HPLC法测定10种蓝莓中维生素C的含量

杨 伟，曹跃文，史彦会，常福兰

（日照市农产品质量安全检验检测中心，山东日照 276800）

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

草酸：分析纯；维生素C标准对照品：含量99.7%；甲醇：HPLC纯；蓝莓：为山东省日照市引进的10个蓝莓品种，德雷珀、利波特采自稼沃生态有限公司，奥尼尔、莱克西、公爵、卡拉采自莓美哒有限公司，蓝丰、蓝金采自博园农业开发有限公司，明星、绿宝石采自金莓有限公司。各品种果实均于2021年7月采摘，置于4 ℃聚乙烯保鲜盒（11 cm×11 cm×4 cm）带回实验室用于实验指标 测定[1-4]。

1.2 仪器与设备

Agilent 1260Ⅱ高效液相色谱仪（配有DAD检测器）；Agilent Eclipse Plus C18色谱柱；ME3002梅特勒电子天平。

1.3 实验方法

1.3.1 样品处理

将蓝莓放置于组织匀浆机中匀浆，称取5 g左右的蓝莓样品于25 mL的容量瓶中，用0.1%的草酸定容，混匀，分析前用0.45 μm的滤膜过滤，HPLC法测定[5]。

1.3.2 维生素C标准溶液的制备

准确称取维生素C标准对照品50.15 mg于小烧杯中，用0.1%的草酸溶解，转移至50 mL的棕色容量瓶中，用0.1%的草酸稀释至刻度，得到维生素C含量为1 000 μg/mL的标准溶液。

1.3.3 色谱条件

流动相0.1%的草酸-甲醇（95∶5），流速为 1.0 mL/min；检测波长为254 nm，进样量为10 μL，柱温箱温度30 ℃。

2 结果与分析

2.1 标准工作曲线的绘制

用0.1%的草酸溶液配制不同浓度维生素C标准溶液，测定的标准工作曲线见图1说明线性关系较好，分析过程中受样品中其他杂质的影响较少。

图1 维生素C标准工作曲线

2.2 回收率实验

在一组容量瓶中，分别加入等量蓝莓样品，然后分别加入不同量的维生素C标准溶液，同时做样品空白，测定样品中维生素含量及回收率，实验结果见表1。从表1可知，方法采用0.1%的草酸-甲醇（95∶5）为流动相测定蓝莓中的维生素C含量，加标回收率为97.76%～102.75%，说明方法准确性高、操作简便、实用。

表1 回收率实验结果

2.3 精密度实验

同一蓝莓样品在同一实验条件下测定6次，计算精密度，实验结果见表2。从表2可以看出，通过对精密度的考察，相对标准偏差RSD为0.39%，说明该方法具有较高的再现性和重复性，方法稳定、可靠。

表2 精密度实验结果

2.4 10种蓝莓维生素C含量

每个实验重复3次，并计算平均值，结果以平均值表示，如表3所示。从表3可以看出，10种蓝莓维生素C含量从高到低依次为公爵＞蓝丰＞德雷珀＞莱克西＞绿宝石＞蓝金＞奥尼尔＞卡拉＞明星＞利波特。

表3 10种蓝莓维生素C含量测定结果

3 结论

通过对流动相及样品溶剂、检测波长的选择，建立了一种测定蓝莓中维生素C含量的高效液相色谱方法，该方法测定蓝莓中的维生素C含量相对可靠，还具有选择性好、灵敏度高、操作简单等优点。本研究利用该方法测定了日照地区10种蓝莓中的维生素C含量，其中公爵维生素C含量最高，利波特维生素C含量最低，为进一步了解日照地区蓝莓中营养成分、进一步开发利用提供科学依据。