糖尿病自身免疫抗体联合检测在糖尿病分型中的应用研究

林骏 徐良 刘尧

[摘要] 目的 探讨糖尿病（DM）自身免疫抗体在糖尿病分型中的诊断意义。方法 选取该院2017年6—12月期间收集的169例糖尿病临床血清样本，其中包括T1DM临床样本42例，T2DM2临床样本127例，选取同期100例非糖尿病临床血清样本作为对照。采用免疫印迹法检测入选者的GADA（谷氨酸脱羧酶抗体）、IAA（胰岛素自身抗体）、ICA（抗胰岛素细胞抗体），同时分析不同病程及不同性别的DM患者抗体检测的阳性率，探讨DM自身免疫抗体联合检测在DM诊断、分型中的意义。结果 T1DM临床样本GADA、ICA、IAA检测阳性率明显高于T2DM临床样本和非DM临床样本（P<0.05）；GADA、ICA、IAA 3种抗体联合检测的阳性率高于单一抗体检出阳性率（P<0.05）。结论 GADA、IAA、ICA联合检测在DM的诊断和DM的分型中具有重要价值，联合检测可进一步提高阳性率，减少漏诊，提高DM的诊断敏感性和特异性。

[关键词] 糖尿病；自身免疫抗体；糖尿病分型；诊断

[中图分类号] R587.1 [文献标识码] A [文章编号] 1672-4062（2018）02（b）-0052-02

糖尿病（Diabetes Mellitus，DM）是一组以高血糖为特征的代谢性疾病，造成高血糖的原因多与胰岛素分泌缺陷、胰岛素生物作用受损所致，或两者兼有[1]。临床可根据DM的临床表现主要分为Ⅰ型糖尿病（T1DM）和2型糖尿病（T2DM）两类，前者是因患者自身免疫系统损伤了胰岛β细胞，导致胰岛素合成、分泌减少、完全丧失；后者胰岛素虽有产生，但因其作用较差，导致了胰岛素的相对缺乏，确切来说，T2DM是一种异质情况。由于T1DM和T2DM患者的病因存在本质的区别，因此，明确DM分型对疾病的预防和治疗具有重要意义。DM患者处于无症状期和发病后的一段时间内可检出多种血清胰岛素抗体，如GADA、ICA、IAA，通过联合检测上述3项血清胰岛素抗体，可评估T1DM的发病进程，并鉴别DM的分型[2]。为探讨DM自身免疫抗体联合检测在DM分型中的临床价值，该研究采用免疫印迹法对该院2017年6—12月收集的169例糖尿病临床血清样本和100例非糖尿病临床血清样本进行对比研究，现将结果汇报如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取该院糖尿病临床血清样本，其中T1DM临床血清样本42例，包括男性23例，女性19例；年龄范围11～64岁，中位年龄（37.5±3.6）岁。T2DM临床血清样本127例，包括男性69例，女性58例；年龄范围14～71岁，中位年龄（42.5±3.3）岁。选取同期100例非糖尿病临床血清样本作为对照，其中包括男性55例，女性45例；年龄范围10～66岁，中位年龄（38.0±3.4）岁。T1DM、T2DM、非DM患者的年龄、性别资料相仿，差异无统计学意义（P>0.05）。

入选标准：DM患者符合中华医学会糖尿病学会中T1DM、T2DM的诊断标准。

1.2 检测方法

选取标本：所有研究临床样本为静脉血3 mL，置试管待凝固后离分离血清，分离血清后，血清样本存于-20℃的冰箱中待检。

检测试剂：所用试剂为深圳市伯劳特生物制品有限公司生产的糖尿病自身抗体免疫印迹试剂盒（免疫印迹法）。

检测方法：采用免疫印迹法检测研究对象的GADA、ICA、IAA，所有操作步骤均严格按照说明书进行。

1.3 评判标准

将试验后免疫印迹膜上起始线与试剂盒的标准带起始线对齐，观察免疫印迹膜上面显色位置的阳性条带与试剂盒的标准带上面各种糖尿病自身免疫抗体的标示位置，即可判断GADA、ICA、IAA的阴阳性并区分为何种自身免疫抗体阳性。

1.4 统计方法

研究数据纳入SPSS 19.0统计学软件进行数据分析，以百分率（%）描述计数资料，经χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

DM患者与非DM患者GADA、ICA、IAA检测阳性率比较，T1DM患者GADA、ICA、IAA检测阳性率明显高于T2DM患者和非DM患者，差异有统计学意义（P<0.05）；T2DM患者GADA、ICA、IAA检测阳性率明显高于非DM患者，差异有统计学意义（P<0.05）；DM患者中，GADA、ICA、IAA三种抗体检测的阳性率比较，GADA最高，ICA其次，IAA相对较低，联合检测的阳性率显著高于单项检测的阳性率，差异有统计学意义（P<0.05）

3 讨论

DM属代谢性疾病，其典型临床症状表现为高血糖，其病因复杂，包括自身免疫、遗传、病毒感染及接触有毒物质等，可引起眼、血管、神经、心脏、肾的慢性损伤及功能障碍，还可能诱发各种并发症。临床可根据患者临床表现分为T1DM和T2DM，T1DM是因自身免疫系统功能紊乱引起胰岛素β细胞功能受损，从而导致胰岛素合成、分泌减少、完全缺乏；T2DM则是以胰岛素抵抗为主，并伴有胰岛素分泌不足。由于两种类型的DM病因具有本质区别，因此，在治疗方式上也存在一定差异，所以对DM患者进行准确分型对临床制定治疗方案具有指导意义。研究指出，T1DM患者的外周血中含有GADA、ICA、IAA胰岛β自身免疫抗体，通过检测以上指标有助于诊断T1DM，且能与T2DM进行鉴别诊断[3]。

GADA是T1DM的标志性抗体，可用于缓进型、隐匿性T1DM的诊断及鉴别诊断。GADA是最早出现在T1DM患者体内的免疫抗体，甚至早于临床症状出现前。有关研究指出，GADA在T1DM发病早期的阳性率为38%～76%，在I级亲属中，阳性率高达78%～81%，其中大部分为GADA65，GADA67的分布较少，而GADA在T2DM中阳性率为0%～4%[4]。而在该研究当中，GADA在T1DM中的陽性检出率为61.90%，而在T2DM中的阳性检出率为25.98%，其结果与上述结果相符。无论是在T1DM还是T2DM患者中，GADA的阳性检出率均显著高于非DM患者，说明GADA是早期诊断T1DM的免疫抗体，还有助于鉴别DM类型。

ICA属于器官特异性抗体，抗原为微粒体组分或胰岛细胞浆，是胰岛细胞中β细胞损伤的标志物。ICA在DM的发病机制中起到了重要作用，该抗体主要针对胰岛自身的免疫细胞，一旦胰岛细胞抗体与胰岛细胞表面抗原结合后，就会引起免疫反应，使补体系统被激活，随即诱导细胞溶解和死亡，从而诱发DM[5]。T1DM的初诊患者中，80%的患者检出ICA呈阳性，随着病程延长，ICA阳性率会逐步下降，而在本研究当中，T1DM患者ICA阳性检出率为46.15%，而ICA在T2DM中的阳性检出率为16.54%，两者之间，差异有统计学意义，说明ICA可用于DM的分型诊断。

IAA是能够与胰岛素结合的一种抗体，该抗体的出现有两种情况，一种是接受外源性胰岛素治疗的患者，另一种则使出现在从未接受过胰岛素治疗的患者中。从本研究结果来看，在T1DM和T2DM患者中，GAGD和ICA的阳性率均高于IAA，且IAA的阳性检出率并不高，且在非DM者中，仍有1%的检出率，说明IAA并不是DM患者的特异性抗体。通过对比联合检测和单一检测的阳性率，结果发现，GADA+ICA+IAA的阳性检出率在T1DM中高达90.48%，而在T2DM中联合检测阳性率为36.22%，且存在明显差异；另一方面，通过比较单一检测GADA、ICA、IAA的阳性率，结果提示，GADA阳性率高于ICA，而ICA阳性率高于IAA，说明联合检测的阳性率最高，而单项检测的漏诊率高，联合检测可显著提高T1DM的诊断敏感性及特异性。

综上所述，GADA、IAA、ICA联合检测在DM的诊断和DM的分型中具有重要价值，联合檢测可进一步提高阳性率，减少漏诊，提高DM的诊断敏感性和特异性。

[参考文献]

[1] 池莲祥，聂本遂，刘香萍，等.GADA、ICA、IAA及IA-2测定在糖尿病诊断分型中的意义[J].中国实验诊断学，2005，9（3）：406-408.

[2] 武传龙，王宝燕，刘方达.GAD-Ab、ICA、IAA联合检测对糖尿病临床分型的鉴别意义[J].山东医药，2007，47（16）：91-92.

[3] 李翠，李丽.胰岛自身抗体测定对糖尿病分型的临床意义[J].现代中西医结合杂志，2013，22（1）：85-86.

[4] 杨秉潜.胰岛自身抗体检测在糖尿病分型诊断中的价值[J].检验医学与临床，2013，10（20）：2741-2742.

[5] 周淑杰，李辉，高申，等.胰岛素自身抗体的联合检测在糖尿病分型中的诊断意义[J].中国实验诊断学，2013，17（1）：146-147.

（收稿日期：2018-01-19）