检验方法抽取患者静脉血3～5 mL，静置凝固后，以4 000 r/min离心10 min，分离血清，采用间接免疫荧光法检测血清中RSV、ADV、INFA、INFB、PIV、MP、CPn及LP等8项呼吸道病原体的免疫球蛋白M（IgM）抗体。具体方法为患者血清与包被有检测基质的载片温育。如果样本阳性，特异性IgM抗体可与玻片上的相应的抗原特异性结合。在第二步温育时，结合的抗体与异硫氰酸荧光素（FITC）标记的抗人免疫球蛋白抗体反应。采用荧光显微镜（德国欧蒙医学实验诊断股份公司，型号：EUROStarll型）观察特异的荧光模型，从而检测血清中病原体抗体。实验操作时严格按照试剂盒中说明书进行，并使用荧光显微镜阅片判读结果。注意在检测特异性IgM类抗体前去除患者样本中的IgG类抗体，如采用免疫吸附等方法去除，这不仅可以防止样本中的IgM类类风湿因子与特异性结合的IgG反应而引起的假阳性结果，还可防止特异性IgG与IgM发生竞争性结合而引起的假阴性结果。标本采集后如不能在6 h内检测，以3 000 r/min离心10 min，置于2～8 ℃冰箱冷藏保存，可储存14 d。呼吸道病原体谱抗体诊断试剂盒产自德国欧蒙医学实验诊断股份公司。

1.3 观察指标①比较8项呼吸道病原体IgM抗体检测的总阳性率。②比较不同季节感染患者8项呼吸道病原体IgM抗体检测的阳性率。③比较阳性率最高的3项呼吸道病原体不同季节感染情况。④比较不同性别患者呼吸道病原体IgM抗体阳性情况。⑤比较不同年龄段患者呼吸道病原体情况。

1.4 统计学分析采用SPSS 23.0统计学软件进行数据处理。计数资料以[例(%)]表示，多组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 呼吸道病原体谱IgM抗体阳性情况比较2 323例血清样本中，阳性标本数为397例，总阳性率为17.09%。其中INFB阳性率最高（10.42%），INFA（2.11%）与LP（1.68%）分列第二、第三，见表1。

表1 呼吸道病原体谱IgM抗体检测阳性情况比较

2.2 不同季节呼吸道病原体IgM抗体阳性情况比较呼吸道病原体谱IgM检测结果在不同季节分布情况：阳性率较高的季节为夏季（22.26%）和秋季（20.77%），见表2。

表2 不同季节呼吸道病原体IgM抗体阳性情况比较

2.3 不同发病季节患者3种病原体感染情况比较总阳性率前三的病原体INFB、INFA、LP感染情况在不同季节之间比较，INFB阳性率高于INFA及LP，差异有统计学意义（P＜0.05)，见表3。

表3 不同季节3种病原体感染情况比较[例(%)]

2.4 不同性别患者呼吸道病原体抗体阳性情况比较男性INFA阳性率（2.77%）高于女性（1.10%），差异有统计学意义（P＜0.05），不同性别患者其他呼吸道病原体阳性率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表4。

表4 不同性别患者呼吸道病原体IgM抗体阳性情况比较 [例(%)]

2.5 不同年龄段患者呼吸道病原体IgM抗体阳性情况比较0～14岁年龄段以INFB（16.96%）和MP感染（10%）为主，其余两个年龄段均以INFB为主（15～59岁为11.96%，≥60岁为8.92%）。 0～14岁年龄段INFB及MP感染阳性率高于另外两个年龄组，差异有统计学意义（P＜0.05）；不同年龄的患者其他6项呼吸道病原体阳性率比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表5。

表5 不同年龄段患者呼吸道病原体IgM抗体阳性情况比较 [例(%)]

3 讨论

随着各种抗生素的广泛应用，呼吸道细菌的感染率有所下降，而非典型病原体，包括MP、CPn、病毒等病原体引起的呼吸道疾病发病率在不断升高[3]。

呼吸道病原体的检测方法主要有微生物培养法、血清学检测和分子生物学检测[4-5]。微生物培养法耗时长和检出率低；分子生物学检测呼吸道病原体成本高，技术要求高。使用间接免疫荧光法来检测血清样本中呼吸道病原IgM抗体具有高效、简便等特点，逐渐替代了“金标准”技术分离培养，并成为一种可靠的方法，适用于临床筛查。

本研究结果显示，2 323例血清样本中，8项呼吸道病原体IgM抗体检测的阳性率为17.09%，这与张博文等[6]的报道相对接近，但与杨翌翔等[7]的报道相比则有所降低，这可能与疫情后口罩佩戴情况及空气质量差异有关[8-9]。感染率最高的3种病原体分别是INFB（10.42%），INFA（2.11%）与LP（1.68%），与钟秋蓉等[10]报道的以MP，INFB及CPn为主不相符，本研究LP阳性率高于MP、CPn病原体的可能推测是因为疫情期间公众居家时间大幅增加，空调使用频率增加，导致人员更多地暴露于LP定植的环境[11]。

通过对不同季节呼吸道病原体感染情况的研究，结果显示，感染高峰期为夏秋季。与邱渊等[12]报道的春、夏季感染率较高略有不同，有可能是气候因素或者地域差异导致，具体有待进一步研究。本研究结果还显示，INFB、INFA、LP感染率在不同季节之间比较，差异有统计学意义，不同季节INFB阳性率均高于INFA、LP。

通过对不同性别患者呼吸道病原体感染进行分析，发现男性患者的INFA阳性率（2.77%）高于女性（1.10%），但具体原因尚不明确，有待进一步研究，而其他呼吸道病原体比较，差异无统计学意义。通过对不同年龄段患者呼吸道病原体感染进行分析，结果发现INFB在3个年龄段都易感，阳性率分别为16.96%，11.96%，8.92%。流感是最常见的呼吸道感染性疾病之一。其致病基因突变能力强，因而一次流感病毒感染不会产生终身免疫。对于高危易感人群，可在流感流行季节开始时接种疫苗进行免疫，减少感染率。0～14岁年龄段人群MP易感，阳性率为10%[15-16]。MP可引起非典型性肺炎和常见的上呼吸道感染。感染可通过汽溶胶引起，人类是该病原体的唯一宿主，急性感染常见于5～15岁的年轻人中[17-18]。本研究结果显示，0～14岁年龄段患者INFB和MP感染阳性率高于另外两个年龄段，其他6项呼吸道病原体阳性率比较，差异无统计学意义。

综上所述，呼吸道病原体致病性强，传播速度快，不同季节、不同性别、不同年龄段的阳性率不尽相同。故对8项呼吸道感染病原体IgM抗体的测定，能够为临床诊治提供可靠的信息，指导临床合理用药。