儿童 AST、LDH、CK、α-HBDH、CK-MB 项目生物参考区间适用性验证探讨

甘立新，韩 刚，吴远江，郑建华，杨慧蓉，周剑楠

(1、湖北省咸宁市妇幼保健院，湖北 咸宁 437100；2、湖北省秭归县中医医院，湖北 秭归 443600)

生物参考区间是解释、分析检验结果的依据和尺度[1]。临床检验对象是患者，由于年龄、性别、民族、居住地等原因引起的差异，不同个体的生物参考区间也有差异。另外，在一些医院实验室对同一检测项目使用多套检测系统，由于检验方法的差异，也会导致结果的不一致；或同一检测方法，仪器试剂不同，检验结果也会产生差异。根据ISO15189：2003《医学实验室—质量和能力的专用要求》，实验室必须慎重建立自己的生物参考区间，并定期评审。本文采用NCCLS C28-42推荐方法，对心肌酶五项指标 AST、LDH、CK、α-HBDH、CK-MB 的生物参考区间的适用性进行验证。

1 材料与方法

1.1 标本来源 健康参考个体40名来源于体检中心幼儿入园或入学体检的健康儿童，健康参考个体的具体条件：(1)没有任何影响检测结果的生理指标；(2)未服用药物或进行饮食治疗；(3)发育、精神正常，无心血管、肺、肾和肝、胆、胰等器质性疾患；(4)3个月内无输血和手术史；1个月内未患任何疾患。

1.2 标本准备与处理 对合格的参考个体按 《检验标本采集手册》采集标本、送检及时分离血浆，所测试标本性状正常，无溶血、无脂血。五个生化项目于采集标本后2h内完成测试，

1.3 仪器 日立7020全自动生化分析仪。操作过程严格遵照实验室SOP文件的有关要求，操作人员固定，仪器运转状态良好。

1.4 方法

1.4.1 质控 质控品为美国bio rad公司生产，质控品批号为201101，有效期至2012年1月。

1.4.2 校准 校准品为英国朗道公司生产，校准品批号为682UN，有效期至2012年12月。

1.4.3 试剂 天冬氨酸氨基转移酶(AST)为上海丰汇公司提供；乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸激酶(CK)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)、肌酸激酶同工酶(CKMB)为德赛诊断系统(上海)有限公司提供。

1.4.4 验证项目的确定 本文选择的项目有5项：AST、LDH、CK、α-HBDH、CK-MB， 参 照 NCCLSC 28-42推荐方法要求进行验证。

1.4.5 对参考区间的验证 收集40名健康个体标本，在经过性能评价、验证可靠的检测系统上检测，检测结果95%(38名)在现用或新建检测方法新引用参考区间以内，2名结果在现用或假设参考区间以外，判定该参考区间有效。假如实验数据有3名或3名以上检测结果在参考区间以外，先检查检测系统性能、检测程序是否正确，然后考虑该项目是否具有人群生物特性，做进一步调查，重新选择合适的生物参考区间，必要时考虑重建生物参考区间。

1.1.6 检测系统/方法准备 参考区间验证试验前需掌握检测系统的性能和使用的检测方法，对检测系统/方法分析性能进行有效验证、评价，确定实验室检测系统性能关键指标不精密度和不准确度的评价方法和可接受标准，保证检测系统/方法的准确、稳定。检测系统用配套的质控品每天做质控，按仪器说明定期校准，在检测系统在控状态下检测实验标本，记录实验数据，保证验证项目结果的可靠。

2 结果

本文检测的5个检测项目的验证结果见表1。

在健康参考个体组AST项目40名结果分布范围10～44U/L。参考区间上线超出了现用的参考区间0～40U/L，查阅原始结果为 39 名结果在 0～40U/L，超出范围的1名检测结果是：44U/L。在健康参考个体组LDH项目40名结果分布范围153～281U/L。参考区间在现用的参考区间150～300U/L之内。在健康参考个体组α-HBDH项目40名结果分布范围65～202U/L。参考区间上线超出了现用的参考区间0～182U/L，查阅原始结果为38名结果在0～182U/L，超出范围的2名检测结果是：191U/L、202 U/L。在健康参考个体组CK项目40名结果分布范围37～241U/L。参考区间上线超出了现用的参考区间24～229U/L，查阅原始结果为39名结果在24～229U/L，超出范围的1名检测结果是：241U/L。在健康参考个体组CK-MB项目40名结果分布范围0～24U/L。参考区间在现用的参考区间0～24U/L之内。

表1 儿童心肌酶项目现用参考区间验证结果

3 讨论

病毒性心肌炎已成为儿童临床上的常见病，且发病率有上升趋势[2]。目前儿童病毒性心肌炎诊断标准中，心肌酶仍为主要指标。本文LDH、CK-MB两个项目完全适用，虽然AST在检测的40例中有1例超过40U/L(为44U/L)，α-HBDH在检测的40例中有 2 例高于 182U/L(为 191U/L、202 U/L)，CK 在检测的 40例中有 1例高于 229U/L(为 241U/L)，但总体不违反 95%的可信度的要求，说明 AST、α-HBDH、CK这三个项目试剂说明书上的参考区间还是适用的。

众所周知，生物参考区间是判断健康与否的标准，实验室必须保证给临床提供的生物参考区间正确适用，否则会导致误诊误治，所以实验室建立生物参考区间工作意义重大，但由于一般实验室现行条件自行制定生物参考区间存在客观难度，因而对实验室的生物参考区间进行验证是十分必要的，也是可行的。当发现生物参考区间出现偏离，我们应采集大量健康人群的标本进行生物参考区间的建立，以确保生物参考区间的准确性。

本次验证表明心肌酶5项指标AST、LDH、CK、α-HBDH、CK-MB现用的参考区间适用本地儿童。

[1]陈桂山.临床生化检验项目生物参考区间适用性验证探讨[J].中华检验医学杂志,2008,31,170.

[2]吴梓梁.小儿内科学[M].郑州:郑州大学出版社,2003:1793-1795.