关于女性生殖道HPV感染的研究进展

吴 杨，王振美

(扬州市中医院妇科，江苏 扬州 225000)

人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV)属于嗜上皮性病毒，在人类生殖道内分布较多，其引发的生殖道感染往往在生殖道内潜伏，可能长达数年、数十年，当人体免疫力减弱时，潜伏中的人乳头瘤病毒受到激活而大量释放，容易引发生殖道良性肿瘤，存在恶变风险[1-2]。近年来，临床上发现与女性生殖道HPV感染相关的疾病(如宫颈上皮内瘤变、宫颈癌、外阴癌等)发生率升高，严重威胁到广大女性人群的生殖健康[3]，因此，对女性生殖道HPV感染的发病机理、诊治进一步明确十分重要。本文主要就女性生殖道HPV感染的概念、发病机理、常用检测方法以及常见治疗方法等方面进行综述，以归纳总结女性生殖道HPV感染的发病机理和诊治进展。

1 女性生殖道HPV感染的概念

HPV病毒是一种常见的嗜上皮性病毒，无包膜，其DNA基因组为双链闭环，DNA基因组大小约为7.2～8.0 kb，相对分子量为5.0×106，目前，临床上已经克隆且鉴定出的HPV病毒多达上百种，约有30多种HPV病毒自人类生殖道分离得到[4]。根据HPV病毒的致病能力，临床上通常将HPV病毒分为高危型、低危型，其中，高危型HPV病毒主要包括HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV45、HPV51等，在女性生殖道内长期潜伏，多见于高龄妇女，容易引发宫颈上皮内瘤变，且该病变不易治愈，存在发展为宫颈癌的高风险；低危型HPV病毒主要包括HPV6、HPV11、HPV30、HPV39、HPV42、HPV43等，在女性生殖道内分布的低危型HPV感染多见于年轻妇女，容易引发外阴湿疣、扁平湿疣，少数患者会发生低度宫颈上皮内瘤变，其治愈率较高，发展为宫颈癌的风险相对较低[5-6]。

HPV病毒具有严格的嗜上皮性，一旦侵入上皮细胞，往往会在上皮基底层细胞中广泛复制，且随着上皮基底层细胞的分化和成熟，逐渐进入表层，病毒DNA经包装形成完整的病毒颗粒，经修饰后往往会快速在上皮细胞表面释放，并经性、母婴垂直等方式广泛传播[7]。

2 女性生殖道HPV感染的发病机理

HPV病毒通常是经由微小糜烂创面进入上皮细胞基底层，造成生殖道内感染。有研究采用小鼠进行HPV病毒移植感染研究后发现，感染4周后可见小鼠HPV病毒基因组发生早期开放阅读框架转录，6～8周内病毒大量复制，可见晚期开放阅读框架转录，且细胞增生至平台期，10～12周内形成完整的病毒颗粒，在上皮细胞表层大量复制，形成尖锐湿疣[8]。HPV病毒DNA在上皮细胞表层中的含量增多，尤其是高度分化的上皮细胞表皮层中存在大量病毒DNA复制，病毒DNA受到衣壳蛋白包被后可形成完整病毒颗粒，具有感染性，可通过病毒E4对细胞内细胞角蛋白网进行破坏，并向外释放，而在低度分化的上皮细胞基底层中，HPV病毒DNA复制和转录相对较弱。采用传统的原位杂交方法无法对潜伏的HPV病毒DNA予以检出，故目前对潜伏期HPV病毒感染的发生过程尚未明确[9-10]。导致女性生殖道HPV感染的相关因素主要为宿主免疫应答抗体反应以及细胞介导的免疫反应，此外，性行为过早或性伴侣过多、妊娠、人类免疫缺陷病毒等也有可能会引起女性生殖道内HPV感染[11]。

3 女性生殖道HPV感染的常用检测方法

3.1 实时荧光定量PCR检测

实时荧光定量PCR检测是一种较为新型的核酸定量检测方法，主要是利用Taq酶5’→3’外切酶的活性，通过荧光标记探针与引物序列中的DNA模板结合，使探针的5’端标记荧光对基团FAM予以发射，而靠近3’端标记荧光则对基团TAMRA予以淬灭，延伸期的Taq酶随着引物的延伸向DNA模板移动至探针结合部位时，充分发挥Taq酶的5’→3’外切酶活性，切断探针，解除荧光淬灭作用，使荧光信号有效释放，再采用光电传导系统对荧光信号变化予以检测，利用计算机分析系统获得定量检测结果[12]。实时荧光定量PCR检测可有效提高HPV病毒分型的检测特异性，可对女性生殖道内HPV感染予以有效检出，但这种检测方法的成本相对较高，所需设备和试剂均较为昂贵，且需要专人操作，对其临床应用产生一定程度的限制。

3.2 PCR-ELISA法检测

PCR-ELISA法主要是先对PCR体系进行扩增，再利用ELISA法对其产物进行定量，选取通用引物，利用引物5’端对地高辛进行标记，采用探针对生物素进行标记，将扩增产物加入预先包被的聚苯乙烯微孔板中，在42℃下持续杂交20～30 min，最后利用酶底物与标记酶进行显色，通过对其显色吸光度进行测定，再对其感染情况予以判断[13]，这种检测方法具有较高的灵敏度和特异度，且操作相对简便，可采用全自动化酶标仪进行测定，检测成本也较低，在临床上的应用相对广泛。

3.3 宫颈脱落细胞薄层涂片检查

目前，临床上检测HPV感染应用最广泛的检测方法为宫颈脱落细胞薄层涂片技术，该检测方法主要是通过对宫颈脱落细胞进行涂片，再对其涂片进行计算机快速图像分析，可对细胞形态是否异常进行有效识别，还可对其他病毒感染引起的细胞异常情况进行有效鉴别，具有较高的灵敏度和特异度，相对于传统巴氏涂片法，可减少漏诊。

4 女性生殖道HPV感染的常见治疗方法

目前，临床上治疗女性生殖道HPV感染的方法主要包括局部药物治疗、局部物理治疗、手术治疗以及免疫治疗，其中，局部药物治疗主要是采用5-Fu软膏、三氯醋酸等外用药物对患者外阴、阴道内进行涂抹；局部物理治疗主要是采用微波、激光或冷冻方法治疗，微波适用于微小病变，激光适用面于浅表病变，冷冻适用于平坦病变；手术治疗多用于病灶积大且蒂部较长的HPV感染，通过手术对病灶予以切除，但在手术后为减少复发，还应采用药物治疗；免疫治疗主要是利用干扰素对患者的免疫功能予以提高，增强其局部或全身抵抗HPV病毒的能力。此外，近几年，临床上还对HPV病毒疫苗进行研发，为HPV病毒感染开辟新道路，但其进展缓慢，尚无法广泛应用于临床[14]。

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