贝莱斯芽胞杆菌GZ86对马铃薯根际土壤酶活性的影响及促生作用

陈雨薇 王喜刚 郭成瑾 沈瑞清 刘东川

摘要

為探究生防菌对马铃薯根系土壤酶活性及马铃薯生长的影响。分别以马铃薯疮痂病Streptomyces scabies X1菌液、LB液体培养基以及生防菌贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis GZ86发酵液对马铃薯苗进行灌根处理，测定和比较不同时间段的土壤酶活性和马铃薯生长相关指标。结果表明：X1和贝莱斯芽胞杆菌GZ86处理后，马铃薯根际土壤中脲酶、蔗糖酶、过氧化氢酶和纤维素酶的活性明显高于病原菌处理和LB液体培养基处理。X1和GZ86处理后第30、60 天，土壤蔗糖酶活性达到高峰，分别比病原菌处理高1.70倍和2.71倍，土壤脲酶活性在施用后第10、20 天较病原菌处理分别提升了52.53%和59.48%;土壤纤维素酶和土壤过氧化氢酶活性在马铃薯生育期内呈上升下降上升下降的趋势。经X1和GZ86处理后马铃薯的侧根数、茎粗、地下部鲜重等各项生长指标都优于病原菌处理和培养基处理，处理后60 d株高和地下部鲜重分别较病原菌处理提高了34.65%和124.79%，茎粗较LB液体培养基处理平均增加0.53 cm。因此，生防菌处理不仅对马铃薯有促生作用，同时还能提高土壤关键酶活性。

关键词

马铃薯; 贝莱斯芽胞杆菌; 土壤酶活性; 促生作用

中图分类号：

S 476

文献标识码： A

DOI： 10.16688/j.zwbh.2022755

Effects of Bacillus velezensis GZ86 on the enzyme activities in potato rhizosphere soil and potato growth

CHEN Yuwei1， WANG Xigang2*， GUO Chengjin2， SHEN Ruiqing2*， LIU Dongchuan3

（1. College of Agriculture， Ningxia University， Yinchuan 750021， China; 2. Institute of Plant Protection， Ningxia 

Academy of Agricultural and Forestry Sciences， Yinchuan 750002， China; 3. Xiji County Potato Industry Service 

Center， Ningxia Hui Autonomous Region， Guyuan 756206， China）

Abstract

The purpose of this study was to test the effect of Bacillus velezensis on the enzyme activity of potato rhizosphere soil and potato growth. Potato seedlings were irrigated with suspension of Streptomyces scabies strain X1， LB liquid medium and suspension of X1 and Bacillus velezensis GZ86， respectively， the soil enzyme activities and the parameters related to potato growth during different time periods were measured and compared. The results showed that the activities of soil urease， sucrase， catalase and cellulase in the potato rhizosphere treated with suspension of X1 and GZ86 were significantly higher than those treated with pathogen and LB liquid medium. Among which the soil sucrase activity reached the peak on day 30 and 60 after rootirrigation， 1.70fold and 2.71fold higher than that of the pathogen treatment， respectively， the soil urease activity increased by 52.53% and 59.48% compared with pathogen treatment on day 10 and 20 after rootirrigation， and the soil cellulase and catalase activity showed a risingfallingrisingfalling trend during the potato growth period. After treated with suspension of X1 and GZ86， the number of lateral root， stem width， underground weight and other growth indexes of potato were better than those treated with pathogen and LB liquid medium. The plant height and underground weight were increased by 34.65% and 124.79% compared with the pathogen treatment， 60 d after rootirrigation， respectively， and the stem width was increased by 0.53 cm on average compared with the LB liquid medium treatment. Therefore， B.velezensis GZ86 not only promoted the growth of potato， but also improved the activity of key soil enzymes.

Key words

potato; Bacillus velezensis; soil enzyme activity; growthpromotion

我国马铃薯生产规模总体呈上升趋势，位居世界第一位［1］。宁夏已经把马铃薯主食化作为脱贫济困、促进增收的重大举措，大力发展马铃薯特色产业［2］。马铃薯疮痂病发生日益严重， 已上升为马铃薯重要病害， 严重影响马铃薯的产量及品质［3］。目前防治马铃薯疮痂病主要使用化学农药［4］。然而化肥农药过量使用会加重土壤酸化和盐渍化［5］，导致土壤酶活性降低［6］、土壤板结［7］，造成土壤污染［8］，土壤肥力下降，理化性能失衡［9］，土壤生态系统被扰乱。微生物种群数量和土壤酶活性是土壤微生态系统的直观表征［10］。土壤酶是土壤有机体的代谢动力，在土壤生态系统的物质循环和能量转化中起着非常重要的作用［11］。 土壤微生物是土壤酶的主要來源，其活动能力受土壤养分的影响［12］。因此通过向土壤中施用有益微生物来调节土壤区系，降解有害物质，同时防治马铃薯疮痂病受到国内外广泛关注。

贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis是一种常见的植物根际促生菌。目前贝莱斯芽胞杆菌被制作成微生物菌肥或生物杀菌剂，用于多种植物病害的防治［13］。贝莱斯芽胞杆菌能够产生促生物质，促进植物对环境中氮磷钾等元素的吸收利用或间接诱导植物产生抗性［14］，其可产生大量具有生物活性的次生代谢物，抑制植物病原体和有害根际微生物的生长［1516］。芽胞杆菌可以在高温、干燥的环境中存活，并且能够制成保质期长的稳定剂型［17］。此外，贝莱斯芽胞杆菌为植物根系微生物群落的常见细菌，在应用过程中对植物根际微生物群落的组成几乎没有影响［18］，属于安全稳定的生防菌种。

贝莱斯芽胞杆菌GZ86是本实验室分离的一株具有较强抑菌作用的生防菌， 该菌株对马铃薯疮痂病具有较好的防治效果，为了探究贝莱斯芽胞杆菌对土壤酶活性的影响以及对马铃薯的促生作用，本试验通过盆栽灌根处理，在不同时期采集土壤进行酶活测定，以监测酶活的变化趋势和差异;同时对不同生长时期马铃薯的株高、根重、侧根数等生长相关数据进行测量，为阐明贝莱斯芽胞杆菌对土壤酶活性的影响及其促生作用机理提供参考。

1 材料与方法

1.1 供试材料

疮痂链霉菌 Streptomyces scabies菌株X1，贝莱斯芽胞杆菌Bacillus velezensis菌株GZ86（保藏编号：CGMCC 25699），由宁夏农林科学院植物保护研究所马铃薯研究课题组分离纯化保存。

GZ86发酵培养基：葡萄糖10 g/L，牛肉膏7.5 g/L，KH2PO4 12 g/L。LB液体培养基、LB固体培养基、PDA培养基、高氏一号培养基参照陈志垚［19］的方法配制。

供试盆栽土壤：营养土与蛭石按体积比为3∶1配制。土壤脲酶试剂盒（BC0125），土壤纤维素酶试剂盒（BC0155）、土壤蔗糖酶试剂盒（BC0245）、土壤过氧化氢酶试剂盒（BC0105）购自北京索莱宝科技有限公司。

1.2 试验方法

1.2.1 菌悬液制备

取活化的贝莱斯芽胞杆菌GZ86单菌落接种到装有150 mL液体发酵培养基的三角瓶中，37℃、220 r/min 发酵培养32 h，使菌液浓度达到108 cfu/mL。发酵液12 000 r/min离心10 min，弃上清，沉淀加灭菌水稀释至1×108 cfu/mL。采用同样的方法将疮痂链霉X1制备成浓度1×109 cfu/mL 的菌悬液。

1.2.2 贝莱斯芽胞杆菌GZ86对马铃薯根际土壤酶活性的影响

种薯催芽后切成大小相近的三角块（20～25 g），种植于直径25 cm的花盆，待长至4叶期浇灌不同处理溶液。试验共设3个处理，每处理3次重复。T1：浇灌100 mL 1×109 cfu/mL的疮痂链霉菌X1菌悬液后浇灌清水100 mL;T2：浇灌清水100 mL后浇灌100 mL LB液体培养基;T3：浇灌100 mL 1×109 cfu/mL的疮痂链霉菌X1菌悬液后浇灌100 mL 1×108 cfu/mL GZ86菌悬液。分别在处理后0、10、20、30、40、50、60、70、80、90 d在约5～15 cm土壤深处取土样2 g。用1.1中的试剂盒检测土壤脲酶、蔗糖酶、纤维素酶和过氧化氢酶活性。

1.2.3 贝莱斯芽胞杆菌GZ86对马铃薯生长的影响

种薯催芽后切成大小相近的三角块（20～25 g），种植于直径25 cm的花盆，处理同1.2.2。分别在马铃薯生长30 d和60 d时，对测定植株株高、侧根数、分枝数、地下部鲜重、地上部鲜重和茎粗。

1.2.4 数据处理

用SPSS 16.0软件进行数据分析，应用Oneway ANOVA和LSD法进行不同处理组和对照组的土壤酶活性及生长量差异显著性检验，用Graphpad prism 8.0作图。

2 结果与分析

2.1 贝莱斯芽胞杆菌GZ86对马铃薯根际土壤酶活性影响

2.1.1 GZ86对马铃薯根际土壤脲酶（SUE）活性的影响

土壤中脲酶活性的测定结果如图1所示。在马铃薯生育期内，不同处理间土壤脲酶活性存在显著差异（P<0.05）。病原菌X1+GZ86施入土壤0 h 土壤脲酶活性为1.5 mg/g，处理后10 d，病原菌X1处理、LB液体培养基处理以及X1+贝莱斯芽胞杆菌GZ86处理土壤脲酶活性较处理当天分别提升了62.69%、17.76%、145.57%;X1+GZ86处理的土壤脲酶活性在处理后10 d和20 d连续升高，分别为（3.77±0.63） mg/g和（4.22±0.25） mg/g，较X1处理提高了52.53%、59.48%，处理90 d时土壤脲酶活性与LB处理没有显著性差异，显著高于X1处理。

2.1.2 GZ86对马铃薯根际土壤蔗糖酶（SSC）活性的影响

GZ86对土壤蔗糖酶的影响如图2所示。X1+GZ86处理后30～80 d是马铃薯快速生长期和薯块淀粉积累关键时期，这个时期根际土壤蔗糖酶活性分别为（100.34±8.56）（91.01±3.18）（92.88±9.14）（108.34±6.35）（72.12±4.70） μg/g和（67.22±2.48） μg/g，比X1处理分别高1.70、1.36、1.94、2.71、1.07倍和1.09倍。X1处理的土壤蔗糖酶活性除在马铃薯生长初期相比LB处理有短暂提升外，其他时期均和LB处理保持在一个水平，变化幅度较小，说明病原菌不能提高土壤蔗糖酶活性。

2.1.3 GZ86对马铃薯根际土壤纤维素酶（SCL）活性的影响

GZ86对土壤纤维素酶的影响如图3所示，不同处理土壤纤维素酶活性的变化情况存在明显差异（P<0.05）。X1处理的土壤纤维素酶活性变化趋势是先上升再下降，X1+GZ86處理的土壤纤维素酶活性则在第20、50天出现两次高峰，分别为（129.76±1.48） μg/g和（116.23±4.57） μg/g。X1+GZ86处理后50 d的土壤纤维素酶活性比X1处理和LB处理处理高1.26倍和1.19倍，随后酶活性有所下降，保留在一个比较低的水平。由此可见，X1+GZ86处理的马铃薯植株根际土壤纤维素酶活性在整个测试期均处于较高状态（除前10 d），其最佳使用周期为20～60 d，LB处理组酶活性相对较低， 但介于生防菌处理组与病原菌处理组之间， 表明生防菌对土壤根际的纤维素酶活性具有促进作用。

2.1.4 GZ86对马铃薯根际土壤过氧化氢酶（SCTA）活性的影响

GZ86对土壤过氧化氢酶活性的影响如图4所示，不同处理土壤过氧化氢酶活性的变化情况存在明显差异（P<0.05）。病原菌X1处理后，过氧化氢酶活性除在20 d略高于X1+GZ86处理外，30～90 d均低于X1+GZ86处理，说明病原菌抑制土壤过氧化氢酶活性;X1+GZ86处理，过氧化氢酶活性在第30天出现高峰，达（89.71±7.01）μg/g，比X1处理、LB处理分别提高了13.60%和19.28%;在马铃薯成熟至收获期（60～90 d），X1+GZ86处理的过氧化氢酶活性始终高于其他2个处理，分别为88.94、87.73、85.13、83.75 μg/g，为X1处理的过氧化氢酶活性的1.15、1.10、1.12、1.08倍，说明生防芽胞杆菌能够提高土壤过氧化氢酶的活性。

2.2 贝莱斯芽胞杆菌GZ86对马铃薯生长的影响

处理后30 d，X1+GZ86处理的马铃薯株高比X1处理、LB处理分别高32.57%和16.79%;X1+GZ86处理的侧根数与LB处理比没有较大的差异，但是比X1处理增加了41.00%;地下部鲜重较X1处理、LB处理增加了64.25%和46.08%（表1）。处理后60 d，X1+GZ86处理的马铃薯植株的株高显著高于其他2个处理，较X1处理、LB处理分别提高了34.65%、9.21%;侧根数分别增加了1.1倍、0.43倍;地下部鲜重较病原菌处理了增加了1.25倍，茎粗增加了85.71%。说明贝莱斯芽胞杆菌GZ86处理的马铃薯各种生长指标都优于对照组以及病原菌组，对马铃薯的生长具有促进作用（图5）。

3 结论与讨论

土壤酶活性受土壤微生物［20］、田间水肥管理［21］、土壤理化性质［22］等诸多因素调控。土壤酶主要吸附在土壤有机质和矿物质胶体上，常以复合态存在于环境中，其活性是反映土壤养分循环、有机质分解转化、土壤肥力的重要指标［23］。土壤脲酶为生物化学反应的重要参与者，其在生态系统的能量流动和物质循环中发挥着关键作用［24］，并且能够在有氧条件下催化植物、藻类、真菌和细菌水解成尿素，且土壤脲酶活性在一定范围与土壤含氮量呈极显著正相关［2527］。本试验经过X1+GZ86处理后土壤脲酶活性呈先高后低的趋势，在马铃薯生长后期土壤脲酶活性有所下降，符合马铃薯生长需肥规律，此时较低的土壤脲酶活性，有利于马铃薯生长后期土壤矿质氮和土壤氮代谢活性，与马铃薯氮肥吸收特性更加匹配，从而提高马铃薯干物质量及产量［28］。

土壤蔗糖酶是一种能使高分子量的蔗糖分解成葡萄糖和果糖的水解酶［29］，其活性与碳循环中起主要作用的土壤有机碳的矿化速率密切相关［30］。韩忠明等［31］的研究结果表明，适量施入微生物菌剂有利于提高土壤肥力，其中以施入5 g/m2哈茨木霉Trichoderma harzianum菌剂和2 g/m2多黏类芽胞杆菌Paenibacillus polymyxa剂处理的土壤蔗糖酶活性最高。本研究结果中经过病原菌X1和贝莱斯芽胞杆菌GZ86处理后马铃薯快速生长期（30～60 d）的土壤蔗糖酶活性显著高于病原菌处理和培养基处理，说明使用适宜微生物菌剂可以显著提高土壤蔗糖酶活性，这与范娜等［32］对土壤蔗糖酶的研究结果基本一致。

土壤纤维素酶的作用主要是加快代谢速率和物质的循环和转化，水解不溶性纤维素产生可利用的葡萄糖［3334］。Han报道［35］纤维素酶能够提高水稻和小麦秸秆的分解率，可分别提高6.3%～26.0%和6.8%～28.0%，并且在土壤中有效期长达100 d。本研究中，贝莱斯芽胞杆菌可以提高土壤纤维素酶活性，通过增加土壤肥力促进植株生长，这与杨威等［36］报道的芽胞杆菌微生物菌肥可提高作物不同生长期纤维素酶活性，以及张宇冲等［37］报道的芽胞杆菌增加土壤中纤维素酶活性的研究结果一致。

土壤过氧化氢酶能促进过氧化氢的分解，有效防止土壤及生物体在新陈代谢过程中产生的过氧化氢对其造成毒害。土壤中过氧化氢酶活性被作为评价需氧微生物活性的指标，还与需氧微生物数量和土壤肥力密切相关［3839］;对土壤过氧化氢酶活性起主导作用的因子是pH和有机质［40］。本试验结果表明，经贝莱斯芽胞杆菌GZ86处理后的马铃薯根际土壤过氧化氢酶活性呈现先升后降的趋势，且在旺长期达到峰值，可能是由于在施用芽胞杆菌菌剂后，土壤中的微生物数量增加，活性增强，从而加剧了对土壤中过氧化氢的分解能力，这与前人研究结果近似［4142］;但在生长后期，本试验土壤过氧化氢酶活性处于一个较低的状态，这一现象可能与各个阶段马铃薯土壤过氧化氢含量不同有关，其原因尚待进一步探讨。

植物根际存在大量的有益微生物，可以促进植株生长，提高植株抵御不良胁迫的能力。芽胞杆菌作为已被广泛接受的一种植物根际促生菌，在促进作物生长方面具有显著效果。邵美琪等［43］报道胁迫环境下，枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis NCD2菌株通过提高番茄体内抗逆相关酶的活性和脱落酸的含量，从而提高了番茄对盐胁迫的耐受能力，促进植株的生长发育;贝莱斯芽胞杆菌J4处理后，桃树植株的株高、根长、鲜重、干重、叶绿素含量等生物指标都显著增加，且对根腐病防治效果达到了58.06%［44］;许多研究表明，贝莱斯芽胞杆菌对草莓［45］、番茄［46］、小麦［47］、香蕉［48］等植物具有促生作用，本试验发现贝莱斯芽胞杆菌GZ86对马铃薯的株高、侧根数、分枝数、地下部鲜重、地上部鲜重均具有促进作用，其中株高、地下部鲜重、茎粗比X1处理分别增加了34.65%、124.79%和85.71%。

植物根际促生菌的促生作用可分为直接作用和间接作用两种方式，直接作用通过产生次生代谢物质，如激素、氨基酸和维生素等供植物利用或调控植物生长发育［4951］，如短小芽胞杆菌Bacillus pumilus可以大量产生吲哚乙酸（IAA），施加1%短小芽胞杆菌菌悬液即可显著促进黄瓜幼苗生长［52］;间接作用机制指植物根际促生菌定殖后，通过调节根围土壤中其他生物的群落及代谢功能，间接促进植物生长［53］，如贝莱斯芽胞杆菌在植株根系的定殖导致假黄单胞菌属Pseudoxanthomonas sp.、微杆菌属Microbacterium sp.、鞘氨醇单胞菌属Sphingomonas sp.等有益微生物菌落数量明显增多进而促进植株生长［54］。有研究表明，土壤酶活性是微生物功能的一种表现，微生物根据其需求和底物的可用性来合成酶，将有机大分子分解为可供植物吸收的单体，从而影响土壤中营养物质的转化［55］。因此，下一步应对芽胞杆菌应用后马铃薯代谢物质变化、土壤养分利用和土壤微生物菌群进行研究，阐明贝莱斯芽胞杆菌GZ86对马铃薯促生作用的机理。

参考文献

［1］ 罗其友， 伦闰琪， 高明杰， 等. 2021—2025年我国马铃薯产业高质量发展战略路径［J］. 中国农业资源与区划， 2022， 43（3）： 3745.

［2］ 郑方， 徐青， 马力文， 等. 宁夏马铃薯产量形成的关键影响气象因素分析［J］. 陕西农业科学， 2020， 66（11）： 5056.

［3］ 聂峰杰， 陈虞超， 巩檑， 等. 马铃薯疮痂病致病链霉菌分类及其致病机理研究进展［J］. 分子植物育种， 2018， 16（4）： 13131319.

［4］ 夏善勇， 牛志敏， 李庆全， 等. 马铃薯疮痂病菌及防控手段研究进展［J］. 中国瓜菜， 2022， 35（8）： 1217.

［5］ 万雷， 张琼. 化学农药在土壤中的迁移转化与防治措施［J］. 现代农业， 2012（5）： 5152.

［6］ 常文智， 马鸣超， 李力， 等. 施用胶质类芽孢杆菌对土壤生物活性和花生产量的影响［J］. 中国土壤与肥料， 2014（1）： 8489.

［7］ 徐钊. 南阳市砂姜黑土土壤板结的原因、危害及防止方法［J］. 河南农业， 2020（4）： 1819.

［8］ 王新， 侯佳文， 宋磊， 等. 植物微生物联合修复化学农药污染土壤的研究进展［J］. 生物安全学报， 2022， 31（3）： 217223.

［9］ 农丽潇. 化肥零增长对农业绿色可持续发展的作用［J］. 現代农业研究， 2020， 26（6）： 4445.

［10］VACHERON J， DESBROSSES G， BOUFFAUD M L， et al. Plant growthpromoting rhizobacteria and root system functioning ［J/OL］. Frontiers in Plant Science， 2013， 4： 356. DOI：10.3389/fpls.2013.00356.

［11］ZHENG Tiantian， LIANG Chao， XIE Hongtu， et al. Rhizosphere effects on soil microbial community structure and enzyme activity in a successional subtropical forest ［J/OL］. FEMS Microbiology Ecology， 2019， 95（5）： fiz043. DOI： 10.1093/femsec/fiz043.

［12］胡亞杰， 韦建玉， 张纪利， 等. 枯草芽孢杆菌对植烟土壤养分含量与酶活性的影响［J］. 作物研究， 2019， 33（6）： 561566.

［13］FAN Ben， WANG Cong， DING Xiaolei， et al. AmyloWiki： an integrated database for Bacillus velezensis FZB42， the model strain for plant growthpromoting bacilli ［J/OL］. Database， 2019， 2019： baz071. DOI： 10.1093/database/baz071.

［14］陈冉， 姜伟涛， 赵蕾， 等. 贝莱斯芽孢杆菌XC1对苹果连作土壤酚酸含量及平邑甜茶幼苗生长的影响［J］. 植物生理学报， 2021， 57（10）： 19741982.

［15］刘雪娇， 李红亚， 李术娜， 等. 贝莱斯芽孢杆菌3A315生防和促生机制［J］. 河北大学学报（自然科学版）， 2019， 39（3）： 302310.

［16］RABBEE M F， ALI MD S， CHOI J， et al. Bacillus velezensis： A valuable member of bioactive molecules within plant microbiomes ［J/OL］. Molecules， 2019， 24（6）： 1046. DOI： 10.3390/molecules24061046.

［17］CHOWDHURY S P， DIETEL K， RNDLER M， et al. Effects of Bacillus amyloliquefaciens FZB42 on lettuce growth and health under pathogen pressure and its impact on the rhizosphere bacterial community ［J/OL］. PLoS ONE， 2013， 8（7）： e68818. DOI： 10.1371/journal.pone.0068818.

［18］WU Liming， WU Huijun， QIAO Junqing， et al. Novel routes for improving biocontrol activity of Bacillus based bioinoculants ［J/OL］. Frontiers in Microbiology， 2015， 6： 1395. DOI： 10.3389/fmicb.2015.01395.

［19］陈志垚. 马铃薯疮痂病菌拮抗细菌的筛选及其生防机制初步研究［D］. 大庆： 黑龙江八一农垦大学， 2021.

［20］刘水. 土壤酶活性影响因子综述［J］. 北京农业， 2014（21）： 249.

［21］林秀颜， 江赜伟， 陈曦， 等. 稻田土壤微生物数量和酶活性对水碳调控的响应［J］. 中国农学通报， 2021， 37（7）： 7580.

［22］莫雪， 陈斐杰， 游冲， 等. 黄河三角洲不同植物群落土壤酶活性特征及影响因子分析［J］. 环境科学， 2020， 41（2）： 895904.

［23］裴鹏刚， 张均华， 朱练峰， 等. 秸秆还田的土壤酶学及微生物学效应研究进展［J］. 中国农学通报， 2014， 30（18）： 17.

［24］PHANG I R K， CHAN Y S， WONG K S， et al. Isolation and characterisation of ureaseproducing bacteria from tropical peat ［J］. Biocatalysis and Agricultural Biotechnology， 2017， 13： 168175.

［25］张海鑫， 曾全超， 安韶山， 等. 子午岭典型植被凋落叶土壤养分与酶活性特征［J］. 生态学报， 2018， 38（7）： 22622270.

［26］杨宁， 邹冬生， 杨满元， 等. 衡阳紫色土丘陵坡地不同植被恢复阶段土壤酶活性特征研究［J］. 植物营养与肥料学报， 2013， 19（6）： 15161524.

［27］隋跃宇， 焦晓光， 高崇生， 等. 土壤有机质含量与土壤微生物量及土壤酶活性关系的研究［J］. 土壤通报， 2009， 40（5）： 10361039.

［28］苏苗苗. 施肥对稻田土壤脲酶动力学和热力学参数的影响研究［D］. 杭州： 浙江大学， ;2012.

［29］严君， 韩晓增， 王树起， 等. 不同形态氮素对种植大豆土壤中微生物数量及酶活性的影响［J］. 植物营养与肥料学报， 2010， 16（2）： 341347.

［30］解媛媛， 谷洁， 高华， 等. 微生物菌剂酶制剂化肥不同配比对秸秆还田后土壤酶活性的影响［J］. 水土保持研究， 2010， 17（2）： 233238.

［31］韓忠明， 杨颂， 韩梅， 等. 不同菌剂对人参连作土壤酶活性的影响［J］. 东北农业科学， 2016， 41（1）： 5053.

［32］范娜， 彭之东， 白文斌， 等. 微生物菌剂对土壤酶活性及高粱生长的影响［J］. 中国农业科技导报， 2021， 23（2）： 185192.

［33］张丽丽. 筛选高效半纤维素降解菌及利用秸秆发酵酒精研究［D］. 武汉： 华中农业大学， 2010.

［34］李乐， 李明星， 汤国雄， 等. 一株纤维素酶产生菌的筛选与产酶特性研究［J］. 环境科技， 2019， 32（1）： 2429.

［35］HAN Wei， HE Ming. The application of exogenous cellulase to improve soil fertility and plant growth due to acceleration of straw decomposition ［J］Bioresource Technology， 2010，101（10）：37243731.

［36］杨威， 闫海霞， 张贝贝， 等. 施用微生物菌肥“宁盾”对辣椒根围细菌多样性及土壤酶活性的影响［J］. 江苏农业科学， 2018， 46（9）： 99103.

［37］张宇冲， 何思蓓， 高灵会， 等. 生物有机肥对芦笋土壤酶活性及细菌群落的影响［J］. 北方园艺， 2019（12）： 8391.

［38］GARCI＇A C， HERNNDEZ T. Biological and biochemical indicators in derelict soils subject to erosion ［J］. Soil Biology and Biochemistry， 1997， 29（2）： 171177.

［39］BANRJEE B D， SETH V， BHATCHARYA A， et al. Biochemical effects of some pesticides on lipid peroxidation and freeradical scavengers ［J］. Toxicology Letters， 1999， 107： 3347.

［40］孙慧， 张建锋， 胡颖， 等. 土壤过氧化氢酶对不同林分覆盖的响应［J］. 土壤通报， 2016， 47（3）： 605610.

［41］曾庆宾， 李涛， 王昌全， 等. 微生物菌剂对烤烟根际土壤脲酶和过氧化氢酶活性的影响［J］. 中国农学通报， 2016， 32（22）： 4650.

［42］刘素慧， 尉辉， 徐金强， 等. EM菌对连作大蒜形态和生理生化指标的影响［J］. 江苏农业科学， 2016， 44（2）： 192194.

［43］邵美琪， 赵卫松， 苏振贺， 等. 盐胁迫下枯草芽孢杆菌NCD2对番茄促生作用及对土壤微生物群落结构的影响［J］. 中国农业科学， 2021， 54（21）： 45734584.

［44］成娜娜. 贝莱斯芽孢杆菌J4对桃树根腐病的生防效果及其促生作用研究［D］. 泰安： 山东农业大学， 2021.

［45］SYlLLA J， ALSANIUS B W， KRGER E， et al. Leaf microbiota of strawberries as affected by biological control agents ［J］. Phytopathology， 2013， 103（10）： 10011011.

［46］AlAlI A， DERAVEL J， KRIER F， et al. Biofilm formation is determinant in tomato rhizosphere colonization by Bacillus velezensis FZB42 ［J］. Environmental Science and Pollution Research International， 2018， 25（30）： 2991029920.

［47］夏明聰， 邓晓旭， 齐红志， 等. 贝莱斯芽孢杆菌YB145对小麦纹枯病的防治效果及促生作用［J］. 河南农业科学， 2021， 50（10）： 7683.

［48］王松. 贝莱斯芽孢杆菌YQ1菌株对香蕉枯萎病菌的拮抗效果研究［D］. 昆明： 云南大学， 2020.