冷冻胚胎移植失败高危因素的logistic回归分析

李 娜，苗聪秀，关素萍，毕慧玲，韩丽娟，刘锦宏

长治医学院附属和平医院生殖中心 长治 046000

自1983年首例人类冷冻胚胎移植临床妊娠成功以来，胚胎移植技术迅速发展并广泛应用，冷冻胚胎在提高累积妊娠率、预防卵巢过度刺激征、降低多胎率等方面发挥着积极的作用[1]。如何提高冷冻胚胎移植成功率是生殖领域研究热点之一。该研究对2009年5月至2012年5月在长治医学院附属和平医院生殖中心接受冷冻胚胎移植的328例患者的相关资料进行回顾性分析，以探讨影响冷冻胚胎移植结局的高危因素。

1 资料与方法

1.1一般资料选择2009年5月至2012年5月在长治医学院附属和平医院生殖中心接受冷冻胚胎移植的328例患者，年龄27～46(35.2±4.9)岁；不孕时间2～9(4.5±2.0) a。

1.2妊娠判断方法胚胎移植后14～15 d进行尿HCG定性检测，阳性者初步诊断为生化妊娠；移植后4～5周进行阴道B超检查，子宫内可见妊娠囊及原始心管搏动者诊断为临床妊娠。根据胚胎移植后是否临床妊娠分为妊娠组(107例)和未妊娠组(221例)。

1.3统计学处理采用SPSS 13.0进行分析，2组年龄、不孕时间比较采用t检验，不孕原因、冻融方法、胚胎发育时间、胚胎等级[2]、子宫内膜准备方法、子宫内膜厚度、激素水平(雌激素/孕激素，E2/P)、受精方式、移植位置(移植胚胎到宫底的距离/宫颈内口到宫底的距离，DA/DB)比较采用χ2检验，筛选出具有统计学意义的变量，再进行logistic回归分析，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1妊娠结局影响因素的单因素分析结果妊娠组与未妊娠组的年龄、冻融方法、胚胎等级、子宫内膜厚度、激素水平、移植位置比较，差异有统计学意义，见表1。

表1 妊娠组与未妊娠组各因素的单因素分析结果

2.2妊娠结局影响因素的logistic回归分析结果在回归模型中变量的赋值如下：①年龄<35岁为0，≥35岁为1。②玻璃化冷冻为0，程序化冷冻为1。③Ⅰ、Ⅱ级胚胎为0，Ⅲ、Ⅳ级胚胎为1。④子宫内膜厚度<8.0 mm为0，8.0～ mm为1，11.0～13.0 mm为2。⑤激素水平(E2/P)<10为0，10～30为1，>30为2。⑥移植位置(DA/DB)<1/3为0，1/3～1/2为1，>1/2为2。⑦未妊娠为0，妊娠为1。年龄、冻融方法、胚胎等级、子宫内膜厚度是妊娠结局的影响因素，见表2。

表2 妊娠结局影响因素的logistic回归分析结果

3 讨论

在该研究中，logistic回归分析结果显示导致冷冻胚胎移植失败的高危因素包括高龄、程序化冷冻、胚胎质量不佳、子宫内膜厚度过厚或过薄。激素水平和移植位置不合适虽然不是冷冻胚胎移植失败的独立危险因素，但在单因素分析中具有统计学意义。

随着年龄的增长，女性卵巢功能减退，卵子质量和子宫内膜容受性降低，生育能力逐渐下降，胚胎存活率和完整胚胎存活率也逐渐降低[3]。杨雪等[4]的研究显示，年龄≤35岁组妊娠率为33.9%，而年龄>35岁组妊娠率只有13.0%。在该研究中，未妊娠组平均年龄为(36.0±5.0)岁，显著高于妊娠组的(33.7±4.3)岁。程序化冷冻和玻璃化冷冻是现在临床最为常用的2种胚胎冰冻方法。程序化冷冻消耗时间长，损耗液氮多，需要昂贵的程序化冷冻仪，一旦冷冻仪在运行中出现故障，将会给胚胎带来无法挽回的损伤[5]。而玻璃化冷冻法无需昂贵的冷冻仪，液氮消耗量少，省时省力，还可避免冷冻过程中冰晶对胚胎的损伤，在保存胚胎方面更具优势[6]。娄华等[7]对324个玻璃化冷冻人卵裂期胚胎复苏周期和146个程序化冷冻胚胎复苏周期进行比较发现，玻璃化冷冻胚胎较程序化冷冻胚胎有更高的复苏胚胎完整率及临床妊娠率，可在临床上安全应用。邓爱民等[8]根据胚胎质量评分将胚胎分为2组，胚胎不少于6个卵裂球细胞且胚胎碎片<20%为优质胚胎，其他胚胎为非优质胚胎，结果显示优质胚胎组的临床妊娠率明显高于非优质胚胎组，分别为37.8%和20.7%。另有研究[9]发现完全存活的发育正常的冷冻胚胎有43.3%的临床妊娠率，而部分卵裂球存活和卵裂球全部存活但胚胎发育缓慢的冷冻胚胎均无法获得理想的临床妊娠率。因此，冷冻前胚胎的质量及复苏后胚胎卵裂球的存活状况是影响冷冻胚胎移植妊娠结局的关键因素。胚胎质量越佳，耐受冷冻损伤的能力越强，完整率越高，故而胚胎发育潜能越强。在该研究中，妊娠组的优质胚胎比例明显高于未妊娠组。子宫内膜容受性与冷冻胚胎移植结局密切相关。正常子宫内膜仅在一个极短的时间内才允许胚胎着床，而子宫内膜受卵巢性激素调控，其厚度呈周期性变化[10]。该研究结果表明，子宫内膜厚度为8.0～ mm时妊娠率较高，与赵庆红等[11]的报道相一致。

总之，采用最佳冻融方法、提高胚胎质量、改善子宫内膜容受性以及尽早接受胚胎移植有利于提高冷冻胚胎移植成功率。

[1] 孙燕萍,牛向丽,陈自洪,等.玻璃化与程序化两种不同胚胎冻融方法的临床应用效果比较[J].中国计划生育和妇产科,2011,3(1):22

[2] Tomas C,Orava M,Tuomivaara L, et al. Low pregnancy rate is achieved in patients treated with intracytoplasmic sperm injection due to previous low or failed fertilization in in-vitro fertilization [J].Hum Reprod, 1998, 13(1):65

[3] 李秋华,全松,陈雷宁,等.160例重复体外受精-胚胎移植周期临床结局分析[J].南方医科大学学报,2010,30(2):236

[4] 杨雪,黄绘,刘敏利,等.比较自然周期法与激素替代法对解冻胚胎移植结局的影响[J].中国妇幼保健,2011,26(28):4394

[5] 幸贵邦,丘彦,孟江萍.不同胚胎冷冻方法对冻融胚胎移植患者临床结局的影响[J].中国妇幼保健,2011,26(15):2301

[6] Balaban B, Urman B, Ata B, et al. A randomized controlled study of human Day 3 embryo cryopreservation by slow freezing or vitrification: vitrification is associated with higher survival, metabolism and blastocyst formation [J]. Hum Reprod, 2008, 23(9):1976

[7] 娄华,孙丽君,王兴玲,等.玻璃化冷冻法对冻融胚胎移植周期结局的影响[J].郑州大学学报:医学版,2011,46(6):891

[8] 邓爱民,郭江华,陈曦希.胚胎因素对冻融胚胎移植结局影响[J].中国热带医学,2009,9(4):644

[9] 王利红,钟景琦,石磊,等.冻融胚胎移植卵裂球数目及胚胎存活状态与临床妊娠的关系[J].山东医药,2011,51(38):72

[10]熊露,李豫峰,章汉旺,等.冻融胚胎移植周期子宫内膜形态及厚度变化与妊娠的关系[J].中国妇幼保健,2011,26(25):3931

[11]赵庆红,杨菁,尹太郎,等.玻璃化冻融胚胎移植结局的相关影响因素[J].中国组织工程研究与临床康复,2010,14(18):3293