颈动脉超声联合CT和血清miR-124、miR-155对颈动脉狭窄患者继发性脑梗的风险预测价值

王适达， 王海虹， 张立娜

保定市第二中心医院， 河北 保定 072750

脑血管病是严重威胁中老年健康的疾病之一，颈动脉狭窄和动脉粥样硬化是脑血管病的主要危险因素[1]。颈动脉狭窄是一种常见的动脉粥样硬化性疾病，常见于中老年人，它是由颈动脉粥样硬化、纤维肌肉发育不良、血液病和血管硬化引起的[2]。颈动脉狭窄可能会引起脑部缺血，其主要症状为眩晕、黑蒙、视物不清、头疼、失眠、头晕等[3]。有眼缺血表现为视力丧失、偏盲，患者会感到头晕、不清醒、反应迟钝，有麻木感和肿胀感，严重时有针刺感。约30%～60%的脑梗死患者是由颈动脉狭窄引起的[4]。颈动脉不稳定斑块破裂或狭窄部位形成局部血栓，可导致远端动脉栓塞，从而引起脑梗死，可累及泌尿、血液循环、语言系统等,严重者可引起致命性疾病[5]。本文旨在研究CT、超声检查、miR-124、miR-155对颈动脉狭窄的诊断价值及相关影像学特征。

1 资料与方法

1.1 研究对象

选取2018年3月～2019年3月在我院就诊的颈动脉狭窄患者43例为颈动脉狭窄组：男27例、女16例；年龄47～62岁，平均(51.78±7.12)岁。选取同期在我院体检正常的志愿者43例作为正常组：男23例、女20例；年龄45～58岁，平均(48.93±6.17)岁。上述两组患者年龄比较，无统计学差异(P>0.05)，有可比性。

本研究经我院伦理委员会批准，患者和家属均知情且签署知情同意书。纳入标准：所有患者均符合《颈动脉狭窄诊治指南》[6]诊断标准。排除标准：合并严重感染者，合并其他内科疾病或恶性肿瘤者；代谢严重紊乱者；患精神疾病无法正常交流者。

1.2 方法

RT-PCR法检测miR-124、miR-155：采集两组患者治疗前、治疗后1d外周静脉血3 mL，分离出单个核细胞，提取单个核细胞总RNA,采用Trizol法，检测RNA含量、纯度，使用Takara逆转录试剂盒行逆转录处理后得到cDNA，设计引物序列采用Primer 5.0软件，PCR反应条件:预变性94 ℃ 4 min，变性94 ℃ 1 min，60 ℃退火30 s，72 ℃延伸1 min，72℃ 10 min，30个循环。扩增产物在1.5%琼脂糖凝胶上电泳30 min,拍照分析光密度值,计算mRNA相对表达量。记录血清微小RNA-124(miR-124)、微小RNA-155(miR-155)进行对比分析。

CT检查：采用64排螺旋CT(美国CE公司)检查颈部血管。首先按照常规的颈部横断面，从主动脉弓平面扫描至颅底平面范围，将平扫序列复制。使用专业的血管成像软件，设置阀值为100 HU,采用高压注射器以5 mL/s的速率注入50 mL非离子型370 mgI/mL对比剂碘帕醇，生理盐水注射50 mL，待阀值测定区造影剂达到阀值的浓度即可加强扫描，最后得到颈动脉CT检查的原始图像，利用专门的重建技术重建血管，进行图像分析。

颈动脉超声检查：使用飞利浦IE33超声诊断仪,频率为7 MHz左右，患者仰卧位，头偏向另一侧检查,将颈部完全暴露出来,横向移动探头从颈根部向头部侧面进行，然后从颈部前部纵向检测。根据测量的表面、内部特征，以及颈动脉狭窄和阻塞的部位等来判断颈动脉直径、分析颈动脉狭窄情况。

诊断价值：敏感性=真阳性/(真阳性+假阴性)×100%。特异性=真阴性/(真阴性+假阳性)×100%。准确性=(真阳性+真阴性)/总例数×100%。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 颈动脉狭窄组与正常组miR-124、miR-155表达比较

如表1所示，与正常组相比，颈动脉狭窄组miR-124、miR-155表达明显升高，具有统计学差异(P<0.05)。

表1 两组miR-124、miR-155表达比较

2.2 超声、CT对颈动脉狭窄分级的诊断准确率比较

如表2所示，与单独超声、CT检查相比，超声联合CT检查对颈动脉狭窄分级的诊断准确率较高(P<0.05)；CT、超声检查对颈动脉狭窄分级的诊断准确率无统计学差异(P>0.05)。

表2 超声、CT对颈动脉狭窄分级的诊断准确率比较

2.3 超声、CT对颈动脉狭窄的诊断价值比较

如表3所示，与超声、CT检查相比，超声检查联合CT检查对颈动脉狭窄的诊断价值较高，具有统计学差异(P<0.05)。

表3 超声、CT对颈动脉狭窄的诊断价值比较(%)

2.4 miR-124、miR-155、CT、超声检查对颈动脉狭窄患者继发性脑梗的风险程度预测价值

ROC曲线分析显示，四项联合AUC为0.888,诊断价值较高(P<0.05)。如表4、图1所示。

表4 miR-124、miR-155、CT、超声检查对颈动脉狭窄患者继发性脑梗的风险程度预测价值

图1 miR-124、miR-155、CT、超声检查对颈动脉狭窄患者继发性脑梗的风险程度预测价值ROC曲线

2.5 影像学特征分析

典型病例影像图见图2、图3。如图2所示，46岁男性患者，多排螺旋CT检查表现为右侧颈内动脉起始部见钙化及软斑块，狭窄约80%。左侧颈总动脉中段见条形软斑块，狭窄约25%，颈内动脉起始部见混合斑块，狭窄约90%。左侧椎动脉起始部见软斑块，重度狭窄。如图3所示，男性患者年龄48岁，颈动脉超声检查的表现：左侧颈内动脉斑块形成(A)和左侧颈内动脉狭窄(B)，脂质性软斑表现为低回声，钙化性硬斑块表现为强回声伴声影，混合型斑块表现为回声强弱不等的溃疡性。

图2 颈动脉狭窄患者CT图

图3 颈动脉狭窄患者颈动脉超声图

3 讨论

血管系统是人体重要的管道系统,分为动脉系统和静脉系统,动脉系统相当于供水管道,静脉系统是供水系统的下水管。动脉是从心脏流出到全身器官和组织的[7]，静脉来自身体的器官和组织，回到心脏，从而形成完整的循环系统。颈动脉是向脑组织和颅内供血的重要动脉系统，分为左右颈动脉[8]。脑梗死是由脑血管狭窄引起的，但颈动脉与脑梗死有直接关系[9]。血管壁上产生动脉粥样硬化斑块，在斑块的基础上可形成血栓，使动脉管腔逐渐变窄，狭窄的直径超过50%，会导致斑块形成血栓，表面的血栓或者斑块本身脱落，斑块被冲入大脑，导致脑梗死[10]。本文研究以颈动脉超声检查联合CT检测颈动脉狭窄患者继发性脑梗的风险预测价值，以期为临床提供参考。

颈动脉超声可检查颈部血管走行、管腔内径、管壁结构、先天发育异常等。重要的是，颈部血管超声检查是评价全身动脉粥样硬化的一个窗口[11]，不仅对动脉粥样硬化性疾病的早期诊断和预后判断具有重要价值，而且对心血管健康和心血管疾病风险的评估与预测也有重要价值[12]。颈动脉血管超声可检查的疾病有颈动脉粥样硬化、大动脉炎、动脉夹层、真性动脉瘤、假性动脉瘤、先天发育异常、动脉血栓，以及评估血流动力学变化等。颈动脉超声检查可了解颈动脉狭窄的位置、严重程度，并有助于判断动脉粥样硬化斑块的稳定性，有方便、无创、价格低廉的优点，可以作为筛选检查的手段[13]。CT扫描的特点为有多序列和较高的空间分辨率，扫描范围较广，可在对比剂辅助下快速、清晰分辨动脉血管腔狭窄情况，完成颈部动脉血管成像，可准确分辨动脉狭窄程度[14]。CT血管造影不仅可以了解颈动脉的形态和病理变化，有助于判断斑块的稳定性，还可以了解颅内血管和脑实质的病变情况。目前，多层螺旋CT被广泛应用，可用于肌肉骨骼，覆盖更大解剖范围，可进行CT血管造影、心脏评估、脑灌注成像、大型患者检查、虚拟内镜，多层螺旋CT已达到新世纪成像技术的巅峰[15，16]。本研究显示，与CT、超声检查相比，颈动脉超声检查联合CT准确率、诊断价值显著上升。

微小RNA-124是真核生物中保守的非编码RNA,是调控基因表达的关键途径。研究表明，miRNA参与调节炎症反应和脑缺血反应[17]。miR-124在成人和胚胎大脑中是最丰富的miRNA，是一种脑特异性miRNA，在中枢神经功能调节、脑神经发育中起重要作用，可作为脑梗早期检测的候选生物标志物[18]。目前，已有研究表明，在脑动脉闭塞中miR-124具有保护神经、抗炎、降低神经元凋亡的作用，miR-124从梗死的脑组织中释放血,可能在脑缺血中起到重要的保护作用[19]。血清miR-155位于人类染色体21q21.3上,有报道称miR-155可作为结直肠癌、血液系统恶性肿瘤的血清诊断和预后的生物标志物，miR-155的上升可增强口腔鳞状细胞癌患者的细胞增殖[20]。miR-155可调控急性炎症，起到免疫抑制作用，miR-155表达量明显上升可促使机体炎症反应，特异性抗体、效应性T细胞在特异性免疫、固有免疫中起到主要的作用，并参与急性脑梗死炎性反应[21]。本研究中患者miR-124、miR-155表达明显高于正常组，说明miR-155、miR-124在脑缺血中起到保护作用。临床可根据miR-155、miR-124的表达高低评估脑梗死患者病理完全缓解及预后的价值。

综上，颈动脉超声检查、CT、miR-124、miR-155对颈动脉狭窄的诊断价值较高，且可用于预测颈动脉狭窄患者继发性脑梗的风险，预测价值较为理想。