老年重症肺炎与sICAM-1、IL-1R1、CD40L及TBX21基因多态性的相关性

沈红卫 麻建平

(建德市第一人民医院呼吸内科，浙江 建德 311600)

重症肺炎是呼吸系统常见的一种危重症，其发病率呈逐年上升趋势，常累及器官，具有进展快、死亡率高及病情危重等特点，且常见于老年人〔1,2〕。因此，针对老年重症肺炎患者，采取及时有效的诊断和治疗方法尤为重要〔3,4〕。现阶段对于重症肺炎发病机制尚未完全阐明，多数认为炎症反应是促进重症肺炎病情进展的重要因素，可溶性细胞间黏附分子(sICAM)-1、白细胞介素-1受体1型(IL-1R1)、肿瘤坏死因子相关激活蛋白(CD40L)等作为炎症指标，可反映或评估体内炎症反应程度，从而评估感染性病情的严重程度〔5〕。重症肺炎发病免疫学机制中最重要为Th1/Th2平衡失调，而其中发现在调节Th1和Th2细胞分化的反馈机制中TBX21基因处于重要地位〔6〕。本研究探讨老年重症肺炎与sICAM-1、IL-1R1、CD40L及TBX21基因多态性的相关性，为临床诊断和治疗老年重症肺炎提供参考。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择建德市第一人民医院2016年12月至2017年12月老年重症肺炎患者120例纳入观察组，符合《中国成人获得性肺炎诊断和治疗指南(2016年版)》〔7〕中相关诊断标准。纳入标准：①年龄65～85岁，符合重症肺炎诊断标准；②得知情同意。排除标准：①既往有肝纤维化、肺结核者；②既往有恶性肿瘤、血液疾病者；③精神疾病者；④合并肝肾严重异常者。观察组男68例，女52例；年龄65～79〔平均(72.34±5.41)〕岁。另选择同期老年普通肺炎患者113例纳入对照组，男62例，女51例；年龄65～78〔平均(71.63±4.98)〕岁。两组一般资料比较无明显差异(P>0.05)。

1.2方法

1.2.1肺功能检测 第1秒最大呼吸容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)及最高呼气流速(PEF)采用肺功能仪(捷斯特)测定。

1.2.2血清sICAM-1、IL-1R1和CD40L水平检测 所有患者入院24 h内抽取外周静脉血3 ml，分离血清，离心半径15 cm，离心10 min，分离血清，置于-20℃下保存待测。采用酶联免疫吸附试验测定sICAM-1、IL-1R1和CD40L表达，人sICAM-1试剂盒、人IL-1R1试剂盒、人CD40L试剂盒来源于南京森贝伽生物科技有限公司。

1.2.3TBX21基因多态性检测 所有患者入院24 h内抽取外周静脉血3 ml，采用EDTA2-Na抗凝，白细胞基因组DNA提取严格根据全血DNA提取试剂盒说明书标准进行操作，置于-20℃下保存待测。根据Genbank数据库提供的全序列，采用引物设计软件对各位点所需PCR引物及相应的内切酶进行设计。针对选择TBX21的s16947078位点，严格根据目标序列片段，rs16947078多态性位点基因分型利用MassARRAY SNP分型技术检测。

1.3观察指标 ①比较两组肺功能变化；②比较两组血清sICAM-1、IL-1R1和CD40L水平变化；③比较两组TBX21基因位点rs16947078等位基因分布情况；④比较两组TBX21基因位点rs16947078基因频率分布。

1.4统计学方法 运用SPSS22.0统计学软件进行χ2及t检验。

2 结 果

2.1两组肺功能比较 观察组FEV1、FVC和PEF明显低于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 两组肺功能比较

2.2两组血清sICAM-1、IL-1R1和CD40L水平比较 观察组血清sICAM-1、IL-1R1和CD40L水平明显高于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 两组血清sICAM-1、IL-1R1和CD40L水平比较

2.3两组TBX21基因位点rs16947078等位基因分布比较 观察组TBX21基因位点rs16947078等位基因G分布明显高于对照组，而等位基因A分布明显低于对照组(P<0.05)。见表3。

表3 两组TBX21基因位点rs16947078等位基因分布比较〔n(%)〕

2.4两组TBX21基因位点rs16947078基因频率分布比较 观察组TBX21基因位点rs16947078基因型GG频率明显高于对照组而基因型AG频率明显低于对照组(P<0.05)；而两组TBX21基因位点rs16947078基因型AA比较无明显差异(P>0.05)。见表4。

表4 两组TBX21基因位点rs16947078基因频率分布比较〔n(%)〕

3 讨 论

重症肺炎是具有严重并发症或者重度症状的一种肺炎，若不采取及时有效的治疗重症肺炎方法，会威胁患者生命安全〔8～12〕。因此，采取及时有效的诊断和治疗重症肺炎方法尤为重要。重症感染性疾病的不断进展，不仅与炎症反应本身相关，并且与调控炎症反应进行的相关因子密切相关。免疫球蛋白超家族成员，主要分布在淋巴细胞、白细胞、血管内皮细胞及上皮细胞等表面，在自身免疫反应、炎症及哮喘等病理状态下，其表达增多，致使细胞间黏附分子(ICAM)-1水平上升。sICAM-1是细胞表面糖蛋白脱落后形成的溶解状态的一种黏附分子。在重症肺炎中的炎症应答过程从肺泡毛细血管游走到支气管、气管而发挥作用〔13〕。重症肺炎时，ICAM-1上升可能主要是由于嗜酸性粒细胞、肥大细胞、中性粒细胞、淋巴细胞等浸润及上皮细胞损伤，损伤的上皮细胞及这些炎症浸润细胞释放组胺、白三烯等大量细胞因子和炎症介质〔14〕。IL-1R1可通过诱导下游细胞炎症因子如IL-6、IL-10等表达，促进单核细胞、巨噬细胞等对肺泡上皮组织的浸润或损伤，从而促进病情的进展。IL-1R1在加剧细胞的不稳定性或者促进氧化应激损伤等方面发挥了重要作用。研究表明，IL-1R1可通过影响细胞膜上离子通道的开放，加剧炎症性损伤和肺泡组织缺血〔15〕。CD40L在免疫反应中发挥重要作用。近年来研究发现，CD40L在细菌性肺炎中呈高表达〔16，17〕。CD40L与CD40结合后能够激活体内抗原提呈细胞(APC)，进一步使炎症反应与T细胞得以激活。本研究表明，老年重症肺炎患者血清sICAM-1、IL-1R1及CD40L高表达。

研究发现TBX21与哮喘的易感性相关，其调控特异性转录因子T-bet可调控CD4+细胞的原始细胞Th的分化〔18〕。与此同时，T-bet蛋白表达下降能够反映机体对病毒感染反应性的下降，而其表达升高与炎症反应相关〔19〕。本研究表明，TBX21基因位点rs16947078等位基因G可能为重症肺炎易感基因。