莲芝消炎胶囊中脱水穿心莲内酯质控标准的研究

王奇志，黄辉球，黄志刚，梁旭霞，冯 煦*

1江苏省中国科学院植物研究所(南京中山植物园)江苏省药用植物研究开发中心，南京 210014;2广东惠州九惠药业有限公司，南岸路199号，惠州 516007

莲芝消炎胶囊系穿心莲醇浸膏与山芝麻浸膏组成的复方制剂，具有清热、解毒、消炎功效。用于肠胃炎、支气管炎、扁桃体炎、咽喉炎、肺炎等疾患。为目前畅销的一种非处方药。有关其质量标准中含量测定采用加碱水解酸回滴定，以每1 mL氢氧化钠滴定液(0.1 moL/L)，相当于 35.05 mg的穿心莲内酯(C20H30O5)计算，应为标准量的 90.0% ～110.0%［1］，由于加入指示剂的色泽标准存在人为因素，难以掌握，重现性差，且测定对象仅为总内酯。无脱水穿心莲内酯含量的标示，与药典要求以脱水穿心莲内酯含量评价穿心莲制剂质量不一致。虽然有关穿心莲胶囊中脱水穿心莲内酯已有报道［2，3］，但对莲芝胶囊的相关研究则很少。为此，我们从原料质量、总内酯、提取工艺、测定方法和有效成分质控诸多方面对该产品进行了系统研究，本文报道莲芝消炎胶囊中脱水穿心莲内酯质控的探讨。

1 仪器、药品和试剂

1.1 仪器

高效液相色谱仪LC-10ATVP配SPD-10AVP检测器;UV2100紫外扫描仪;色谱柱YMP pack ODS-A A303 S-5 μm，250 ×4.6 mm。

1.2 试剂

纯净水、甲醇(色谱纯)、乙醇(分析纯)。

1.3 样品

莲芝消炎胶囊浸膏，莲芝消炎胶囊产品、山芝麻浸膏(广惠州九惠制药有限公司提供)、脱水穿心莲内酯、穿心莲内酯(中国药品生物制品检定所，供含量测定用）。

2 色谱条件

流动相为甲醇:水(6∶4)，体积流量1 mL/min，灵敏度0.005 AuFS，检测波长254 nm，柱温30℃。

图3结果表示在保留时间t=14～17 min间，山芝麻浸膏此处无出峰信号，测定脱水穿心莲内酯时不存在干扰。

3 溶液的配制

3.1 标准溶液的配制

为适应制剂中可能存在所含脱水穿心莲内酯不同质量浓度的要求，本实验制备了高、中、低三种不同浓度的标准液。高浓度取5.26 mg，中浓度3.96 mg，低浓度取2.69 mg分别置于25 mL量瓶中，加甲醇溶解并定容，三个质量浓度分别为:0.2104 mg/mL、0.1584 mg/mL 和 0.1076 mg/mL。

3.2 标准曲线的制备

取上述配制的标准液用量分别为2，6，10，14，18(μL)，在相同条件下测得面积积分值。结果脱水穿心莲内酯量在0.2～4 μg间呈线性关系，回归方程y和r值分别为:

3.3 精密度的测定

精密吸取相同体积的标准液20 μL，进样6次，分别测得面积积分值见表1，RSD%值表明精密度良好。

表1 两次精密度测定结果Table 1 Two results of precision

3.4 回收率的测定

表2 加样回收率试验Table 2 Adding recovery test(n=12)

3.5 日内稳定性和日间稳定性的考察

3.5.1 日内稳定性

取批号051003样品的配制液(配制见后)定时进样10 μL，测定内含脱水穿心莲内酯峰面积见表2。

3.5.2 日间稳定性

取批号050901样品的配制液，进样10 μL，隔日一次，共三次，测得脱水穿心莲内酯峰面积见表3，其日内和日间的RSD分别为0.99%和0.56%，说明胶囊中脱水穿心莲内酯日内和日间稳定性良好。

表3 样品稳定性的测定Table 3 Determination of the stability of the sample

4 莲芝消炎胶囊中脱水穿心莲内酯的含量测定

4.1 样品液制备

根据正交试验优选莲芝消炎胶囊穿心莲浸膏的制备工艺得出的结果，穿心莲中穿心莲内酯类成分以稀醇的溶出率为最高，考虑到HPLC常用甲醇为流动相，所以本试验用甲醇为提取溶剂，并结合超声处理可在短时间内达到提取完全的效果，因此本法为精密称取样品0.1 g，置25 mL量瓶中加甲醇20 mL，摇匀，放置30 min后经超声20 min，再室温放置30 min，加甲醇定容，用0.22 μ 膜滤过，取续滤液5 mL置于10 mL量瓶中，加甲醇定容备用。此液进样20 μL 或 10 μL。

4.2 样品液中脱水穿心莲内酯的含量测定

本测定采用外标法，色谱条件同前，在样品液测试的同时进行了标准品质量与峰面积的分析，求得质量与峰面积的比值，分别为2.104 μg/7644279.7;1.055 μg/3045742.5(n=3，RSD ＜1%)。从 2004-2006三年间任选多批次，抽样分析结果见表4，除一批次(20051003)每0.5 g莲芝胶囊中脱水穿心莲内酯＜10 mg外大部分都高于10 mg，因此建议莲芝消炎胶囊中脱水穿心莲内酯的质量标准拟控制在每0.5 g的胶囊中含脱水穿心莲内酯≥10 mg，可保证莲芝消炎胶囊的良好疗效。

表4 莲芝消炎胶囊中脱水穿心莲内酯的含量Table 4 dehydroandrographolide content of Lian Zhi Xiao Yan Capsule

5 讨论

本实验建立的RP-HPLC法简便、快捷、正确，完全适用于复方制剂莲芝消炎胶囊中脱水穿心莲内酯的含量测定。

实验结果表明莲芝消炎胶囊中脱水穿心莲内酯的质量标准是每粒莲芝消炎胶囊(0.5 g)中脱水穿心莲内酯的含量控制在≥10 mg为宜。

1 Guangdong Institute for Drug Control.Lian Zhi Xiao Yan Capsule.WS3-B-2403-97

2 Yu XT(俞小陶)，Xu H(许红).Determination of dehydroandrographolide content in andrographolide capsules by RP-HPLC.Acad J of Guangdong Coll of Pharm(广东药学院学报)，2003，19:17-19.

3 Chen BL.Determination of dehydroandrographolide content in andrographolide capsules by HPLC.Anhui Med and Pharm J(安徽医药)2005，9:591-592.