含多西他赛的新辅助化疗方案对乳腺癌患者Ki-67表达的影响及疗效分析

宋小颖

（濮阳市人民医院普通外科，河南 濮阳 457000）

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤，与年龄、内分泌、膳食、遗传等因素有关，临床治疗常采用以手术为主，辅助放化疗、激素等综合治疗的方法，可达到根治的效果。Ki-67是一种增殖细胞相关的核抗原，与有丝分裂有关，在细胞的增殖过程中发挥重要的作用，检测结果阳性提示细胞增殖活跃[1-2]。目前证实Ki-67参与多种恶性肿瘤的发生与发展，尤其是乳腺癌，临床可通过检测Ki-67了解恶性肿瘤细胞的增殖活性[3]。新辅助化疗是指在实施局部治疗前先进行全身化疗，缩小肿块、杀灭看不见的转移癌细胞，为手术、放疗等做准备。新辅助化疗提高了手术治疗的可能性。有学者报道某些癌症患者在手术前先给予新辅助化疗能提高治疗效果，减轻伴随的症状，同时减轻精神与心理上的不适，改善预后。多西他赛属于紫杉类化合物抗肿瘤药，多用于乳腺癌等恶性肿瘤的治疗。本研究通过对乳腺癌患者实施含有多西他赛的新辅助化疗方案，探讨临床疗效以及对Ki-67表达的影响。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2011年1月—2014年5月我院收治的76例乳腺癌患者的临床资料进行回顾性分析。纳入标准：经病理学检查确诊为乳腺癌，临床TNM分期为Ⅱ～Ⅲ期，肿块大小可被测量，无远处转移，未合并血液系统疾病；患者及家属对治疗方案知情，并签署知情同意书。排除标准：合并其他系统严重疾病者，对所使用药物难以耐受或者过敏者，肝功能严重损害者。根据化疗方案的不同分为两组，A组36例，B组40例。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。见表1。本研究经过医院医学伦理委员会批准。

表1 两组一般资料比较

1.2 化疗方法

A组采用环磷酰胺、表柔比星以及氟尿嘧啶进行化疗，环磷酰胺（浙江海正药业股份有限公司，国药准字：H20084627）600 mg/m2，d1，表柔比星[辉瑞制药(无锡)有限公司，国药准字:H20000496]75 mg/m2，d1，氟尿嘧啶（南通精华制药股份有限公司，国药准字:H32022246）500 mg/m2，d1，静脉滴注。B组采用多西他赛、表柔比星联合环磷酰胺进行化疗，其中多西他赛（上海创诺制药有限公司，国药准字：H2103540）75 mg/m2，d1，表柔比星 60 mg/m2，d1，环磷酰胺500 mg/m2，d1，静脉滴注。3周为1个疗程，每个疗程给药1次。两组均治疗3～4个疗程，疗程结束后3周进行手术治疗。两组每次化疗前均口服格拉司琼，以预防胃肠道不良反应。

1.3 Ki-67检测方法

化疗前、化疗后3周采用Western blotting方法检测Ki-67蛋白表达量。取仰卧位，患侧乳房常规消毒，采用巴德全自动活检穿刺针活检，切取长条形标本3～5条，提取组织蛋白，电泳，转磨，封闭，一抗孵育，洗膜，二抗孵育，显色，以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）为内参照，分析蛋白条带，以目的蛋白条带灰度值/内参条带灰度值作为相对表达量。

1.4 观察指标及评价标准

①比较两组近期疗效，疗效评价标准：完全缓解：所有目标病灶消失，任何病理性淋巴结的短轴值＜10 mm；部分缓解：肿块体积较治疗前缩小＞50 %；稳定：肿块体积较治疗前缩小＜50 %或者增大＜25 %；进展：肿块体积增大≥25 %。

②化疗后两组择期行手术治疗，根据化疗结果选择保留乳房手术方式或改良根治术治疗，比较两组保留乳房率。③比较两组化疗毒副反应发生率[4]，包括白细胞下降、血小板下降、胃肠道反应、口腔粘膜反应、肝功能损害、心脏毒性等。④随访3年，比较两组1、2、3年累积生存率。

1.5 统计学方法

采用SPSS17.0统计学软件分析数据，计数资料以百分数（%）表示，采用χ2检验，计量资料以“±s”表示，采用t检验，等级资料采用秩和检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组近期疗效比较

A组有效率为83.3%，B组为87.5%，两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；两组病理完全缓解率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；两组不同缓解程度分布情况比较，差异有统计学意义（P＜0.01）。见表2。

表2 两组近期疗效比较

2.2 两组乳房保留率比较

A组保留乳房4例，行改良根治术治疗32例，乳房保留率为11.1 %；B组保留乳房5例，行改良根治术治疗35例，乳房保留率为12.5 %。两组乳房保留率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

2.3 两组Ki-67表达水平比较

两组化疗后Ki-67表达水平较化疗前显著下降，且B组低于A组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

2.4 两组化疗毒副反应发生率比较

两组毒副反应发生率比较差异无统计学意义（P＞0.05）。见表 4。

表3 化疗前后两组Ki-67表达水平比较

2.5 两组1、2、3年累积生存率比较

两组1年生存率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；B组2年、3年累积生存率分别为85.0 %与65.0 %，分别高于A组的61.1 %和38.9 %，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表5。

表4 两组化疗毒副反应发生率比较

表5 两组1、2、3年累积生存率比较

3 讨论

Ki-67在多种肿瘤细胞中都有表达，临床上常用于评价细胞的增殖活跃情况，指导诊断及判断疗效[5]。Ki-67与拓扑异构酶2具有显著正相关性，在肺癌、乳腺癌中均有阳性表达，参与肿瘤细胞的增殖。有研究显示，Ki-67参与了肿瘤的侵袭及转移过程，在侵袭性肿瘤中的表达显著高于非侵袭性肿瘤[6]。Ki-67与凋亡关系复杂，既能提高肿瘤细胞的凋亡，也可抑制肿瘤细胞的凋亡。有研究显示，Ki-67高表达的乳腺癌经过新辅助化疗后近期疗效更好[7]。同时Ki-67表达强度与放射敏感性具有相关性，随着其表达的增加，放射敏感性也呈增高趋势。提示在肿瘤的放疗、化疗过程中，Ki-67发挥着重要的作用，可以指导放、化疗。

新辅助化疗是指对非转移性的肿瘤在局部治疗前进行的全身性的、系统性的细胞毒性药物治疗，又称为术前化疗、首次化疗、诱导化疗。新辅助化疗最初用于局部晚期乳腺癌与炎性乳腺癌，随后扩展到对较大肿瘤的可手术的乳腺癌[8]。目前，新辅助化疗已成为局部晚期乳腺癌的标准治疗方案之一。乳腺癌不仅是一个局部的病症，更是一个全身性疾病。有些早期乳腺癌病症已经伴有远处或者全身转移灶。临床上确诊的患者有5%～15%的远处转移，当肿瘤直径为2～3 cm时，具有腋窝淋巴肿大潜在的危险性＞60%，而远处转移的危险性超过50%。原发乳腺癌转移灶可在几个月甚至几年内不被发现，有资料显示当肿瘤的增殖与凋亡的速度处于平衡时，转移灶就处于休眠状态。这是新辅助化疗方法应用的依据。另外，新辅助化疗能抑制乳腺癌细胞的增殖，诱导癌细胞凋亡，使癌细胞凋亡与增殖的比率上升，降低肿瘤分期，利于手术切除。其优点是：提供尽可能早的系统性治疗，更有效的治疗肿瘤远处微转移灶，降解原发病灶及区域淋巴结，使原本不能手术的肿瘤得以进行根治手术，原本不能保乳的肿瘤得以行保乳根治术；提供宝贵的体内肿瘤化疗敏感性的信息，为术后辅助化疗方案选择提供依据；抑制术中肿瘤细胞的转移活性与术后转移肿瘤细胞的快速增长；使细胞毒性药物通过完整的肿瘤血管到达肿瘤的内部，避免手术后肿瘤血管床破坏而降低肿瘤组织中化疗药物浓度，从而提高化疗效果；预测乳腺癌的长期生存率，为乳腺癌提供新的有效的预后指标。本研究中，两组均给予新辅助化疗，结果两组有效率均超过了80%，Ki-67水平较化疗前均显著下降，并且有超过10%的患者行保留乳腺手术。

多西他赛为紫杉醇类药物，可与游离的微管蛋白结合，促进小管聚合成微管，同时可通过防止去多聚化过程使微管稳定，抑制其聚解，减少小管的数量，并可破坏微管网状结构，从而抑制癌细胞的有丝分裂[9-10]。多西他赛在细胞内的浓度高，存留时间长，对微管蛋白亲和力高，抗肿瘤作用强[11]。欧盟与美国食品药品管理局（FDA）批准多西他赛可用于乳腺癌的一线治疗。在本研究中B组采用含有多西他赛的新辅助化疗方案治疗，结果显示，与A组比较，B组完全缓解例数显著提高，Ki-67表达水平显著下降。远期疗效比较，B组2年、3年累积生存率显著高于A组，说明含有多西他赛的新辅助化疗法能有效降低乳腺癌细胞的增殖活性，缩小肿块体积，显著提高远期疗效。另外，两组化疗毒副反应发生率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。说明含有多西他赛的新辅助化疗法的安全性较好。

综上所述，含有多西他赛的新辅助化疗方案能显著降低乳腺癌组织Ki-67的表达水平，提高远期疗效。