厦门市同安区猪伪狂犬病流行病学调查

李谓娟杨　涛

（1.厦门市同安区动物卫生监督所　福建厦门　361100；2.厦门市动物疫病预防控制中心　福建厦门　361009）

厦门市同安区猪伪狂犬病流行病学调查

李谓娟1杨涛2

（1.厦门市同安区动物卫生监督所福建厦门361100；2.厦门市动物疫病预防控制中心福建厦门361009）

猪伪狂犬病是《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》中优先防治的16种动物疫病之一，到2020年全国所有种猪场猪伪狂犬病都要达到规划设定的考核标准。厦门市同安区为了配合做好猪场净化工作，掌握全区猪群猪伪狂犬病的感染状况，对其进行流行病学调查，估计辖区内猪群猪伪狂犬病的血清学流行率。本研究使用猪伪狂犬病病毒gE-ELISA试剂盒，共检测991份血清样品，并实地调查20家猪场，了解猪场饲养管理和免疫情况。结果显示，同安区猪伪狂犬病血清学场流行率为65.0%，个体真实流行率为47.5%（44.5%～50.4%）。

猪伪狂犬病血清学流行率

猪伪狂犬病（PR）是由伪狂犬病病毒（PRV）引起的猪的一种急性传染病，不同阶段猪表现不同症状，通常引起妊娠母猪流产，产木乃伊胎、死胎或弱仔，初生仔猪出现腹泻和神经症状，感染率和病死率可高达100%，母猪出现返情，育肥猪多呈隐性感染，可出现发热和轻微的呼吸道症状，耐过后生长发育迟缓，饲料报酬降低，并可长期带毒、排毒，成为顽固传染源［1］。从2011年首先在天津等地区开始发现生长育肥猪表现神经症状而死亡的新型猪伪狂犬病现象，到目前为止，我国主要养猪区域基本都有新型猪伪狂犬病发生。新型猪伪狂犬病感染主要表现在很多伪狂犬病阴性猪场PRV gE抗体检测突然转阳，新型猪PRV流行株比经典毒株对猪的致病性更强，多数猪场的生长肥育猪先发病，之后出现母猪流产，产死胎、弱仔，哺乳仔猪、保育猪、育肥猪等均可能出现腹泻、呼吸道症状、神经症状等，死亡率很高，2014年开始福建许多猪场也出现该现象［2］。

《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020）》将猪伪狂犬病列为优先防治的动物疫病病种之一，并将猪伪狂犬病作为种畜禽净化的重点疫病，到2020年全国所有种猪场猪伪狂犬病都要达到净化标准，中国动物疫病预防控制中心于2014年启动了规模化养殖场猪伪狂犬病净化示范场和净化创建场的评估。厦门市同安区近两年来一直执行生猪退养政策，只允许符合环保条件的规模猪场在限养区养殖，目前保留猪场20个，辖区内有1家原种猪场正在开展猪伪狂犬病净化。为了有效做好猪伪狂犬病的净化工作，必须掌握辖区内猪群猪伪狂犬病的感染状况，从而为进一步的控制和净化措施提供基础数据，在厦门市动物疫病预防控制中心的指导下，同安区动物卫生监督所于2015年10月至11月在同安区开展了猪伪狂犬病流行病学调查，估计其场流行率和个体流行率。

1　材料与方法

1.1目标群同安区目前保留猪场20个，将所有猪场作为目标群，于2015年10月至11月采用横断面研究方法对20家猪场开展抽样检测，同时进行现场问卷调查，估计其猪伪狂犬病血清学流行率，并了解猪场饲养管理水平和猪伪狂犬病免疫等情况。

1.2抽样策略和样本量猪场内抽样数量用估计流行率的方法进行计算［3］，按95%置信水平（CL）和15%可接受绝对误差（d），设预期流行率为30%（p），根据计算公式：N=（1.96）2p（1-p）/d2，确定需要抽取的样本量（N）为36，即每场随机抽取36头猪。现场抽样时采取系统随机抽样方法，按一定的栏位间隔进行抽样，抽取的猪群主要为育肥猪、生产母猪、保育猪和哺乳仔猪。

1.3血样收集和检测从猪场采集的全血样品置于一次性采血器中，送至厦门市动物疫病预防控制中心兽医实验室进行血清分离，实施检测前置于-20℃冷冻保存。血清样品用ID.vet公司猪伪狂犬病病毒gE-ELISA试剂盒检测PRV gE抗体。

1.4数据分析流行率估计：（1）群体水平流行率为检测到的阳性场数量占所有检测场数的比值，其中阳性场是指任何一个样品检测为gE抗体阳性，其所在猪场即定义为猪伪狂犬病阳性场。（2）个体水平表观流行率为检测到的阳性猪只数量占抽样研究群数量的比值，必须通过直接标化法计算出全区的个体表观流行率（AP'），标准化计算公式为：AP'=Σ （IhTh），其中Ih是不同猪场的阳性率，Th是不同猪群在总群中的分布比例，总体比例的95%置信区间（CI）根据公式：CI=AP'±Sp计算，Sp=［Σ（1-fh）/（nh-1）*Wh2*ph*（1-ph）］^0.5，式中，Sp是总体抽样误差，ph是第h层样本中阳性率，Wh是第h层权重，nh是第h层样本量，fh是第h层抽样比例［4］；然后结合试剂敏感性（Se）和特异性（Sp）计算个体真实流行率（TP），计算公式：TP=（AP+Sp-1）/（Se+Sp-1）。阳性率的95% CI根据公式：CI=p±z计算，其中p是阳性率，z为标准正态分布中概率为0.05所对应的值，n为抽样数量。

2　结果与分析

2.1猪场gE抗体检测结果共采集了20个猪场的血清样品991份，检出gE抗体阳性样品546份，其中猪伪狂犬病阳性场有13个，阳性场中gE抗体阳性率最低为9.5%，另有5个猪场gE抗体阳性率高达100%，具体检测结果见表1。

2.2流行率估计调查结果显示，同安区猪伪狂犬病血清学场流行率为65.0%，个体表观流行率通过抽样权重分析后为46.5%（见表1），根据ELISA诊断试剂盒的试验敏感性（Se=98%）［5］和特异性（Sp= 99.9%），得到同安区猪伪狂犬病血清学个体真实流行率为47.5%（44.5%～50.4%）。

表1　猪场gE抗体检测结果

2.3不同猪群gE抗体阳性率比较从不同猪群gE抗体阳性率分布情况来看，育肥猪的gE抗体阳性率最低，其次为生产母猪和哺乳仔猪，保育猪的gE抗体阳性率最高，经x2检验，P=0.000，说明不同猪群之间gE抗体阳性率存在显著差异，具体数据见表2。

表2　不同群猪gE抗体阳性率分布情况

2.4调查表统计结果调查问卷共设计20个问答题，涉及猪场饲养管理、免疫情况、猪伪狂犬病发病情况等内容，并调查了猪场使用的猪伪狂犬疫苗生产厂家。对调查问卷进行整理统计，20个猪场均对病死猪实行了无害化处理，都使用猪伪狂犬病病毒gE基因缺失活疫苗，除个别一两家外，生产管理和生物安全水平都比较好，猪伪狂犬病疫苗分别来自6个厂家，其中4个为国产疫苗，2个为进口疫苗，调查内容见表3。

表3　20家猪场问卷调查结果

3　讨　论

3.1同安区猪伪狂犬病血清学流行率较高调查结果显示，同安区猪伪狂犬病血清学流行率较高，20个猪场中13个为猪伪狂犬病阳性场。同安区生猪养殖高峰期在2013年，未执行生猪退养政策前，规模化养殖与小型散养共存，养殖场（户）技术水平、管理水平、养殖环境参差不齐，疫病防控工作难度较大，自福建省猪场在2014年出现新型猪PRV感染现象后，同安区猪场也未能幸免，这可能是伪狂犬病流行率居高不下的主要原因。本次调查发现，7个猪伪狂犬病阴性场有6个建成与投入使用的时间都在2009-2011年，属于比较新的场，而且场址均位于半山区，周围3 km内无其他养殖场，且有天然山体屏障，由于便于疫病防控，降低了猪伪狂犬病传入猪场的风险。

3.2加强免疫是目前防控猪伪狂犬病的主要手段目前不同阶段猪群PRV gE抗体阳性率均较高，现阶段开展猪场猪伪狂犬病净化难度非常大。林文耀等对2011-2015年规模化猪场伪狂犬病野毒感染血清学流行病学调查的结果表明，猪伪狂犬病流行有持续上升的趋势，仍是未来一段时间养猪业重要传染病之一［6］。王继春等用猪伪狂犬病活疫苗（Barta K61株）对仔猪免疫1次，1周后用猪伪狂犬病病毒变异株（AH02LA）攻毒，结果显示可以抵御伪狂犬病病毒变异株攻击［7］，因此，在现阶段，加强伪狂犬病疫苗免疫，选择质量稳定的疫苗，制定合理免疫程序，增加免疫次数，特别是加强仔猪和生猪肥育猪的免疫，是防控伪狂犬病的有效手段。

3.3加强监测，开展种猪群净化问卷调查结果显示，50%猪场有外购种猪经历，90%猪场认为购入种猪时经过检测，经深入调查发现，检测的项目主要为国家强制免疫的疫病抗体，猪场对引进种猪虽然有隔离，但并未能执行严格的隔离检测措施，这是猪场疫病防控的重大隐患。因此，猪场必须加强引种管理，要从伪狂犬病阴性猪场引进种猪，建设独立的引种隔离舍，隔离后检测合格方可混养。针对母猪群PRV gE抗体阳性的猪场，可根据阳性率高低制定相应的净化措施，逐步监测淘汰阳性种猪，同时加强饲养管理，通过养殖设施改造、对不同阶段猪群进行隔离饲养、严格执行生物安全措施和灭鼠等综合措施防控伪狂犬病。

［1］斯特劳B E，阿莱尔S D，蒙加林W L，等.猪病学［M］.8版.赵德明，张中秋，沈建忠，等译.北京：中国农业大学出版社，2000：239-253.

［2］白挨泉.新型猪伪狂犬病流行情况及净化措施［J］.兽医导刊，2016（2）：22-24.

［3］沈朝建，王幼明.兽医流行病学调查与监测抽样技术手册［M］.北京：中国农业出版社，2013：43.

［4］孙向东，刘拥军，王幼明.兽医流行病学调查与监测：抽样技术［M］.北京：中国农业出版社，2011：85-86.

［5］Morenkov O S，Fodor N，Fodor I.Indirect ELISAs based on recombinant and affinity-purified glycoprotein E of Aujeszky's disease virus to differentiate between vaccinated and infected animals［J］.Acta Vet Hungarica，1999，47（1）：137-150.

［6］林文耀，曾容愚，李聪，等.2011-2015年规模化猪场伪狂犬病野毒感染血清学流行病学调查［J］.养猪，2016（2）：113-116.

［7］王继春，曾容愚，Daniel T，等.猪伪狂犬病活疫苗 （Bartha K61株）对变异株的保护效力［J］.畜牧与兽医，2015，47（12）：1-4.

Epidemiological investigation of pseudorabies in Tongan，Xiamen

Li Weijuan1Yang Tao2
（1.Tongan Animal Health Inspection Institute，Xiamen 361100；2.Xiamen Center for Animal Disease Control and Prevention，Xiamen 361009）

According to the Chinese National Medium and Long-term Plan for Animal Epidemic Prevention and Control，all swine breeding farms must to achieve criteria of pseudorabies（PR）elimination by 2020.In order to understand the infection status of pseudorabies in Tongan，an epidemiological investigation was conducted to estimate the prevalence of pseudorabies.PRV gE-ELISA kit was used to test gE antibody，a total of 991 serum samples were tested and 20 pig farms were investigated to know management and immune state.The result showed that the herd prevalence of pseudorabies was 65.0%and the individual true prevalence was 47.5% （44.5%～50.4%）.

Pseudorabies Serologic Prevalence

A

1003-4331（2016）04-0015-04