玉露增殖培养试验报告

2017-10-12 06:19应冬勤陈依桃林昱
现代园艺 2016年21期
关键词:玉露

应冬勤 陈依桃 林昱

摘要:以玉露的幼嫩花为试材进行增殖培养试验,结果表明,玉露适宜分化增殖培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,芽多苗壮,生根培养基为1/2MS+6-BA 0.1mg/L+IBA 0.2mg/L,生根快,10天生根率达86%。玉露试管苗移栽基质以过筛的沙壤土:草粪=2:1为宜,栽后少浇水并遮荫,移栽成活率达90%以上。

关键词:玉露;茎尖培养;增殖培养

1試验材料

玉露的幼嫩花茎。

2试验方法

2.1无菌材料的获得 将选取的玉露幼嫩花茎小心剥去苞叶,先用适量的洗洁精清洗,倒去洗涤剂,然后流水冲洗2h。在超净工作台上用75%的酒精浸泡60s,无菌水冲洗2-3次后,再用0.1%HgCI浸泡3-5min,并添加1滴吐温;然后用无菌水冲洗4-5次。将消毒后的材料置于无菌盘内,剪切成1cm左右的小段,放入无菌锥形瓶中封好瓶口备用。

2.2培养基的筛选 以MS基本培养基为基本培养基,在多次试验的基础上,确定诱导培养基:MS+NAA0.1mg/L+6-BA 1.0mg/L;增殖培养基:MS+6-BA0.5mg/L+NAA 0.2mg/L;生根培养基:I/2MS+NAA0.25mg/L,以上培养基均添加3%的蔗糖,6%的琼脂,pH5.8。

2.3培养条件 培养温度(25±2)℃,光照强度2000-3000Lx,光照时间12h/d,大约15-25d后,试管中接种的外植体就可以膨大,形成愈伤组织。愈伤组织的形成标志着接种的外植体的生长状态已脱离分化状态,开始重新恢复分生能力。愈伤组织形成1周后,就可将愈伤组织转管进行继代培养或分化培养。

2.4愈伤组织继代培养 将愈伤组织在接种室无菌环境下,从玻璃瓶中取出,用镊子和解剖刀清除附着在愈伤块上的培养基,直到愈伤块上无残留培养基为止。然后用解剖刀将愈伤组织切成小块,再接种到愈伤组织诱导培养基的玻璃瓶中,在与诱导愈伤组织相同的培养基下继续培养。几天后,玻璃瓶中的小愈伤块即可逐渐长大。通过愈伤组织的继代培养,原来接种的1个玉露茎尖组织可以繁殖出大量的新组织,这些新材料可用于分化培养。

2.5愈伤组织分化培养 在无菌环境下,将愈伤组织从玻璃瓶中取出,用镊子和解剖刀剔除组织上的培养基,并切成小接种块接种到分化培养基的玻璃瓶中,分化培养的条件和愈伤组织培养相同。大约30-50d后,愈伤组织就可以分化出芽,并长出新叶片。当幼苗分化出一定数量或长到一定高度后,将这些小幼苗在无菌室取出,进行下一步的生根培养或重新诱导分化。

2.6诱导生根培养 当玻璃瓶中幼苗的叶片长到3cm左右时,将幼苗在无菌室取出,放人生根培养基玻璃瓶中培养,培养条件与分化培养相同。大约半个月左右,幼苗便可以生根。

2.7炼苗 幼苗具有2-3条根,根长1-2cm时,幼苗的形体已显健壮,便可将幼苗取出转移至温室或塑料大棚内。用清水清洗附在幼苗根上的残留培养基(注意:一定要清洗干净,否则会导致烂根)。将洗干净的幼苗整齐地排好,用清水喷湿,在温度15-25℃、湿度60%-80%的条件下炼苗24h,也可视情况而定缩短为12h。当幼苗茎叶颜色加深,根系颜色变为黄褐色并延长、伴有新根长出时表示炼苗成功。

2.8移栽 炼苗后,将幼苗进行移栽。先在由蛭石组成的驯化苗圃中进行驯化,每天定时给幼苗喷施培养液和清水,大约15-20d后,便可移栽至基质以过筛的沙壤土:草粪=2:1的苗圃中。根据幼苗大小在苗圃中划出深1-3cm的小沟,深度以叶片不接触基质为宜,株距以苗不相互接触为宜,以细雾状喷水,基质表面不积水为度。成活率达90%以上。

3结果分析

3.1丛生芽的诱导

把2-3cm的玉露幼芽接种于6种不同增殖培养基内,20d基部变黑,出现淡黄色幼芽原基,30d以后发育成芽,50d左右可以分切,进行继代培养。表1为接种50d的结果。结果表明,玉露分化增殖培养中,以MS为基本培养基,添加6-BA浓度1.0mg/L,NAA 0.5mg/L为宜,丛生芽多而壮,是玉露最佳的分化增殖培养基,单芽增殖了17个,苗高为5.2cm,6号培养基的幼苗有玻璃化现象。

3.2玉露生根培养 将丛生芽分切成单芽,接种于6种培养基内,每瓶接种4个芽,每种培养基接种30瓶,并观察其生根情况。在接种后10d、15d、50d观察玉露生长发育情况。结果表明,3号和5号培养基生根最快,4号培养基生根最晚;1号、2号、3号培养基苗长势一般,4号、5号6号培养基苗较键壮。说明玉露生根培养要求营养元素以MS为宜,1/2MS表现营养不足,添加生长素NAA的浓度不宜超0.3mg/L较好,浓度过高会抑制根的分化生长。最佳的生根培养基为1/2MS+6-BA 0.1mg/L+IBA 0.2mg/L,接种10天生根率达86%。

3.3移栽后的管理 苗床基质保持湿润,避免积水,以防烂根。每月施1次腐熟的稀薄液肥和0.1%多菌灵混合液。施肥时注意肥水不要溅到叶上,否则会形成斑点,影响观赏。夏季高温时植株呈半休眠状态,生长缓慢或停滞,可移至通风、凉爽处养护,避免暴晒和长期淋雨,不可浇水过多,停止施肥。玉露对光线较敏感,若光照较强会导致叶片生长不良呈浅红褐色;栽培场所太过于荫蔽,又会造成株形松散、不紧凑,叶片透明度变差;在半阴处生长的植株,叶片相对会比较肥厚、饱满,透明度也会增高,因此可以放在光线明亮,无直射阳光的地方进行养护,入秋天气凉爽后可恢复正常的肥水管理。冬天要求充足的光照,如果最低温度不低于13℃,可以继续浇水,让植株生长,但是不要施肥。

4讨论与结论

玉露分化增殖培养中,以MS为基本培养基,添加6-BA 1.0mg/L,NAA 0.5mg/L为宜,丛生芽多而壮。

玉露较易生根,有无激素均能长根,但生根的快慢和多少各不相同。试验结果表明,玉露生根培养以MS为基本培养基,1/2MS表现营养不足,添加生长素NAA的浓度不宜超0.3mg/L,过高抑制根的分化生长。最佳的生根培养基为1/2MS+6-BA 0.1mg/L+IBA 0.2mg/L,接种10天生根率达86%。玉露试管苗移栽基质以过筛的沙壤土:草粪=2:1为宜,栽后少浇水并遮荫,移栽成活率达90%以上。

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