干扰素-γ和白细胞介素-22联合检测在原发性免疫性血小板减少性紫癜中的临床意义

田勇 高鹏 韩梅 王雪野 肖中平 陈晶 弓长丽 封韬 李凌君 王雪梅 孔令环 王新梅 付堃

(1长春中医药大学，吉林 长春 1301172;2吉林省人民医院)

原发性免疫性血小板减少性紫癜(ITP)是一种由多种机制共同参与的自身免疫介导的血小板减少综合征，其发病机制尚未清楚，是临床上最为常见的自身免疫出血性疾病。多数学者认为 ITP是由于体液免疫机制发生异常，而出现血小板表面特异性抗体，从而使血小板在降解过程中暴露隐匿性表位，隐匿性表位的 T细胞被抗原提呈细胞所识别产生了血小板抗体，引起 ITP患者血小板破坏〔1〕。研究发现〔2〕，有些患者体内虽然存在血小板自身抗体，但疾病仍可以缓解，而有些患者体内检测不到血小板自身抗体，进而表明 ITP的发病可能存在其他相关因素，细胞免疫在 ITP的发病中占主导地位。本文拟探讨干扰素(IFN)-γ和白细胞介素(IL)-22在 ITP中的表达及临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 吉林省人民医院2017年12月至2019年6月诊疗的 ITP患者30例为观察组，男11例，女19例，年龄54～74岁，中位年龄为(58.34±14.25)岁，其中达到完全反应(CR)标准28例，有效(R)标准2例，均符合血液病诊断及疗效标准〔3〕。该院体检健康者20例为对照组，男11例，女9例，年龄55～72岁，中位年龄为(58.43±13.78)岁，两组年龄、性别构成差异均无统计学意义(P>0.05)。均签署知情同意书。

1.2 标本采集 分别抽取对照组及观察组治疗前后的肘静脉血4 ml，采用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，3 000 r/min离心20 min后，分离其血浆，分装后保存在-20℃冰箱准备测量。

1.3 检测方法 分别检测治疗前后血浆中IFN-γ和IL-22水平，选用依科赛酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(批号：211099)，按照试剂盒的说明书进行操作，将标本及试剂盒常温放置达室温，标准品稀释，配置生物素化抗体的工作液及酶结合物工作液。进行加样、孵育、洗板，加入 IFN-γ和 IL-22抗体，洗板、避光孵育15 min显色，加终止液终止反应，上酶标仪读板，最后选用450 nm波长读数，实验重复3次。

1.4 统计学处理 采用 SPSS17.0统计软件，符合正态分布的均数间比较采用单因素方差分析；不符合正态分布的均数间比较采用非参数检验。

2 结 果

观察组治疗前、后血浆中IFN-γ浓度、IL-22浓度明显高于对照组(P<0.001、P<0.05)。观察组治疗前、后血浆中IFN-γ、IL-22浓度差异有统计学意义(P<0.05)；见表1。

表1 两组治疗前后血浆IFN-γ和IL-22水平比较

3 讨 论

ITP是由于血小板过多破坏而发生的自身免疫性出血性疾病〔4〕。临床上关于ITP的诊断缺乏特异性标志，并且 ITP发病机制至今尚未清楚，最近研究表明，ITP发病可能与细胞免疫相关，并且众多细胞因子参与ITP发病〔5〕。IFN-γ属于IL-1家族中的成员，是近几年发现的一种固有炎症、免疫应答的抑制剂〔6〕。研究〔7〕表明，保持Th1/Th2细胞的平衡在自身免疫性疾病的发生发展过程中是至关重要的因素。Th细胞的分化失衡是导致ITP患者免疫功能紊乱的主要因素。 根据Th分泌细胞因子的不同分为Th1和Th2。IFN-γ主要由Th1细胞分泌，IL-4主要由Th2细胞分泌。IFN-γ可以通过抑制Th2类细胞因子的产生，进而促进Th1类细胞因子的产生。本研究结果提示，ITP患者存在Th1细胞免疫功能的紊乱，表明IFN-γ可能参与ITP发病，这一结论与之前的结果基本相同〔8〕。 IL-22最早是用 IL-9刺激一株 T淋巴瘤细胞系所发现〔9〕，主要由Th1、Th17、Th22细胞分泌，且CD8+T细胞、自然杀伤(NK)22细胞及内生淋巴细胞也可以分泌IL-22。 Wolk等〔10〕研究表明，克隆恩病患者血浆中 IL-22水平高于健康对照组，与疾病的严重程度呈正相关，从而表明了 IL-22可能参与克隆恩病的发病过程。相反，有学者证实，银屑病患者血清中IL-22水平显著低于正常人〔11〕。所以IL-22可能参与了自身免疫性疾病的发生发展，并且起着致病性或保护性的作用。本研究结果与以往的研究结果基本一致〔12～14〕。IL-22与IFN-γ在ITP的发生发展中可能发挥着协同致病作用，两种因子可能共同参与ITP发病。

综上，ITP作为一种自身免疫性疾病，存在着多种细胞因子的异常，临床上联合检测 ITP患者血浆中 IFN-γ和 IL-22细胞因子水平，对于判断其病情的变化、治疗效果及其预后都具有重要的临床意义。