HPLC法测定盐酸伊伐布雷定胶囊的含量

吕义强，王侠，张朋言，王长江

（青岛国风药业股份有限公司，山东青岛266000）

HPLC法测定盐酸伊伐布雷定胶囊的含量

吕义强，王侠，张朋言，王长江

（青岛国风药业股份有限公司，山东青岛266000）

目的建立高效液相色谱法测定盐酸伊伐布雷定胶囊含量的方法。方法采用Ultimate XB－C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5μm），流动相为0.05 mol·L－1磷酸二氢钾溶液（用氢氧化钠试液调节pH值为6.8）－乙腈（70∶30），检测波长为285 nm，流速为1.0 mL·min－1。结果伊伐布雷定在0.06～0.12 mg·mL－1的浓度范围内具有良好的线性关系（r＝0.999 8），平均回收率为99.3%，RSD为1.3%（n＝9）。结论本法简便、快速、准确，可用于盐酸伊伐布雷定胶囊的质量控制。

高效液相色谱法；盐酸伊伐布雷定胶囊；含量测定

伊伐布雷定是一种特异性的If离子通道阻断剂，通过选择性干预If通道来控制起搏功能，能够减慢心率［1］。目前常用的β受体阻滞剂虽然亦能减慢心率，但常伴有使心肌收缩力减弱的副作用.而伊伐布雷定则没有这种副作用［2］。伊伐布雷定口服给药后，能迅速和较彻底地吸收，在禁食条件下，1 h后能达到血药峰浓度［3］。并且在冠心病患者人群中具有很好的临床耐受性［4］。本文建立了RPHPLC法测定盐酸伊伐布雷定胶囊含量的方法，准确、可靠、简便、快速，可用于盐酸伊伐布雷定胶囊的质量控制。

1 仪器与试药

Agilent1200系列高效液相色谱仪（G1311A四元泵；G1314B VWD检测器）；电子天平（METTLER，AE240）；乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂为分析纯。盐酸伊伐布雷定胶囊（由青岛国风药业股份有限公司提供，批号：130501、130502、130601），盐酸伊伐布雷定工作对照品（原料精制后标定，批号：130301，含量为99.5%）。

2 方法与结果［5］

2.1 色谱条件 采用Ultimate XB－C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5μm）；以0.05 mol·L－1磷酸二氢钾溶液（用氢氧化钠试液调节pH值为6.8）－乙腈（70∶30）为流动相，检测波长：285 nm，流速为1.0 mL·min－1，进样量10μL。理论板数按伊伐布雷定峰计算不低于3 000。

2.2 溶液的制备 取本品20粒，求出平均装量，将内容物混匀，精密称取适量（约相当于伊伐布雷定10 mg），置100 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取盐酸伊伐布雷定工作对照品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1 mL中约含0.1 mg的溶液，作为对照品溶液。

2.3 系统适用性试验 取“2.2”项下的供试品溶液及对照品溶液，按“2.1”项下的色谱条件进行测定，记录色谱图；伊伐布雷定峰的理论板数为13 065，与相邻杂质峰的分离度大于1.5，图谱见图1。

图1 盐酸伊伐布雷定胶囊含量测定HPLC图谱

2.4 专属性试验 按“2.1”项下的色谱条件，按处方比例称取空白辅料，加流动相溶解，定容，过滤，取续滤液依法测定，图谱见图1，空白辅料对本品的含量测定无干扰。

2.5 线性与范围试验 取盐酸伊伐布雷定工作对照品约53.9 mg（相当于伊伐布雷定50 mg），精密称定，置100 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取3、3.5、4、4.5、5、6 mL，置25 mL量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取10 μL注入液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积A对浓度C进行线性回归，得回归方程为：A＝20 895C＋896，r＝0.999 8，表明伊伐布雷定在浓度0.06～0.12 mg·mL－1范围内具有良好的线性关系。

2.6 精密度试验 称取盐酸伊伐布雷定工作对照品适量，加流动相溶解并稀释制成浓度为0.1 mg·mL－1的溶液，重复进样6次。结果，伊伐布雷定峰面积的RSD为0.26%。

2.7 回收率试验 取盐酸伊伐布雷定工作对照品适量，精密称定，并按处方量加入辅料，置研钵中研细混匀，分别精密称取适量（约相当于含伊伐布雷定16、20、24 mg），各3份，分别置200 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取盐酸伊伐布雷定工作对照品适量，加流动相溶解并稀释制成每1 mL中约含0.1 mg的溶液，作为对照品溶液。取上述两种溶液，按

“2.1”项下的色谱条件，精密量取10μL注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。测得平均回收率99.3%，RSD为1.3%（n＝9）。

2.8 稳定性试验 称取盐酸伊伐布雷定工作对照品适量，加流动相溶解并稀释制成浓度为0.1 mg·mL－1的溶液，分别于0、1、2、4、6、8 h进样，测定。结果，伊伐布雷定峰面积的RSD＝0.7%。

2.9 样品的测定 取“2.2”项下的对照品溶液、供试品溶液，分别精密量取10μL注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量。3批样品的含量测定结果见表1。

表1 盐酸伊伐布雷定胶囊3批样品含量测定结果

3 讨论

取伊伐布雷定对照品溶液，经二极管阵列检测器检测，由光谱指数图可见伊伐布雷定在285 nm波长处有最大吸收，因此选择285 nm作为检测波长。对磷酸二氢钾溶液的浓度及pH值进行了试验，发现当磷酸二氢钾溶液的浓度为0.05 mol·L－1、pH值为6.8时峰形最佳；对两种常用的有机相乙腈和甲醇进行了对比，试验发现，有机相采用乙腈比甲醇能获得更好的峰形，与相邻杂质峰的分离更好；对乙腈与磷酸二氢钾溶液的比例进行了试验，以乙腈－0.05 mol·L－1磷酸二氢钾溶液（30∶70）时最优，保留时间适中，主峰与相邻杂质峰的分离度符合要求。

综上所述，本法的专属性好，精密度、回收率高、操作简便、准确，可用于盐酸伊伐布雷定胶囊的含量测定。

［1］梁可，张浩，曹蕾，等.第一个窦房结If电流选择特异性抑制剂——盐酸伊伐布雷定的研究进展［J］.中国处方药，2007，66（9）：18－19.

［2］伊伐布雷定在中国地区的疗效临床实验即将启动［J］.心血管病防治知识，2007，12：13.

［3］李楠，曾玉杰，心脏起搏电流抑制剂ivabradine的临床应用［J］.临床心血管病杂志，2008，24（12）：957－960.

［4］何跃辉，魏万林，张灵，等.特异性降低心率药物——If抑制剂伊伐布雷定在心血管疾病中的应用研究进展［J］.中国偱证心血管医学杂志，2009，1（5）：308－311.

［5］姚娜，方克忠，刘阿利.HPLC法测定盐酸伊伐布雷定片的含量［J］.齐鲁药事，2012，31（5）：275－276.

Determ ination of Ivabradine Hydrochloride Capsules by HPLC

LV Yi-qiang，WANG Xia，ZHANG Peng-yan，WANG Chang-jiang
（Qingdao Growful Medicine Co.，Ltd.，Qingdao 266000，China）

ObjectiveTo establish an HPLC method for the determination of Ivbradine Hydrochloride Capsules.MethodsUltimate XB－C18column（4.6 mm×150 mm，5μm）was adopted with 0.05 mol·L－1Potassium dihydrogen phosphate solution（adjust pH to 6.8 with sodium hydroxide）－acetonitrile（70∶30）mixture asmobile phase，detected atwavelength of285 nm and flow rate was 1.0 mL·min－1.ResultsThe ivabradine showed a good linear relationship with the range of0.06～0.12mg·mL－1（r＝0.999 8）.The average recovery was99.3%，and the RSD was1.3%（n＝9）.ConclusionThe method was convenient，rapid and accurate.It can be used for the quality control of Ivabradine Hydrochloride capsules.

HPLC；Ivabradine Hydrochloride Capsules；Determination

R927.2

：A

2095－5375（2014）03－0153－002

吕义强，男，研究方向：新药研究，E－mail：qiang－1001＠163.com