强直性脊柱炎患者血清MMP-9、DKK-1水平与疾病活动度的关系*

焦阿金,何川疆,许爱敏

(新疆喀什地区第一人民医院检验科,新疆喀什 844000)

强直性脊柱炎(AS)是以中轴脊柱关节为主要病变部位，并累及脊椎关节、外周关节、骶髂关节及其邻近肌腱、韧带等部位的慢性系统性炎性疾病[1]。该病主要的病理特征为肌腱附着点炎和韧带骨赘形成，好发于20～30岁的青年，发病隐匿，早期仅表现为外周或腰骶部关节不适，往往被忽视，且易与其他脊柱或外周关节疾病相混淆，导致延误诊治，致使病情持续进展，甚至出现劳动力丧失，严重影响患者的生活质量，还给患者和社会带来巨大的经济压力[2]。最新的研究发现，基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Dickopff相关蛋白-1(DKK-1)在AS的疾病发生和发展中具有重要的作用，但对于两者与AS疾病活动度的关系尚不清楚[3]。本研究对本院接诊的145例AS患者进行了研究，旨在探讨MMP-9、DKK-1与该病疾病活动度的关系。

1 资料与方法

1.1一般资料 将2015年1月至2017年1月本院风湿免疫科接诊的145例AS患者纳入AS组，纳入标准：(1)符合AS的诊断标准[4]；(2)年龄20～70岁；(3)病程超过半年；(4)经本院医学伦理委员会批准；(5)签署知情同意书。排除标准：(1)合并累及关节或脊柱的其他疾病；(2)合并自身免疫性疾病；(3)既往有恶性肿瘤史；(4)哺乳期或妊娠期妇女；(5)合并甲状腺等内分泌系统疾病；(6)合并感染性疾病；(7)合并严重心、肝、肺等重要脏器疾病。其中男性127例，女性18例；平均年龄(37.26±4.85)岁；平均病程(4.15±1.03)年；平均体质量指数(BMI)(25.78±4.07)kg/m2。另选择同期性别、年龄、BMI相匹配的62例体检健康者为对照组，年龄21～69岁，平均(37.08±4.81)岁；男性51例，女性11例；平均BMI(25.35±4.02)kg/m2；经体检确认各项常规检查结果均正常，排除风湿性疾病、感染性疾病、感染性疾病及明显器质性疾病者。

1.2方法 根据AS疾病活动指数(BASDAI)评分，将145例AS患者进一步分为非活动期组(BASDAI评分<4分)48例，活动期组(BASDAI评分≥4分)97例。所有患者均给予24周的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)拮抗剂益赛普(上海中信国健药业股份有限公司，国药准字S20050059，25 mg/瓶)25 mg/次，2次/周。用非抗凝管采集对照组和AS组治疗前后的外周静脉血4 mL，静置后35 r/min离心15 min，取上清液，存于-80 ℃冰箱待测。

1.3观察指标 (1)生物学指标：采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清C反应蛋白(CRP)、MMP-9、DKK-1水平，试剂盒均购于美国R&D公司，严格按照说明书步骤进行操作；采用普朗PUC-2068全自动动态血沉仪测定红细胞沉降率(ESR)；比较AS组治疗前与对照组各临床指标，比较活动期组与非活动期组血清MMP-9、DKK-1水平，比较AS组治疗前后血清MMP-9、DKK-1水平。(2)疾病活动度：采用BASDAI、AS功能指数(BASFI)、AS病情活动度评分(ASDAS)观察AS组治疗前后的疾病活动度，采用修改后的AS脊柱评分(mSASSS)评估AS组治疗前后病情改善情况，由颈椎和腰椎评分共同组成，总分0～72分，评分越高表示脊柱损伤越严重[5]。(3)相关性分析：采用Pearson相关系数分析MMP-9、DKK-1与BASDAI、BASFI、ASDAS评分间的关系。

2 结 果

2.1AS组与对照组各临床指标比较 AS组ESR和血清CRP、MMP-9水平均高于对照组，血清DKK-1水平低于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 AS组与对照组各临床指标比较

2.2活动期组与非活动期组血清DKK-1、MMP-9水平比较 活动期组血清DKK-1低于非活动期组，血清MMP-9水平高于非活动期组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3AS组治疗前后各指标比较 AS患者治疗后血清DKK-1、mSASSS评分均无明显变化(P>0.05)，MMP-9和BASDAI、BASFI、ASDAS评分均明显下降，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表2 活动期组与非活动期组血清DKK-1、MMP-9水平比较

表3 AS组治疗前后各指标比较

2.4DKK-1、MMP-9与AS疾病活动度的相关性分析 相关性分析显示，DKK-1与BASDAI、BASFI、ASDAS评分无明显相关性(P>0.05)；MMP-9与BASFI评分不相关(P>0.05)，与BASDAI、ASDAS评分呈正相关(P<0.05)。见表4。

表4 DKK-1、MMP-9与AS疾病活动度的相关性分析

3 讨 论

目前，AS的临床诊断主要依赖骶髂关节X线检查和患者临床表现，但AS发病早期不易察觉，部分患者临床表现较轻微，如低热、消瘦、轻度贫血、乏力等，X线检查也无明确的骶髂关节炎表现，极易被忽视，延误病情，关节炎性反应后出现纤维化和钙化，形成骨赘，脊椎的柔软度进行性下降，严重者甚至出现竹节状脊柱，伸展或弯曲困难[6]。过往AS疾病活动度的预测主要以BASDAI为主，但BASDAI主观性较强，常用的生物学指标(ESR、CRP)虽能在一定程度上反映AS的疾病进展，但灵敏度和特异度均较低，因此，临床工作中，寻找能准确预测AS疾病进展和疾病活动度的生物标记物已迫在眉睫[7]。本研究对本院接诊的145例AS患者进行了研究，发现AS患者血清DKK-1呈低表达，MMP-9呈高表达。

Wnt信号通路在骨平衡和成骨细胞分化过程中极为关键，β-catenin能正向调节Wnt信号通路，增加骨密度，而DKK-1是Wnt信号通路的抑制因子，能拮抗β-catenin的的稳定表达，降低骨密度，抑制骨形成[8]。刘亚等[9]研究表明，DKK-1能明显抑制骨细胞的存活，对于关节炎大鼠，阻断DKK-1能显著降低骨细胞数量，减少骨吸收，下调骶髂关节融合。本研究中，AS组ESR、CRP水平明显高于对照组，说明AS患者体内存在明显的炎性反应，而AS组血清DKK-1明显低于对照组，提示DKK-1在AS疾病进展中发挥重要作用。

AS的病理改变如滑膜炎、附着点炎，其实是细胞外基质(ECM)被蛋白水解酶不断消化的过程，MMPs是细胞生长、迁移和ECM重塑的调节剂，在ECM的降解和重塑中具有重要作用，与AS的炎症和骨质破坏病理过程关系密切[10]。MMP-9是MMPs家族中以酶原形式分泌的一员，主要由中性粒细胞、巨噬细胞、结缔组织细胞、小胶质细胞和部分肿瘤细胞分泌，可破坏ECM中的Ⅳ、Ⅴ、Ⅸ、Ⅺ型胶原蛋白，破坏细胞屏障的完整性，增加血管通透性，激发炎性反应，在关节炎、血管形成等多种病理过程中呈高表达[11]。本研究结果显示，AS组血清MMP-9明显高于对照组，提示MMP-9在AS的发生、发展中发挥重要作用。经TNF-α拮抗剂治疗24周后，AS组患者血清DKK-1、mSASSS评分无明显变化，MMP-9和BASDAI、BASFI、ASDAS评分均明显下降，提示TNF-α拮抗剂可能缓解病情，降低疾病活动度，但对AS骨化进程无明显阻止作用。相关性分析显示，DKK-1与BASDAI、BASFI、ASDAS评分无明显相关性；MMP-9与BASFI评分不相关(P>0.05)，与BASDAI、ASDAS评分呈正相关；进一步说明MMP-9与AS疾病活动度有着良好的相关性，对疾病的好转起预示作用。

4 结 论

综上所述，AS患者血清DKK-1呈低表达，MMP-9呈高表达，TNF-α拮抗剂能明显下调MMP-9水平，对DKK-1无明显影响，MMP-9可反映AS的疾病活动度，DKK-1与疾病活动度无明显相关，但DKK-1能在一定程度上反映AS的骨化进程。