幽门螺杆菌感染与TNM胃癌分期相关性的研究

李 鑫 李武良 李 萍

胃癌是国际上最常见的恶性肿瘤之一，同时也是我国十大癌症之一。Chen等[1]研究结果表明，2015年我国新增429.2万癌症病例，281.4万人因癌症死亡，其中胃癌是癌症死亡的主要原因。幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）为消化道常见菌群，我国H.pylori感染率为47%～66%[2]。研究表明，70%左右的胃癌病患由H.pylori引起，另外研究表明近90%的胃癌患者被确认与H.pylori感染相关[3-4]。目前，常用的H.pylori检测手段主要有组织活检、细菌培养、PCR基因诊断、13C或14C-尿素呼气检验（14CUrea Breath test，14C-UBT）[5-8]。 由于14C-UBT 简单快捷且准确度及敏感度较高，被广泛应用。同时，14C-UBT可对胃黏膜H.pylori密度进行定量评估，有效减少因H.pylori在胃内病灶非均匀性分布所致的取样误差[9]。P53抑癌基因是机体内一种抑制细胞癌变的基因，正常情况下，细胞或器官中P53蛋白含量极低，较难检测。当细胞DNA受到损伤并无法修复时P53蛋白大量表达，抑制癌变细胞[15-17]。骨桥蛋白（osteopontin,OPN）广泛存在于细胞、组织、器官中，参与组织修复，与细胞黏附、迁移及信号转导相关[18]。本研究通过14C-UBT检测不同TNM分期胃癌患者H.pylori感染状况及OPN的表达，旨在揭示不同TNM分期胃癌患者H.pylori的感染情况与胃癌进展的相关性。

资料与方法

一、一般资料

选取2014年5至2017年5月在我院经胃镜及病理检查确诊的胃癌患者105例，其中男60例，女45例；通过14C-UBT检测[10]确诊，其中H.pylori阳性74例，H.pylori阴性31例。根据TNM分期Ⅰ期25例，其中男 15例，女 10例，平均年龄（48.26±11.37）岁；Ⅱ期25例，其中男14例，女11例，平均年龄（47.82±10.96）岁；Ⅲ期 30例，其中男 17例，女13例，平均年龄（47.67±11.96）岁；Ⅳ期 25例，其中男15例，女10例，平均年龄 （47.82±10.96岁）。不同TNM分期胃癌患者的临床病理指标见表1。

表1 不同TNM分期胃癌患者的临床病理指标 （n）

二、方法

1.14C-UBT

所有患者检测前4周禁止使用抗生素及H.pylori敏感药物，患者空腹服用1粒14C胶囊，静坐25 min后引导患者向CO2吸收瓶匀速吹气1～4 min，使瓶内CO2吸收剂由紫红色变为无色，H.pylori液体闪烁计数仪测定3～5 min，DPM≥100视为阳性，DPM＜100为阴性（根据测定仪器说明书）。

2.OPN及P53的检测

采用免疫组化SP检测患者胃癌组织中OPN和P53的表达，OPN及P53单克隆抗体、免疫组化SP试剂盒购自福州迈新生物技术有限公司，检测按照试剂盒说明书操作。

三、数据分析

本研究使用SPSS 22.0进行数据处理。计数资料以%表示，采用χ2检验；采用Spearman进行相关性分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、胃癌患者H.pylori检测结果

结果显示，Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期感染率分别为52.0%（13/25），68.0%（17/25）、76.7%（23/30）、84.0%（21/25）；随着胃癌患者病情的发展H.pylori的感染率显著升高（χ2=27.450，P=0.000）。

二、H.pylori感染与不同TNM分期胃癌患者P53表达的关系

Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期H.pylori阳性胃癌患者的P53表达率均显著高于H.pylori阴性患者 （P＜0.05），且Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者H.pylori阳性率与P53表达率呈正相关，Ⅳ期胃癌患者H.pylori阳性与P53表达率相关系数为0.752，见表2。

表2 不同TNM分期胃癌组织中P53表达分析 [n（%）]

三、H.pylori感染与不同TNM分期胃癌患者OPN表达的关系

Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期H.pylori阳性胃癌患者的OPN表达率均显著高于H.pylori阴性患者 （P＜0.05），且Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者H.pylori阳性与OPN表达率呈正相关，且随着胃癌病情加重相关性明显，见表3。

表3 不同TNM分期胃癌组织中骨桥蛋白（OPN）的表达分析 [n（%）]

讨 论

目前，国际癌症研究中心（International Agency for Research on Cancer,IARC）已经将H.pylori列为Ⅰ类致癌因子[11]。胃癌是我国最常见的消化系统恶性肿瘤，研究表明胃癌病死率占癌症病死率的24%左右，为癌症死亡率首要因素。H.pylori通过感染损伤胃黏膜，促使胃细胞更新速度加快，增加了细胞更新时DNA复制错误机率，最终导致DNA损伤[12]。H.pylori可导致机体释放过多的超氧自由基导致胃细胞过氧化损伤，引发癌症[13]。H.pylori感染的检测手段主要有组织活检、细菌培养、血清及非血清H.pylori检测、13C-UBT或14C-UBT[5-8]。本研究采用14C-UBT检测不同TNM胃癌分期患者H.pylori的感染状态，发现Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期感染率分别为52.0%，68.0%、76.7%、84.0%，与石玲[15]在 H.pylori感染与原发性肝癌的相关性研究结果相似，提示H.pylori感染率随着癌症病情的发展显著升高，这一观点在胃癌、肝癌等癌症研究中得到支持。

P53抑癌基因是机体内一种抑制细胞癌变的基因，正常情况下，细胞或器官中P53蛋白含量极低，较难检测。当细胞DNA受到损伤并无法修复时P53蛋白大量表达，抑制癌变细胞[16-18]。骨桥蛋白广泛存在于细胞、组织、器官中，参与组织修复，与细胞黏附、迁移及信号转导相关[19]。研究表明，骨桥蛋白在肺癌、胃癌、肝癌等原发性肿瘤及其淋巴转移瘤组织中过量表达，可能参与肿瘤的侵袭转移[20-22]。本研究中Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期H.pylori阳性胃癌患者的P53和OPN表达率均显著高于H.pylori阴性患者（P ＜ 0.05），且Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者 H.pylori阳性与P53和OPN表达率呈正相关，并且随着患者病情的加重胃癌患者H.pylori阳性与P53和OPN表达率的相关性越密切。提示P53和OPN可能参与H.pylori通过感染引发癌症的机制。

综上所述，胃癌晚期即Ⅲ期、Ⅳ期胃癌患者H.pylori感染率显著升高，且H.pylori感染与OPN表达率和P53表达率呈正相关，并随着胃癌病情的加深相关越紧密。

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