益气化痰祛瘀方对冠心病大鼠纤溶系统的影响*

河北省乐亭县中医院 左海宁 张东梅 张文立 赵淑明 (乐亭063600)

冠心病是由冠状动脉粥样硬化导致冠脉管腔狭窄和冠脉痉挛性改变，引起冠状动脉供血相对不足，致使心肌缺血、缺氧所引起的心脏疾病。益气化痰祛瘀方经多年临床观察，治疗冠心病的疗效显著。前期研究表明，本方通过调节冠心病大鼠6－Keto－PGF1а与TXB2的平衡状态，以达到减轻实验动物冠心病病变的作用。［1］据报道，冠心病的发生、发展与纤溶系统的异常亦有着密切的关系，本研究旨在通过实验观察益气化痰祛瘀方对冠心病大鼠心肌和主动脉组织PAI－1、t－PA表达的影响，了解其对冠心病大鼠纤溶系统的影响。

1 材料与方法

1.1 药物及组成 益气化痰祛瘀方由黄芪、桂枝、瓜蒌、薤白、半夏、川芎、赤芍、三七等组成，由河北医科大学中医学院中药制剂室水煎浓缩备用;复方丹参滴丸(天津天士力制药股份有限公司);垂体后叶素注射液 (南京新百药业有限公司)。

1.2 仪器与试剂 BL－420E+生物机能实验系统、PM－10AD光学显微镜、Motic6.0数码医学图象分析系统;PAI－1、t－PA免疫组化试剂盒。

1.3 动物分组、模型建立及给药方法 健康雄性SD大鼠60只 (河北医科大学动物实验中心提供，合格证号:810054)，体质量 (170±10)g，随机分为正常对照组 (简称正常组)、模型对照组 (简称模型组)、益气化痰祛瘀方高剂量组 (简称高剂量组)、益气化痰祛瘀方低剂量组(简称低剂量组)、复方丹参滴丸对照组 (简称对照组)，每组12只;除正常组外，按参考文献［2］建立大鼠冠心病模型，喂饲高脂饲料 (2%胆固醇、10%猪油、0.2%丙基硫氧嘧啶、0.5%胆酸钠、87.3%基础饲料)6周，同时灌服药物，高剂量组给予益气化痰祛瘀方药22.28 g/kg·d－1、低剂量组给予益气化痰祛瘀方药11.14 g/kg·d－1，对照组给予复方丹参滴丸0.17 g/kg·d－1，正常组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃，1次/d。于末次灌胃前72 h始，除正常组外，每次灌胃30 min后，腹腔注射垂体后叶素30 u/kg·d－1，连续3 天。

1.4 检测指标

1.4.1 心电图检测:实验6周末，末次腹腔注射垂体后叶素12 h后，20%乌拉坦腹腔注射麻醉，连接BL－420E+生物机能实验系统，将其针状电极分别插入大鼠左前肢和双后肢皮下，记录Ⅱ导联心电图ST段抬高或降低的幅度 (mv)。

1.4.2 心肌和主动脉组织PAI－1、t－PA表达的检测:

剖取心脏和升主动脉，在心尖部取适量的心肌组织，滤纸吸干，4%多聚甲醛固定，采用免疫组织化学染色SP法检测心肌和主动脉组织PAI－1、t－PA表达，每张切片选择5个高倍视野，连接Motic Med 6.0数码医学图像分析系统检测阳性细胞光密度值，取其均值。

2 结果

2.1 益气化痰祛瘀方对冠心病大鼠心电图ST段的影响

从表1可见，模型组大鼠心电图ST段的变化值明显高于正常组(P＜0.01);给药后，各用药组大鼠心电图ST段的变化值均明显低于模型组 (P＜0.01);各治疗组之间比较差异无显著性 (P＞0.05)。

2.2 益气化痰祛瘀方对冠心病大鼠心肌、主动脉组织PAI－1、t－PA表达的影响 从表1可见，模型组大鼠心肌和主动脉组织PAI－1表达增强 (P＜0.01)，t－PA表达减弱 (P＜0.01);各给药组大鼠心肌和主动脉组织PAI－1表达均较模型组减弱 (P＜0.01)，t－PA表达均较模型组增强 (P＜0.01);且高、低剂量组优于对照组 (P＜0.05或P＜0.01)，但高、低剂量组间差异无显著性 (P＞0.05)。

表1 各组大鼠心电图ST段变化以及心肌、主动脉组织PAI－1、t－PA的表达情况(±s，n=12)

表1 各组大鼠心电图ST段变化以及心肌、主动脉组织PAI－1、t－PA的表达情况(±s，n=12)

注:与模型组比较，*P＜0.01;与对照组比较，△P＜0.01，△△P＜0.05

组别 ST段变化值(mv)PAI－1心肌 主动脉t－PA心肌 主动脉正常组 0.14±0.05* 0.121±0.027* 0.126±0.024* 0.219±0.040* 0.283±0.036*模型组 0.28±0.04 0.269±0.023 0.251±0.026 0.096±0.021 0.150±0.039对照组 0.20±0.04* 0.166±0.023* 0.184±0.026* 0.167±0.024* 0.211±0.023*高剂量组 0.19±0.03* 0.125±0.024＊△ 0.145±0.020＊△ 0.205±0.026＊△ 0.261±0.038＊△低剂量组 0.20±0.05* 0.133±0.022＊△ 0.159±0.028＊△△ 0.196±0.028＊△△ 0.255±0.046＊△△

3 讨论

中医学无冠心病之论述，据其病因、病机及证侯，属于中医学“胸痹”、“心痛”范畴。其发病主要是由于年老体虚或中年过劳，正气不足，阴阳气血失调，加之七情内伤、饮食不节、寒冷刺激、劳逸失度等因素的影响，终致气滞血瘀，胸阳不振，痰浊内生，痰瘀痹阻于心脉而致本病。本病是“本虚标实”、“虚实夹杂”的复杂过程。本虚是指气、血、阴、阳的亏损或不足，标实是指“阴寒、痰浊、血瘀”而言，尤以阳气不足，痰瘀互结最为常见。据此，课题组精选益气温阳，化瘀祛痰中药组成益气化痰祛瘀方，经临床应用疗效显著。方中黄芪、桂枝益气温阳，瓜蒌、薤白、半夏化痰宽胸，通阳散结;川芎、三七、赤芍活血化瘀，行气止痛。诸药合用共奏益气温阳，化痰祛瘀，通脉止痛之功。

现代研究发现，冠心病发生的危险因素除高血脂、高血压、吸烟之外，纤溶系统功能异常亦是其促发因素之一，通过影响纤溶酶原激活物 (t－PA)及其抑制物 (PAI－1)的活性导致肌体纤溶能力降低，［3］加速动脉粥样硬化的形成和发展。纤溶系统主要由纤溶酶原、纤溶酶、纤溶酶原激活物 (PA)和纤溶酶原激活物抑制物组成。其中纤溶酶原激活物 (PA)有两种类型:组织型 (t－PA)和尿激酶型(u－PA)，PA可激活纤溶酶原，降解纤维蛋白、细胞外基质和黏附蛋白;纤溶酶原激活物抑制物有4种类型:内皮细胞型PA I(PAI－1)、胎盘型PAI(PAI－2)、尿型PAI(API－3)和连接蛋白酶－1(protease nexin－1)，其中起重要作用的是PAI－1，具有灭活t－PA作用。

研究亦表明:纤溶系统的异常是导致血栓形成的重要原因之一，而血栓的形成与冠心病的发生、发展密切相关。［4］t－PA和PAI－1是一对在维持肌体纤溶系统活性中起关键性调节作用的物质，［5］t－PA可加速纤维蛋白溶解，防止血栓形成;而PAI－I可对抗t－PA，抑制纤维蛋白溶解，促进止血和血栓形成。可见PAI－1在冠心病的病理生理环节上起着关键作用，［6］且其高表达亦可促进巨噬细胞和平滑肌的迁徙，加速动脉硬化。因此，纤溶系统中t－PA和PAI－I平衡破坏及活性异常可能是冠心病发生的直接原因。

本研究结果显示:益气化痰祛瘀方具有改善冠心病大鼠心肌缺血的功效，其作用机制可能通过下调心肌和主动脉组织PAI－1受体表达，增强t－PA受体表达，调节纤溶系统，从而阻止冠状动脉粥样硬化和血栓形成，增加冠脉血流量，改善心肌供血，达到治疗冠心病的目的。

［1］赵淑明，张文立，吴中秋，等.益气化痰祛瘀方对冠心病大鼠6－酮前列腺素F1а和血栓素B2的影响［J］.河北中医药学报，2011，26(2):7

［2］张明雪，常艳鹏，曹洪欣．温阳活血中药复方调控冠心病(心)阳虚血瘀证大鼠血小板内受体、信号转导的作用机制研究 ［J］．中华中医药杂志，2008，23(6):494－497

［3］马建林，王圣，李新明，等．冠心病心绞痛患者纤溶系统与一氧化氮的变化［J］．心脏杂志，2007，29(1):131

［4］Gibbs CR，BlannAD，Watson RD et al．Abnormalities of hemorheo logical，endothelial，and pulatelet fun ction in patients with chronic heart failure in sinus rhythm:effects of angiotensin－converting enzyme inhibitor and beta－blocker therpy［J］．Circulation，2001，103(13):1 746－1 951

［5］Nordt TK，Lutzi S，Ruef J，et al．Attenuation by fibrates of plasmino－gen activator inhibitor type－1 expression in human arterial smooth muscle cells ［J］．Thromb Haemost，2001;86:1 305－1 313

［6］RollerRE，Janisch S，Carroll et a1．Changes in the fi－brinolytic systemin patientswith peripheral artrial occlu－sive disase undergoing percutaneous transluminal angio－plasty［J］．Thromb Res，1999，94:241－247