白介素6、白介素8与胃癌患者幽门螺杆菌关系研究

王竞，杨春春，李凤春

(河北医科大学第一医院 消化内科，河北 石家庄 050031)



白介素6、白介素8与胃癌患者幽门螺杆菌关系研究

王竞，杨春春，李凤春

(河北医科大学第一医院 消化内科，河北 石家庄 050031)

目的 探讨胃癌患者血清、胃液及组织中IL-6、IL-8水平变化与幽门螺杆菌感染关系。方法 选取河北医科大学第一医院消化科胃炎及胃癌患者264例，根据胃镜组织活检病理确诊的结果分成3组，胃黏膜未见明显病变者为对照组(80例)，胃黏膜癌前病变者为癌前病变组(84例)和胃黏膜癌病者为胃癌组(100例)，再通过12C呼吸实验的检测结果将以上3组分成对应的Hp阳性组及Hp阴性组。采用ELISA法检测患者血清中、胃液中IL-6、IL-8水平，采用双抗体夹心法检测胃黏膜组织中IL-6、IL-8水平，比较各组Hp阳性组患者治疗后Hp根除率。结果 与对照组比较，癌前病变组及胃癌组血清、胃液及粘膜组织IL-6、IL-8较高(P<0.05)，与癌前病变组比较，胃癌组血清、胃液及粘膜组织IL-6、IL-8较高(P<0.05)。与HP阴性组比较，HP阳性组患者血清、胃液及粘膜组织IL-6、IL-8较高(P<0.05)。三联用药抗幽门螺杆菌后，与胃癌组比较，癌前病变组与对照组Hp根除率较高(P<0.05)，对照组与癌前病变组Hp根除率比较差异无统计学意义。结论 胃癌患者血清、胃液和胃黏膜组织中IL-6、IL-8水平升高，Hp阳性患者IL-6、IL-8水平更高；IL-6、IL-8升高可能是胃癌形成的机制，对胃癌的诊断、评估具有重要意义。

胃癌；IL-6；IL-8；癌前病变；幽门螺杆菌

胃癌发病率占上消化道恶性肿瘤的95%以上，好发于中老男性，5年生存率较低。据调查统计，2000年全球新诊断胃癌有80万例，2/3分布于发展中国家，早期临床表现不典型，以恶心、呕吐或类似于消化性溃疡病的上消化道症状为主，易被忽略[1]。本病与生活饮食习惯、感染幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，Hp)以及既往胃病病史等因素有关，其中Hp感染是引起胃癌的主要病因[2]。研究表明[3]白细胞介素6(IL-6)与白细胞介素8(IL-8)在胃癌形成过程中具有重要的意义，本研究通过分析患者血清、胃液和胃黏膜组织中IL-6、IL-8水平，探讨胃癌患者IL-6、IL-8水平与幽门螺杆菌感染关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2010年1月～2013年12月收入河北医科大学第一医院消化科胃炎及胃癌患者264例，年龄16～60岁，根据胃镜活检组织病理确诊的结果分成3组，胃黏膜未见明显病变者为对照组(80例)；胃黏膜癌前病变者为癌前病变组(84例)和胃黏膜癌病者为胃癌组(100例)，再通过12C呼吸实验的检测结果将以上3组分成对应的Hp阳性对照组(40例)、Hp阳性癌前病变组(42例)、Hp阳性胃癌组(50例)、Hp阴性对照组(40例)、Hp阴性癌前病变组(42例)、Hp阴性胃癌组(50例)。本研究已获得本医院的伦理学相关机构批准授权。

1.2 诊断标准 根据慢性胃炎内镜诊断标准[4]：①皱襞萎缩：主要表现在胃体部，根据萎缩程度可分为三度，皱襞变细为轻度，皱襞消失为重度，介于2者之间为中度；②血管显露：初期可见到黏膜下小血管，重者可见到黏膜下的大血管如树枝状，暗红色；③黏膜粗糙不平：萎缩、增生和肠上皮化生，黏膜常明显粗糙不平或呈结节状或鳞片状凹凸不平。

胃肠道癌前病变和癌的WHO诊断新标准[5]：①早期患者有恶心、呕吐或类似于消化性溃疡病的上消化道症状；②食欲减退、消瘦、乏力、贫血；③胃部疼痛及体质量减轻；④X线钡餐检查有充盈缺损；⑤螺旋CT、MRI等影像学检查能够辅助诊断和临床分期；⑥纤维胃镜病理活检是诊断胃癌的金标准。

1.3 纳入标准 符合原发性胃癌的诊断标准；患者以及家属对本研究具体情况了解知情并自愿参与和签署知情同意书。

1.4 排除标准 ①精神、神志异常不能配合者；②患有严重心、肝、肾、肺、脑疾病者；③ 患有肺癌、肝癌、肾癌、脑癌等其他恶性肿瘤者；④患有艾滋病、梅毒、病毒性肝炎、结核等传染病者；⑤患有再生障碍性贫血、白血病等血液性疾病者；⑥近3个月服用抗幽门螺杆菌及肿瘤治疗患者。

1.5 方法

1.5.1 治疗方法：对患者进行奥美拉唑+阿莫西林+克拉霉素三联抗菌治疗，奥美拉唑肠溶胶囊(成都华神集团股份有限公司制药厂，国药准字H20055788，生产批号：20100927)20 mg，tid po，阿莫西林胶囊(河南凤凰制药股份有限公司，国药准字H41021944，生产批号：20110321)0.5，tid po，克拉霉素分散片(康美药业股份有限公司，国药准字H19990209，生产批号：20100930)0.25 g，tid po。1周为1个疗程，治疗2个疗程，治疗结束后进行12C实验，检测患者幽门螺杆菌情况。

1.5.2 样本采集：样本采集时间点在所有患者未进行任何介入、药物和手术治疗前。

①血液采集：于晨起空腹抽取肘静脉血4 mL，加入含EDTA-K2 抗凝剂的真空管中混匀，并立即将样本置于4 ℃的冰箱中2 h，3000 r/min离心20 min后，分离血清，将血清置于EP管中并放于-80 ℃冰箱中保存待检。

②胃液采集：经患者及家属同意，胃镜活检前，将10 mL注

射器连接到胃液采集管上，通过活检通道抽取胃液5 mL，置于-80 ℃冰箱中保存待检。

③胃黏膜采集：胃液收集后，胃镜检查胃黏膜，发现有活检组织检查的指症后，通过胃镜活检通道利用活检钳切取病变胃黏膜组织，立即甲醛固定后，送病理科检查。

1.5.3 指标检测方法：①血清及胃液中IL-6 、IL-8检测方法：将血清及胃液从冰箱取出，解冻后，采用ELISA方法检测标本中IL-6 、IL-8水平。IL-6 、IL-8试剂盒由武汉优尔生科技股份有限公司提供，并且严格按照说明书操作。

②胃黏膜组织中IL-6 、IL-8检测：将胃黏膜组织取出，剪碎，研磨，离心，提取上清液，采用双抗体夹心法检测上清中IL-6、IL-8水平，IL-6 、IL-8试剂盒由武汉优尔生科技股份有限公司提供，并且严格按照说明书操作。

2 结果

2.1 一般资料比较 各组患者年龄、性别比例、既往患胃病史等一般资料比较差异无统计学意义，具有可比性，见表1。

表1 患者一般资料比较Tab.1 Comparison of patients’ baseline

2.2 血清中IL-6、IL-8水平比较 与对照组比较，癌前病变组及胃癌组血清IL-6、IL-8较高(P<0.05)，与癌前病变组比较，胃癌组血清IL-6、IL-8较高(P<0.05)。与Hp阴性组比较，Hp阳性组患者血清IL-6、IL-8较高(P<0.05)，见表2。

表2 血清中IL-6 、IL-8水平比较情况Tab.

*P<0.05，与对照组比较，compared with control group；△P<0.05，与癌前病变组比较，compared with precancerous lesion group；#P<0.05，与Hp阳性组比较，compared with Hp positive group

2.3 胃液中IL-6 、IL-8水平比较 与对照组比较，癌前病变组及胃癌组胃液IL-6 、IL-8较高(P<0.05)，与癌前病变组比较，胃癌组胃液IL-6、IL-8较高(P<0.05)。与Hp阴性组比较，Hp阳性组患者胃液IL-6 、IL-8较高(P<0.05)，见表3。

表3 胃液中IL-6 、IL-8水平比较情况Tab.

*P<0.05，与对照组比较，compared with control group；△P<0.05，与癌前病变组比较，compared with precancerous lesion group；#P<0.05，与HP阳性组比较，compared with Hp positive group

2.4 胃黏膜组织中IL-6、IL-8水平比较 与对照组比较，癌前病变组及胃癌组胃黏膜组织IL-6、IL-8较高(P<0.05)，与癌前病变组比较，胃癌组胃黏膜组织IL-6 、IL-8较高(P<0.05)。与Hp阴性组比较，Hp阳性组患者胃黏膜组织IL-6、IL-8较高(P<0.05)，见表4。

表4 胃黏膜组织中IL-6 、IL-8水平比较情况Tab.

*P<0.05，与对照组比较，compared with control group；△P<0.05，与癌前病变组比较，compared with precancerous lesion group；#P<0.05，与HP阳性组比较，compared with Hp positive group

2.5 治疗后幽门螺杆菌清除率比较 三联用药抗幽门螺杆菌后，对照组与癌前病变组Hp根除率比较差异无统计学意义(χ2=0.17，P>0.05)；与胃癌组比较，对照组Hp根除率较高(χ2=9.49，P<0.05)，与胃癌组比较，癌前病变组Hp根除率较高，见表5。

表5 患者用药后Hp清除率比较Tab.5 Comparison of clearance rate of Hp

3 讨论

胃癌是消化道常见的恶性肿瘤之一，在各类癌症病死率中排列第2位，仅次于肺癌。早期胃癌临床症状不明显，没有明确早期诊断和筛查方法成为胃癌死亡率居高不下的主要原因[6]。目前一些肿瘤标志物为胃癌的诊断和筛查提供了一些依据，但是这些肿瘤标志物敏感性不高，特异性较差，对于胃癌的早期诊断率降低，因此寻找一种敏感性高、特异性好的生化指标是提高胃癌早期诊断率的目前临床亟需解决的问题[6-7]。目前已知幽门螺杆菌(Hp)感染与胃癌的发生有着明确的关系，Hp能够通过多种途径引起胃上皮细胞增生，进而发展为胃癌[8]。

本研究结果显示，Hp阳性组中：胃癌患者血清、胃液及组织中IL-6、IL-8水平均明显高于对照组和胃癌前病变组(P<0.05)；胃癌前病变组患者血清、胃液及组织中IL-6、IL-8水平均明显高于对照组(P<0.05)；Hp阳性胃癌患者血清、胃液及组织中IL-6、IL-8水平均明显高于Hp阴性同等级别病变患者(P<0.05)，提示IL-6和IL-8与Hp 2者互为协同作用，共同参与胃癌的发生、发展。肿瘤细胞分泌IL-6、IL-8，随着体液循环进入血液，导致血清中IL-6、IL-8增高，机体对胃癌防御性炎性反应，导致IL-6、IL-8水平升高，Hp感染联合患者血清中IL-6、IL-8水平能够为胃癌早期诊断提供重要依据[8]。

白细胞介素6(IL-6)是一种具有多生物学功能的蛋白质，主要来源于单核巨噬细胞的分泌，但是T、B淋巴细胞、血管内皮细胞和成纤维细胞等也有分泌，另外在一些肿瘤细胞中也会分泌[3]。IL-6能够直接控制肿瘤细胞的复制、增殖和转移，并能通过机体免疫应答抑制肿瘤细胞的凋亡，促进细胞生长，调节内环境，促进新生血管的形成，加强肿瘤的生长，IL-6能够与多种靶细胞结合，调控肿瘤的生长、病理进程和病情程度[9]。白细胞介素8(IL-8)是一种细胞趋化因子，能够趋化肿瘤细胞，参与金属蛋白酶的表达，促进血管内皮因子的分泌，加速肿瘤新生血管的生成，促使肿瘤的增殖、生长和转移，在胃癌的发生、发展、浸润和转移过程中起着重要的生物学作用[10-11]。

胃癌细胞分泌产生的IL-6、IL-8直接进入胃液中，胃液IL-6、IL-8水平变化可以反映胃的病变程度和性质，能有效的辨别正常和病变胃黏膜。Hp长时间刺激胃黏膜上皮细胞，引起胃黏膜上皮炎性改变，进而恶性增殖，癌变，最终形成胃癌，并且与IL-6和IL-8相互协同作用，共同参与胃癌的发生、发展、浸润和转移[12]。Hp阳性患者治疗后，对照组Hp根除率明显高于癌前病变组和胃癌组；癌前病变组Hp根除率明显高于胃癌组，说明不同程度的胃黏膜病变能够影响Hp的根除，可能与恶性细胞分泌高水平的IL-6和IL-8有关，具体影响机制尚需进一步研究。

综上所述，IL-6和IL-8参与胃癌的发生、发展和转移，Hp感染联合患者血清、胃液和胃黏膜组织中IL-6和IL-8的水平变化为胃癌的诊断、预后评估和指导临床用药提供可能，对临床具有重要指导意义。

[1] Japanese Gastric Cancer Association.Japanese gastric cancer treatment guidelines 2010 (ver.3)[J].Gastric cancer,2011,14(2):113-123.

[2] 谢国强，邵耀明，马坚，等.幽门螺杆菌感染致萎缩性胃炎患者胃黏膜组织的病理机制及血清学诊断指标临床意义[J].中华医院感染学杂志，2012，22(9):1783-1785.

[3] 吴骏，徐斌，蒋敬庭.胃癌患者血清白细胞介素 6，肿瘤坏死因子α 的测定及其临床意义[J].中国癌症杂志，2012，21(9)：681-683.

[4] 李鹏，张澍田.慢性胃炎的内镜诊断标准及评价[J].临床消化病杂志，2006，18(3)：136-138.

[5] 朱雄增.胃肠道癌前病变和癌的WHO诊断新标准[J].中华病理学杂志，2003，32(2)：168-169.

[6] 周平红，陈巍峰，何梦江.早期胃癌的规范化内镜诊断及治疗[J].中国实用外科杂志，2014，34(7)：604-607.

[7] 王婕敏，林三仁.胃癌研究及诊治新进展[J].胃肠病学和肝病学杂志，2012，21(1)：3-5.

[8] 张健，魏威，应荣超，等.幽门螺杆菌感染对胃癌患者血清，胃液及组织 IL-6，IL-8 水平影响的临床研究[J].中华医院感染学杂志，2015，7: 1459-1461.

[9] Lacroix M,Buatois V,Johnson Z,et al.50:Novel insights into IL-6 biology revealed by selective targeting of TRANS-signaling[J].Cytokine,2014,70(1):40.

[10] 苗雪，官杰.IL-8 的研究进展[J].齐齐哈尔医学院学报，2012，32(22)：3693-3695.

[11] 赵志威，姜涛，张哲男，等.IL-1，IL-6，IL-8 与胃癌的关系[J].现代生物医学进展，2015，15(8)：1589-1591，1420.

[12] McSharry C,Morrison M,Short G,et al.Monocyte inflammatory responsiveness and potential therapeutic target for pigeon fancier’s hypersensitivity pneumonitis (HP)[J].Eur Respir J,2012,40(Suppl 56):2391.

(编校：王俨俨)

Study on relationship between IL-6, IL-8 andHelicobacterpyloriin patients with gastric cancer

WANG Jing, YANG Chun-chun, LI Feng-chun

(Department of Gastroenterology, The First Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050031, China)

ObjectiveTo investigate relationship between IL-6, IL-8 andHelicobacterpyloriin patients with gastric cancer.Methods264 cases patients with gastric cancer and gastritis were selected, and divided into control group, precancerous lesion group and gastric cancer group according to the tissue biopsy, then each group were divided into positive group and negative group according to12C test. IL-6 and IL-8 in serum and gastric juice were detected by ELISA, while in gastric mucosa by double antibody sandwich method.ResultsCompared with control group, IL-6 and IL-8 in serum, gastric juiceand gastric mucosa were higher(P<0.05). Compared with precancerous lesion group, IL-6 and IL-8 in serum, gastric juice and gastric mucosa were higher(P<0.05).Compared with Hp negative group, IL-6 and IL-8 in serum, gastric juice and gastric mucosa were higher(P<0.05). Compared with gastric cancer group, Hp eradication rate of precancerous lesion group and control group was higher, respectively(P<0.05).ConclusionIL-6 and IL-8 in gastric cancer patients’ serum, gastric juice and gastric mucosa increased, which is higher in Hp positive group. The levels of IL-6, IL-8 maybe the key mechanism of the formation of gastric cancer, which has important sense of assessment and diagnosis of gastric cancer.

gastric cancer; IL-6; IL-8; precancerous lesion;Helicobacterpylori

河北省2014年度医学科学研究重点课题计划(ZL20140135)

王竞，女，本科，主治医师，研究方向：消化道肿瘤，E-mail：wangjingyidayi@163.com。

R735.2

A

1005-1678(2015)05-0143-04