中医药治疗溃疡性结肠炎的实验研究

许 欣，于成功

(1.南京中医药大学中西医结合鼓楼临床学院，江苏 南京 210029；2.南京大学医学院附属鼓楼医院 消化科,江苏 南京 210008)

溃疡性结肠炎(UC)，病变主要累及黏膜和黏膜下层，以腹泻、腹痛、黏液脓血便等为主要表现。目前认为UC与免疫功能紊乱、遗传、环境等因素相关。属于祖国医学“泄泻”“痢疾”“肠风”等范畴。中医采用中医药治疗本病具有疗效确切、复发率低、毒副作用小等特点，故应用较多。现就中医药治疗UC作用机制的实验研究进展总结如下。

1 从免疫机制角度治疗UC

1.1 免疫调节 免疫调节功能紊乱可引起UC。田军彪等[1]用芪仙安肠方治疗三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的UC模型大鼠发现，芪仙安肠方给药组补体3、补体4含量明显提高，免疫球蛋白(Ig) A、IgG含量降低，提示作用机制可能与免疫调节有关。

郑学宝等[2]研究黄芩汤对湿热型UC大鼠CD4+细胞及其共刺激分子的影响发现，黄芩汤可下调模型大鼠结肠共刺激分子CD28、OX40的表达，并使效应CD4+细胞活化抑制因子CD152维持在较高水平，从而下调过度激活的效应CD4+细胞。

叉头状/翅膀状螺旋转录因子(forkhead/winged helix transcription factor，Foxp3)是新近发现的转录因子，在调控调节性T细胞(regulatory T cell，Treg)的分化发育和功能上有重要作用。原皓等[3]研究甘草酸二铵(DG)对UC模型大鼠的疗效及对大鼠外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA表达的影响时发现，DG能显著改善UC症状，通过上调Foxp3 mRNA的表达抑制自身反应性T淋巴细胞的增殖可能是缓解病情的机制之一。

Toll样受体(Toll-like receptors，TLRs)是定位于细胞表面的跨膜蛋白，目前已知哺乳动物存在11种TLR。其中TLR-4识别脂多糖，向胞内传递活化信号激活核因子(NF)-κB，从而促进多种炎性细胞因子的转录。顾培青等[4]发现清肠化湿方可抑制UC模型大鼠结肠黏膜TLR-4、NF-κBp65蛋白的表达发挥治疗作用。梁丽等[5]用TNBS法复制UC大鼠模型,取脾脏和结肠组织检测β2肾上腺素受体(β2AR)、β-arrestin2、NF-κB p65的表达，结果发现中药乌梅丸可升高大鼠淋巴细胞β2AR、β-arrestin2的表达水平，降低大鼠结肠黏膜中NF-κB p65的水平，发挥对免疫功能的调节作用。

施斌等[6]检测UC大鼠结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡及固有层淋巴细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达，结果发现:模型组结肠黏膜固有层淋巴细胞凋亡减慢，Bcl-2表达率增加，Bax表达率下降。中药清肠栓可能通过调节Bcl-2及Bax之间的比例变化，诱导淋巴细胞凋亡，发挥对UC的治疗作用。

1.2 对细胞因子的影响 细胞因子在调节肠道免疫中发挥着重要作用，UC患者存在促炎细胞因子与抗炎细胞因子的平衡失调。陈江等[7]用TNBS建立大鼠UC模型,予中药清肠栓治疗。发现清肠栓各剂量组可溶性白细胞介素受体(sIL-R)2、6的水平降低，大、中剂量组IL-2R、IL-6R mRNA表达降低，从而推测清肠栓治疗UC机制与降低sIL-2R、sIL-6R水平，下调IL-2R、IL-6R mRNA表达，抑制T淋巴细胞活化增殖，减少炎症递质产生有关。刘杰民等[8]用健脾益肠散合固本保元腹袋治疗UC患者,经治疗后，临床症状有效缓解，且患者血清中IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平下降。

2 抗炎作用

何爱明等[9]用TNBS灌肠建立大鼠UC模型,发现模型组大鼠中性粒细胞趋化因子-1(CINC-1)及其受体CXC趋化因子受体2(CXCR2) mRNA和蛋白表达呈明显上升趋势，经溃结灵干预后，CINC-1、CXCR2 mRNA及其蛋白表达呈下降趋势,提示溃结灵通过干预上述指标的表达抑制中性粒细胞趋化，发挥治疗效应。施斌等[10]观察清肠栓对UC模型大鼠结肠黏膜粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的影响,发现清肠栓组GM-CSF和G-CSF mRNA及蛋白表达较模型组降低，从而推测清肠栓治疗UC的机制是调控GM-CSF、G-CSF的表达,抑制中性粒细胞浸润。孙政等[11]分别采用白头翁汤、柳氮磺胺吡啶片治疗UC患者，治疗后发现2组患者外周血中性粒细胞(PMN)凋亡率明显升高,且以白头翁组改变更显著，说明中药白头翁汤疗效确切，可能机制与调节患者PMN凋亡相关。

3 影响血液流变学

胡连海等[12]观察灌肠方对UC患者的临床疗效及对血清D-二聚体(D-D)、血小板计数(PLT)、血小板平均体积(MPV)的影响发现，治疗组临床症状改善优于对照组，且治疗组患者血清D-D和PLT水平降低、MPV水平升高较对照组显著，提示灌肠方治疗UC的作用机制可能与降低血清D-D和PLT水平以及升高MPV，改善患者血液高凝状态相关。安贺军等[13]发现以益气活血解毒立法的中药溃结复发方,可有效降低UC结肠组织P-选择素水平，从而阻抑血小板活化，抗UC复发。

4 修复肠黏膜

李燕舞等[14]采用TNBS法复制UC大鼠模型，以大鼠结肠黏膜肠三叶因子(ITF) mRNA、糖黏蛋白(MUC2)、转化生长因子(TGF)-α为检测指标，结果提示:与模型组相比，中药溃结灵组3、7、14 d ITF mRNA、MUC2蛋白表达均明显增高，TGF-α表达呈现逐步增高过程。溃结灵治疗UC机制可能与上调ITF基因、MUC2蛋白及TGF-α相关。潘锋等[15]发现马齿苋多糖可缓解UC，效应机制可能为下调半胱氨酸天冬氨酸酶-3(Caspase-3)、Caspase-8的表达，延缓肠上皮细胞凋亡。卢璐等[16]观察到中药清肠栓能有效抑制UC大鼠结肠通透性的升高，改善肠黏膜屏障功能，促进溃疡愈合。

5 其他

李海龙等[17]采用异种异体结肠黏膜组织致敏法和乙酸局部灌肠相结合的方法制造UC大鼠模型，实验发现久泻灵冲剂可明显降低结肠组织中MDA，提高GSH-Px、SOD的活性，提示作用机制可能与抗氧自由基损伤、增强抗氧化酶活性有关。秦建梅等[18]发现半夏泻心汤合四神丸加减方可降低UC大鼠结肠组织中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)水平,对模型大鼠有显著的干预作用。李丽秋等[19]发现复方树舌中药可作为益生元调节肠道菌群失调及黏膜的修复，对UC疗效显著。朱凌宇等[20]发现三七提取物可上调血管内皮生长因子、含有激酶插入区域的受体、fms样酪氨酸激酶受体和低氧诱导因子-1表达促进血管生成，从而治疗UC。秦震声等[21]采用TNBS/乙醇溶液灌肠加束缚法制作UC肝郁脾虚大鼠模型，发现舒肝健脾颗粒可调节模型大鼠结肠组织中血管活性肠肽(VIP)的浓度发挥治疗作用。

综上，中医药治疗UC具有多靶点作用的特点，但也应该看到中医药治疗UC作用机制的实验研究尚存在不足之处。比如中医选方用药的特色是辨证论治，而UC动物模型的制作与中医的“证”并不一定吻合；目前多从整个方剂角度研究中药的作用机制，对中药单体的研究较少，且究竟是中药的何种成分对何靶点发挥作用尚不十分明确；另外，科研设计尚欠严谨，实验研究亦较少运用基因工程、分子生物学等技术，故作用机制的研究尚不深入，部分实验结果缺乏可信度。以上不足一定程度上影响到中药的临床推广以及向更广阔的平台发展。因此应尽量制作符合中医证候的动物模型，尽可能明确中药具体的作用成分与靶点，依据UC的发病机制进行科学的实验设计，运用新的实验技术，期待通过以上努力中医药实验研究能有新的突破，中医药事业得到深远的发展。

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