免疫组化指标Her-2联合肿瘤标志物检测在胃癌诊断中的应用价值

李隆昌，王大鹏

郑州大学附属肿瘤医院，河南 郑州 450008

胃癌属于多发消化系统恶性肿瘤，治疗方法较多，包括手术、放疗、化疗等。但多数胃癌患者发病早期症状不典型，极易被患者与医生忽视，导致出现典型症状确诊时已处于中晚期，丧失最佳手术时机，需经放化疗治疗，总体效果不佳[1]。故临床采取积极措施，提升胃癌早期诊断准确性，指导治疗方案制定，改善预后，具有重要临床意义。目前认为，肿瘤标志物在胃癌诊断中发挥重要作用，可鉴别诊断肿瘤组织与正常组织，且能判断是否存在肿瘤[2]。但部分血清肿瘤标志物单独检测时灵敏度较低，影响胃癌早期诊断准确性。近年来，有学者开始关注特异性免疫组化指标在胃癌诊断中的应用，发现人表皮生长因子受体2(Her-2)与胃癌发生、发展有一定关系[3]。但临床就该问题研究尚不多。本研究重点分析了胃癌中血清肿瘤标志物与Her-2表达联合诊断价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料随机抽样法选取2018年3月至2019年3月本院58例胃癌患者为研究对象。纳入标准：①符合《胃癌规范化诊疗指南》[4]中原发性胃癌诊断标准；②经手术病理检查确诊，术前未行放疗、化疗、免疫治疗等；③临床资料完整。排除标准：①合并内分泌系统疾病、免疫系统疾病、血液系统疾病等可能对肿瘤标志物检测产生干扰的疾病；②未行Her-2、肿瘤标志物检测。本组患者中，男30例，女28例；年龄31～76岁，平均(55.48±8.17)岁；TNM分期：Ⅰ期14例，Ⅱ期23例，Ⅲ期17例，Ⅳ期4例；淋巴结转移：有36例，无22例。

1.2 方法

1.2.1 血清肿瘤标志物检测 术前，抽取6mL清晨空腹静脉血，1500r/min离心，持续15mnin，取上清液。以酶联免疫吸附法检测肿瘤标志物，包括癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CЕA)、糖链抗原125(carbohydrate antigen 125,CA125)、糖链抗原72-4(carbohydrate antigen 72-4,CA72-4)、糖链抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)，试剂盒均购自北京中杉生物技术有限公司。CЕA、CA125、C A72-4、C A19-9阳性标准分别为＞5n g/m L、＞35U/ mL、＞6.9U/mL、＞35U/mL。

1.2.2 Her-2表达检测 经胃镜取胃黏膜标本，以3.7%中性甲醛溶液固定。常规脱水，石蜡包埋，连续切片，厚度4μm。采用免疫组化法检测胃癌组织中Her-2表达，试剂盒购自北京中杉生物技术有限公司。经Max Vision两步法染色，加入DAB溶液显色，持续1～2min。苏木精衬染，脱水，透明、中性树胶封固。阴性对照采用PBS液代替一抗进行。依据细胞膜是否存在棕黄色颗粒样沉淀判断，以无染色或＜10%细胞存在细胞膜着色，为0；≥10%细胞存在轻微膜着色，为+；≥10%细胞的膜着色较弱，为++；≥10%细胞存在中到强度膜着色，为+++。低表达为(0)、(+)，即Her-2阴性；过度表达为(++)、(+++)，即Her-2阳性。

1.3 观察指标①比较血清肿瘤标志物、Her-2表达与临床病理特征关系；②比较CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9、Her-2单独与联合检测灵敏度。

1.4 统计学分析以SPSS20.0软件分析。本研究中计数资料以χ2检验。P＜0.05为差异显著。

2 结果

2.1 血清肿瘤标志物、Her-2表达与临床病理特征关系不同临床分期、淋巴结转移的胃癌患者CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9、Her-2表达阳性率差异有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 血清肿瘤标志物、Her-2表达与临床病理特征关系比较(例)

2.2 血清肿瘤标志物、Her-2诊断胃癌的灵敏度CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9、Her-2联合检测灵敏度高于各项单独检测(P＜0.05)，见表2。

3 讨论

现阶段，胃癌已发展成为严重威胁人们身心健康、生活质量的重要疾病之一，且病死率较高。目前认为，临床提升胃癌患者治疗效果、改善预后的关键为早期筛查、诊断。但传统胃镜检查较难满足临床分期评估要求；CT、MRI等影像学手段虽可提升临床分期评估准确率，但在诊断早期胃癌中存在一定局限。研究发现肿瘤发生、发展中肿瘤标志物发挥重要作用，且可进行诊断鉴别，常见的有CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9等[5]。其中，CЕA为含较多糖类的蛋白质。但早期胃癌诊断中单纯CЕA检测应用受限，灵敏度较低，仅为22%[6]。本次研究中，CЕA检测灵敏度为22.41%，与此相符。此外，Ⅲ～Ⅳ期、有淋巴结转移患者CЕA阳性率更高，推测CЕA表达与胃癌患者临床分期、淋巴结转移有一定相关性，分析CЕA可促使细胞排列出现错乱，导致癌细胞位置改变，而一旦癌细胞脱落，可能引发浸润转移。CA125是自上皮性卵巢癌抗原中检测出来的一种糖蛋白，可被单克隆抗体OC125结合。研究发现，胃癌中约90%患者血清CA125与病程发展、转移有一定相关性[7]。CA72-4属于高分子黏蛋白，在人胚胎组织、部分恶性肿瘤组织中存在高表达，但在正常分化组织中表达较低。CA19-9属于糖类肿瘤标志物，在肝、胃、胰等细胞中广泛分布，早期可用于筛查、诊断胰腺癌。本次研究发现，CA125、CA72-4、CA19-9对胃癌诊断灵敏度分别为10.34%、20.69%、12.07%，且不同临床分期、淋巴结转移患者CA125、CA72-4、CA19-9阳性率存在差异，故推测这些指标也在胃癌诊断中有一定的价值。

表2 血清肿瘤标志物、Her-2诊断胃癌的灵敏度分析(%)

此外，研究发现，胃癌血管形成、侵袭及转移过程中，Her/erbB家族信号通路也发挥重要作用，影响肿瘤细胞增殖分化、迁移、黏附等过程[8]。而Her-2是Her/erbB家族重要成员之一，在正常成年人组织中表达较低，而一旦机体处于病理状态，Her-2可出现过表达，抑制肿瘤细胞凋亡，且能促进肿瘤心血管再生，促使肿瘤细胞侵袭力增加[9]。研究证实，胃癌患者中，相较于非癌组织，癌组织存在Her-2基因扩增、蛋白质过表达现象[10]。本研究中，Her-2表达灵敏度为58.62%，且不同临床分期、淋巴结转移患者Her-2表达阳性率存在差异。故推测Her-2与血清肿瘤标志物异常升高在胃癌早期辅助诊断中发挥重要作用，有利于评估临床分期，判断淋巴结转移及预后。此外，本研究还发现，CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9、Her-2联合检测灵敏度高达91.38%，明显优于各项单独检测，这说明Her-2、血清肿瘤标志物联合检测可提升胃癌早期诊断灵敏度，在诊断中应用价值更高。

综上所述，Her-2、血清肿瘤标志物(CЕA、CA125、CA72-4、CA19-9)联合检测可提升胃癌早期诊断灵敏度。