人工感染猫芮氏等孢球虫卵囊排出规律的观察

张祖航, 侯照峰,臧传佼,朱水明,陶建平

（扬州大学兽医学院 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州225009）

·简报·

人工感染猫芮氏等孢球虫卵囊排出规律的观察

张祖航, 侯照峰,臧传佼,朱水明,陶建平

（扬州大学兽医学院 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心，扬州225009）

芮氏等孢球虫是引起猫球虫病的常见病原之一，可引起猫腹泻、呕吐、吸收障碍、体重减轻、免疫力低下等症状。鉴于目前对猫芮氏等孢球虫卵囊排出规律不甚了解，造成预防治疗效果不佳，本试验通过猫口服感染芮氏等孢球虫卵囊试验，监测了芮氏等孢球虫的排卵囊规律。结果显示，接种后d7在幼猫粪便中检出芮氏等孢球虫卵囊，d10猫粪便中卵囊数量达到一个小高峰，随后有所下降，d13排卵囊达到最高峰，随后卵囊排出数逐渐下降，d19粪检卵囊呈阴性，直至d23粪检卵囊仍然呈阴性。

猫；芮氏等孢球虫；人工感染；卵囊；排出规律

猫球虫病是由等孢属球虫（Isospora）寄生于猫小肠和大肠黏膜上皮细胞内引起的一种原虫病，多发于幼龄猫。寄生于猫的等孢属球虫有多种，其中以猫等孢球虫（I.felis）和芮氏等孢球虫（I.rivolta）较为常见[1]。芮氏等孢球虫专性寄生于猫的小肠和大肠，可引起猫腹泻、呕吐、吸收障碍、体重减轻等症状，甚至死亡[2,3]。目前国内外对于犬等孢球虫（I.canis）和猪等孢球虫（I.suis）卵囊的排出规律研究的较为详细，但对于芮氏等孢球虫的卵囊排出规律研究较少。为此，本试验用芮氏等孢球虫卵囊人工感染幼猫，观察感染球虫后幼猫出现的临床症状及球虫卵囊的排出规律，为猫球虫病的防治奠定基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物同窝家猫2只，1月龄，体重0.5 kg左右，来自泰州姜堰一农户。猫健康状况良好，试验前连续7 d用饱和盐水漂浮法检查粪便，未发现球虫卵囊和其他寄生虫感染。

1.2 球虫卵囊与感染剂量芮氏等孢球虫卵囊由扬州大学兽医学院动物寄生虫教研室分离、鉴定与保存。取4℃保存的芮氏等孢球虫孢子化卵囊液，用自来水洗去重铬酸钾，麦克马斯特氏法（McMaster’s method）计数[4]、定量后，每只幼猫经口感染卵囊800个。2只猫分笼饲养。

1.3 临床症状观察与卵囊采集感染后d1起，每天观察幼猫的临床症状，并做好记录。

感染后d4，每天用饱和糖盐水（饱和食盐水与饱和蔗糖溶液比例为1∶1）漂浮法检查粪便。发现卵囊后，每天收集2只猫排出的全部粪便，混合后用麦克马斯特氏法[4]计数每克粪便中卵囊数（oocyst per gram, OPG），直至排卵囊结束。随后，继续每天用饱和糖盐水漂浮法检查粪便，连续4 d未查见卵囊后结束试验。

2 结果与讨论

2.1 临床症状幼猫感染芮氏等孢球虫后d4，2只猫均出现食欲下降、精神沉郁、粪便变稀等症状；感染后d8，猫食欲恢复正常，精神状态良好。排卵囊期间，偶尔会出现稀粪。

2.2 粪便检查用饱和糖盐水漂浮法检查粪便，d7开始有卵囊排出，d19未见卵囊，直至d23均未检查卵囊。镜检球虫卵囊，呈椭圆形或卵圆形，囊壁光滑，无微孔。测20个卵囊，大小为（20.0～27.5）μm×（17.5～22.5）μm，平均（23.25±2.16）μm×（20.38±1.86）μm，形状指数为1.14（图1A）。按常规方法分离卵囊并培养至孢子化，镜检可见孢子化卵囊含有2个孢子囊，每个孢子囊内有4个子孢子和一个孢子囊残余体。孢子囊呈椭圆形，测20个孢子囊，大小为（15.0～17.5）μm×（10.5～12.5）μm，平均（16.75±1.03）μm×（11.13±1.21）μm（图1B）。

图1 芮氏等孢球虫卵囊Fig.1 The oocysts of I.rivolta

2.3 排卵囊规律幼猫感染芮氏等孢球虫后的排卵囊规律见表1和图2。潜隐期为6 d，显露期为12 d。Debey用芮氏等孢球虫卵囊直接感染猫时，排卵囊的潜隐期为4～7 d，显露期2周至数周，较本研究结果要长，究其原因，可能是感染虫株或剂量的不同。Harleman等[6]报道猪等孢球虫（I.suis）的潜隐期为5 d，显露期为5～8 d 和11～14 d。刘光辉等[7]报道，感染30个猪等孢球虫孢子化卵囊的潜隐期为7～9 d，显露期为15～18 d；感染2000个孢子化卵囊的潜隐期为4～6 d，显露期为7～13 d。刘光辉等[7]认为猪等孢球虫的潜隐期、显露期、感染强度与感染剂量存在相关性，即感染剂量越小，潜隐期越长，显露期越长，感染强度（OPG值） 越小，反之亦然。张靖伟等[8]在研究东北虎源等孢球虫感染猫的排卵囊规律时也获得相似的结果。

表1 猫人工感染芮氏等孢球虫后的OPG变化（×104）Table1 The OPG pe r day in cats infected with I.rivolta

图2 猫人工感染芮氏等孢球虫卵囊排出规律Fig.2 The oocysts shedding pattern in cats infected with I.rivolta

从图2也可看出，芮氏等孢球虫感染猫在d10与d13出现两个较为临近的排卵囊高峰期，且前者的峰值小于后者。这与东北虎源等孢球虫排卵囊规律只存在一个峰值有异[8]，但与张倩等[9]在人工感染犬等孢球虫排出卵囊的情况相似。这一结果提示芮氏等孢球虫的内生性发育过程可能与犬等孢球虫相似。

[1] 杨光友.动物寄生虫病学 [M].3版.四川∶ 四川科学技术出版社, 2009.

[2] Petry G, Kruedewagen E, Kampkoetter A, et al.Efficacy of emodepside/toltrazuril suspension (Procox® oral suspension for dogs) against mixed experimental Isospora felis/Isospora rivolta infection in cats [J].Parasitol Res, 2011, 109Suppl 1∶ S29-S36.

[3] Liebman W M, Thaler M M, Delorimier A, et al.Intractable diarrhea of infancy due to intestinal coccidiosis [J].Gastroenterology, 1980, 78(3)∶ 579-584.

[4] 许金俊.动物寄生虫病学实验教程 [M].南京∶ 河海大学出版社, 2007.

[5] Dubey J P.Life cycle of Isospora rivolta (Grassi, 1879) in cats and mice [J].J Protozool, 1979, 26(3)∶ 433-443.

[6] Harleman J H, Meyer R C.Life cycle of Isosopora suis in gnotobiotic and conventionalized piglets[J].Vet Parasitol, 1984, 17(1)∶ 27-39.

[7] 刘光辉, 宁长申, 张龙现, 等.猪等孢球虫纯种卵囊扩增及生物学特性研究[J].河南农业大学学报, 2005, 33(4)∶410-416.

[8] 张靖伟, 路义鑫, 张子群, 等.东北虎源等孢球虫在猫体内的卵囊排出规律观察[J].中国预防兽医学报, 2009, 31(11)∶ 914-915.

[9] 张倩, 李凌丹, 张德智, 等.人工感染犬等孢球虫卵囊排出规律的观察[J].中国病原生物学杂志, 2011, 6(3)∶207-208.

OOCYST SHEDDING PATTERN IN CATS INFECTED WITH ISOSPORA RIVOLTA

ZHANG Zu-hang, HOU Zhao-feng, ZANG Chuan-jiao, ZHU Shui-ming, TAO Jian-ping
(Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Colledge of Veterinary Medicine, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China)

Isospora rivolta is one of the pathogens that cause coccidiosis in cats.Clinical signs of feline coccidiosis include diarrhea, vomiting, weight loss, malabsorption, hypoimmunity and even death.Little is known about the oocyst shedding pattern in cats infected with I.rivolta, which might have hindered prevention and treatment.In this study, domestic cats were fed with I.rivolta and oocyst shedding was observed.The oocysts were detected in feces on day 7 post-inoculation, then increased signifi cantly.The oocyst shedding formed two peaks, the fi rst small peak observed on day 10 and a second large peak on day 13 post-inoculation.Then the oocyst shedding rapidly decreased and no oocysts were detected on day 19 post-inoculation.

Cats; Isospora rivolta; infection; oocysts; shedding

S852.723

：B

：1674-6422（2015）01-0051-03

2014-07-11

江苏省高校优势学科建设工程项目；中央财政支持地方高校发展项目

张祖航，男，兽医专业

陶建平， E-mail：yzjptao@126.com