肺癌患者eIF3a基因多态性与铂类药物化疗敏感性及耐药性的关系

李旭

(福建医科大学附属泉州第一医院，福建泉州 362000)



肺癌患者eIF3a基因多态性与铂类药物化疗敏感性及耐药性的关系

李旭

(福建医科大学附属泉州第一医院，福建泉州 362000)

摘要：目的探讨肺癌eIF3a基因多态性与铂类药物化疗敏感性及耐药性的关系。方法选择确诊肺癌患者136例，其中行依托泊苷联合顺铂(EP)化疗48例，吉西他滨联合顺铂(GP)化疗40例，多西他赛联合顺铂(DP)化疗34例，吉西他滨联合卡铂(GBP)化疗14例。连续化疗2个周期后6个月随访，根据对铂类药物敏感与耐药情况分为铂类敏感组80例和铂类耐药组56例。抽取患者血样提取DNA进行基因多态性检测，分析肺癌患者eIF3a基因多态性与铂类药物化疗敏感性及耐药性的关系。结果铂类耐药组和铂类敏感组rs3808952、rs3824830、rs3740555多态性位点基因型频率比较差异具有统计学意义(P均<0.05)，其中GG基因型频率对肺癌铂类耐药性与敏感性影响最大。EP方案耐药患者中rs3824830位点突变率最高，GP、DP和GDP中耐药患者rs3808952位点突变率最高。EP敏感患者中rs3740553位点突变率最低，GP敏感患者中rs3740555位点突变率最低，DP和GDP敏感患者rs3824830 和rs3740553位点突变率最低。结论 肺癌eIF3a基因多态性特别是rs3808952、rs3824830、rs3740555位点变异与铂类药物化疗的敏感性和耐药性有关。

关键词：肺肿瘤；铂类药物；eIF3a基因；化学疗法；敏感性；耐药性

临床上，铂类药物是肺癌、食管癌等肿瘤化疗的的一线药物[1];但是各类肿瘤对该药物的耐药性广泛存在，严重地影响了肿瘤化疗成功率，是肿瘤患者生存率降低的重要因素。国内外研究[2,3]发现，不同类型肿瘤患者中eIF3a基因多态性或者基因突变可影响铂类药物的化疗敏感性和耐药性。为此本文对肺癌患者铂类药物化疗敏感性及耐药性与eIF3a基因多态性的关系进行了探讨。

1 资料与方法

1.1临床资料选择2014年1～12月在本院确诊并收治住院肺癌患者136例，男82例、女54例，年龄45～68(51.23±5.49)岁；其中小细胞肺癌32例(局限期8例、广泛期24例)，非小细胞肺癌104例(鳞癌49例、腺癌55例)。 患者既往均无其他肿瘤病史，经支气管纤维镜活检组织病理学确定肺癌诊断，均顺利接受连续2个周期化疗，化疗1个周期为3周。其中接受依托泊苷联合顺铂(EP)化疗48例，吉西他滨联合顺铂(GP)化疗40例，多西他赛联合顺铂(DP)化疗34例，吉西他滨联合卡铂(GBP)化疗14例。顺铂75 mg/m2静滴，每周期第1天给药；多西他赛75 mg/m2静滴，每周期第1天给药；依托泊苷95 mg/m2静滴，每周期第1、2、3天给药；吉西他滨1 000 mg/m2静滴，每周期第1、8天给药；卡铂200 mg/m2静滴，每周期第l天给药。确诊至化疗结束患者未接受手术、放射、生物等其他方法治疗，且化疗过程中未出现严重不良反应。化疗后随访，根据患者对铂类药物敏感与耐药情况分为铂类敏感组(初始化疗完成后6个月或更长时间复发者)80例和铂类耐药组(肿瘤在6个月内复发者，包括完成初始化疗后6个月内复发患者及初始化疗过程中对铂类药物不敏感的患者)56例。本研究经本院伦理委员会批准，患者知情同意。

1.2eIF3a基因多态性位点的筛选和检测随访时抽取患者血样提取DNA进行基因多态性检测。血液样本在超级洁净工作台上提取DNA，之后采用M200 Pro多功能酶标仪测定DNA浓度，每个样本重复测量3次，取平均值，控制OD260/OD280值为1.6～1.9，如不在此范围说明样本DNA被污染，需重新提取和测定此样本DNA。根据文献报道，本试验选取了7个多态位点进行研究，以观察其与肺癌化疗的敏感性关系。抽取患者的血液样本DNA采用Mass ARRAY技术检测多态性位点信息，首先进行PCR反应扩增DNA，纯化后加入单核苷酸多态性序列特异性地将引物延伸一个碱基，再次纯化DNA后点样至基因芯片上放入真空管，利用飞行时间质谱技术检测单核苷酸多态性位点。

1.3统计学方法采用SPSS17.0统计软件。计数资料用百分比表示，组间比较采用χ2检验；eIF3a基因多态性位点采用Hardy-Weinberg遗传平衡检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1eIF3a基因多态性位点分型eIF3a基因rs2271364的多态性位点没有检测出突变基因型，rs3808952、rs3824830、rs3740556、rs3736447、rs3740555、rs3740553的多态性位点均存在突变基因型，且符合Hardy-Weinberg平衡。

2.2eIF3a基因多态性与肺癌铂类药物敏感性和耐药性的关系铂类耐药组与铂类敏感组的rs3808952、rs3824830、rs3740555多态性位点基因型频率比较差异有统计学意义(P均<0.05)，其中GG基因型频率对肺癌铂类耐药性与敏感性影响最大。rs3740556、rs3736447、rs3740553多态性位点基因型频率比较差异无统计学意义(P均>0.05)。见表1。

2.3肺癌铂类耐药组与敏感组应用不同化疗方案患者eIF3a基因突变情况EP耐药患者中rs3824830位点突变率最高，GP、DP和GDP耐药患者中rs3808952位点突变率最高。EP敏感患者中rs3740553位点突变率最低，GP敏感患者中rs3740555位点突变率最低，DP和GDP敏感患者中rs3824830 和rs3740553位点突变率最低。见表2。

表1　肺癌铂类耐药组与敏感组eIF3a多态性位点基因型分布(%)

组别rs3736447AAGAGGrs3740555AAGAGGrs3740553AAGAGG铂类耐药组48.2(27/56)66.6(18/27)35.3(12/34)56.2(18/32)40.0(16/40)60.7(17/28)46.1(18/39)65.4(17/26)55.3(21/38)铂类敏感组51.8(29/56)33.3(9/27)64.7(22/34)43.7(14/32)60.0(24/40)39.3(11/28)53.8(21/39)34.6(9/26)44.7(17/38)

表2　 肺癌铂类耐药组与敏感组患者不同化疗方案eIF3a基因突变情况 (例)

3讨论

研究发现，参与正常细胞有丝分裂的基因表达改变会增加异常的有丝分裂，导致肿瘤的发生发展，eIF3a基因异常会导致有丝分裂中纺锤体出现缺陷。国外通过筛选多个基因的205个单核苷酸多态性位点，发现eIF3a基因多个位点异常与肺癌发生发展相关[4]。铂类药物被广泛应用于治疗各种实体性肿瘤，其中顺铂作为第一代的铂类药物，是治疗非小细胞肺癌的一线用药[5]。铂类药物可以通过细胞膜进入细胞内从而发挥其抗肿瘤作用。本文采用铂类药物包括顺铂和卡铂，顺铂属于细胞周期非特异性药物，抑制癌细胞的DNA复制过程，使之发生细胞凋亡；卡铂干扰DNA合成，产生细胞毒作用。但是，铂类药物诱导的毒性作用及肿瘤耐药性严重影响了肺癌化疗的成功率[6]。

核苷酸切除修复途径是肿瘤对铂类药物耐药的主要作用机制，eIF3a基因是此途径的上游基因，能调节核苷酸切除修复途径的活性[7]。单核苷酸多态性是基因多态性的一种形式。研究发现，elF3a的表达水平与铂类药物引起的DNA损伤修复能力直接相关[8]，因此常采用提取DNA来检测基因多态性。研究证实，elF3a在多种癌症组织和癌症细胞中呈现过度高表达[9]，且与化疗药物的多种毒副作用有关[10]。国内对282例非小细胞肺癌患者eIF3a基因的22个单核苷酸多态性位点进行了检测，发现eIF3a基因的rs77382849多态性位点与铂类药物诱导的肾毒性相关[11]。本文通过查阅文献选取了7个多态性位点，显示肺癌患者eIF3a基因rs3808952、rs3824830、rs3740556、rs3736447、rs3740555、rs3740553多态性位点均有突变发生。进一步分析耐药组和敏感组的rs3808952、rs3824830、rs3740555基因型频率，发现3个位点的AA、GA和GG基因型对肺癌铂类耐药性与敏感性有影响，其中GG基因型频率对肺癌铂类耐药性与敏感性影响最大，而rs3740556、rs3736447、rs37405533位点的AA、GA和GG基因型对肺癌铂类耐药性与敏感性无影响。

本研究还显示，肺癌患者采用不同的铂类药物化疗时，EP耐药患者中rs3824830位点突变率最高，GP、DP和GDP耐药患者中rs3808952位点突变率最高。EP敏感患者中rs3740553位点突变率最低，GP敏感患者中rs3740555位点突变率最低，DP和GDP中敏感患者rs3824830 和rs3740553位点突变率最低。这可能与不同铂类药物致DNA损伤过程中的DNA修复途径不同有关[12,13]。

总之，肺癌患者eIF3a基因多态性与铂类药物化疗的敏感性和耐药性有关，特别是与rs3808952、rs3824830、rs3740555位点的变异有关，且采用不同化疗方案治疗患者基因多态性位点变异也不相同。

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(收稿日期：2015-12-14)

中图分类号：R734.2

文献标志码：B

文章编号：1002-266X(2016)05-0072-03

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.05.030