北京市西城区7 382例常见呼吸道病原体IgM抗体检测结果分析*

王晓宁，李卓敏#，刘 杨，郑芳芳，聂秋燕，刘 晴，古 媛，韩 旭，田 野，谭延国△

1.首都医科大学附属复兴医院检验科，北京 100038；2.首都医科大学医学检验系，北京 100038

呼吸道感染属常见病及多发病，病原体构成复杂，且各种病原体感染引起的症状相似，临床难以鉴别。呼吸道感染常见病原体有病毒、细菌及真菌，通常在病原体感染后1周可检测到特异性IgM抗体。呼吸道病原体的流行在不同地区、不同年龄、不同季节存在差异。首都医科大学附属复兴医院为北京市西城区区属医院，就诊患者常为医院附近社区居民，本文回顾性分析了2016年12月至2019年11月在首都医科大学附属复兴医院就诊的7 382例呼吸道感染患者的8种呼吸道病原体IgM抗体的结果，从不同年度、季节及人群分析本地区病原体的分布情况。

1 资料与方法

1.1一般资料 将2016年12月到2019年11月在首都医科大学附属复兴医院就诊的7 382例患者作为研究对象，均符合上呼吸道感染的诊断标准[1]，排除标准：其他急性传染病患者，如麻疹、流行性出血热及流行性脑脊髓膜炎等；3个月内使用过免疫抑制剂、抗菌药物。男女比例为1.106∶1.000，年龄1个月至107岁，平均年龄(63.41±26.84)岁。

1.2仪器与试剂 显微镜采用EUROStar荧光显微镜。呼吸道病原体谱检测试剂盒购自德国欧蒙公司，可同时检测呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、A型流感病毒(INFA)、B 型流感病毒(INFB)、副流感病毒(PIVSS)、嗜肺军团菌(LP)、肺炎支原体(MP)和肺炎衣原体(CP)8种呼吸道病原体的IgM抗体。

1.3检测方法 采用带分离胶的真空采血管采集静脉血，自行凝固后离心分离血清。采用间接免疫荧光法检测上述8种呼吸道病原体的IgM抗体。试剂盒生物薄片包被有待检病原体感染的细胞、病原体涂片、质控芯片，加入稀释血清，使IgM抗体与病原体抗原结合，最后加入异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗人IgM二抗，孵育后在荧光显微镜下观察荧光模型。

1.4统计学处理 采用SPSS19.0统计软件进行数据处理及统计学分析。计数资料以例数或百分率表示，组间比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1呼吸道病原体IgM抗体检出率 在7 382例患者中，3 021例(40.92%)至少检出1种病原体的IgM抗体；INFB检出率最高(1 370例，18.56%)，其次为MP(1 072例，14.52%)、INFA(852例，11.54%)、LP(732例，9.92%)、CP(251例，3.40%)、RSV(177例，2.40%)、PIVSS(118例，1.60%)、ADV(65例，0.88%)，合并感染1 248例，检出率为16.91%。

2.2不同季节呼吸道病原体的分布情况 呼吸道病原体总检出率在4个季节间分布情况：各年度间春季、秋季及冬季，总检出率差异均有统计学意义(P<0.05)，即存在着年度流行情况；按年度分析，仅2018年总检出率在4个季节间差异有统计学意义(P<0.05)，尤以冬季为甚(48.85%)。见表1。

表1 不同年度及季节病原体IgM抗体总检出情况[%(n/n)]

进一步分析4种总检出率最高的病原体INFB、MP、INFA、LP发现，不同年度不同季节的检出率(2017年度的LP除外)，差异均有统计学意义(P<0.05)；冬季以INFB、MP、INFA为主，这3种病原体检出率在各年度间差异有统计学意义(P<0.05)；夏季和秋季INFB、MP、INFA、LP这4种病原体检出率在各年度间差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 不同季节及不同年度4种检出率最高的病原体检出情况分析

季节INFA201720182019PLP201720182019P冬8.89(40/450)6.22(81/1 302)23.11(242/1 047)<0.0512.22(55/450)11.75(153/1 302)7.83(82/1 047)>0.05春3.70(12/324)9.37(57/608)14.31(84/587)<0.0511.73(38/324)10.03(61/608)7.67(45/587)>0.05夏7.35(28/381)10.85(56/516)18.35(98/534)<0.059.97(38/381)12.21(63/516)7.49(40/534)<0.05秋8.07(33/409)8.09(48/593)11.57(73/631)<0.059.78(40/409)6.07(36/593)12.84(81/631)<0.05P<0.05<0.05<0.05>0.05<0.05<0.05

2.3不同年龄组病原体IgM抗体检出情况 把7 382例患者按年龄分为4组，分别为儿童组(0～<18岁)、青年组(18～<40岁)、中年组(40～<65岁)及老年组(>65岁)。不同年龄组间8种病原体IgM抗体的检出率，除PIVSS外，差异均有统计学意义(P<0.05)。0～<18岁患者INFB及MP检出率明显高于其他3个年龄组，差异均有统计学意义(P<0.05)。INFA及LP在18～<40岁年龄组检出率明显高于其他年龄组，差异有统计学意义(P<0.05)。RSV检出率在>65岁年龄组最高，与其他年龄组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。CP的检出率随年龄增长逐年下降。见表3。

表3 8种呼吸道病原体IgM抗体在不同年龄段患者中检出情况(%)

2.4不同性别间病原体IgM抗体检出情况 将7 382例患者按性别分为两组，男性总检出率为39.72%(1 540/3 877)，女性为41.71%(1 462/3 505)。其中男性RSV检出率为3.40%(132例)，女性为1.28%(45例)；男性MP检出率为11.32%(439例)，女性为18.06%(633例)，不同性别间RSV及MP的检出率差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 8种呼吸道病原体IgM抗体在不同性别间检出情况(%)

2.5病原体间合并感染情况分析 合并感染者共1 248例，随年龄增加，合并感染率逐渐下降(P<0.05)。合并感染常见的组合：INFB+INFA(173例、13.86%),INFB+MP(109例、8.74%),INFB+LP(31例,2.48%)，MP+LP(26例、2.08%),INFA+INFB+MP(102例、8.17%),INFA+INFB+LP(46例、3.69%)，INFB+MP+LP(72例、5.77%)及INFA+INFB+MP+LP(140例、11.22%)。

3 讨 论

呼吸道病原体感染后，患者血清中IgM抗体最早出现，为近期感染的指标。本研究使用的间接免疫荧光法可联合检测8种常见呼吸道病原体的IgM抗体，能快速、准确地明确病原体种类，更利于不同病原体合并感染的检出。

本研究结果显示，8种呼吸道病原体总检出率为40.92%，这与北京市不同地区总检出率(27.30%～74.80%)结果一致[2]。本研究中以INFB检出率最高，与以往报道中MP检出率最高的观点不一致[3-4]，可能与不同地区就诊人群、经济和社会发展程度、气候条件等的差异有关。

本研究显示，INFB、INFA、MP感染于冬季高发，且INFA于2017年冬季呈急剧增加趋势。中国国家流感中心在2017年的数据显示，流感病毒以B系为主，其次为甲型H1N1[5]，本研究结果与之有一定差异。2017年冬季最为凶猛的流感病毒为BY型[5]，国产三价流感疫苗未包含此型别，这可能为导致乙型流感爆发的原因之一。此外，2018年夏季及2019年秋季LP检出率明显高于其他季节，其他季节并无明显差异，由于LP可通过气溶胶传播，是否感染与中央空调的使用有关，尚待进一步证实。其余病原体感染呈全年散发状态。

本研究中8种病原体IgM抗体合并感染检出率为16.91%，与文献报道的0.24%～49.90%相符[6-7]。最常见为INFB合并其他病原体的感染，可能由于INFB存在多个导致病毒变异的分子标记，这些变异使得INFB更容易与其他病毒、细菌、支原体结合，从而导致合并感染[2]。另外老年、基础疾病、营养不良、免疫抑制、抗菌药物滥用等多种原因均可引起多种病原体的合并感染。

按年龄分组进一步分析发现，INFB、MP及CP的易感年龄为0～<18岁，可能与未成年人抵抗力低、学龄期儿童所处场所人口密集有关；LP及INFA总检出率最高的年龄组为18～<40岁成人，可能与该年龄段人群社交活跃、接触传染源机会多有关。RSV易感年龄为>65岁，可能与老年人免疫力低下有关。除PIVSS外，其他病原体在不同年龄组间检出率比较，差异均有统计学意义(P<0.05)，而既往研究未发现此类现象[8]，具体原因不明。本研究还发现，>65岁年龄组无论总检出率还是合并感染检出率在各年龄组中均为最低，可能与老年人B细胞功能紊乱，初次免疫反应降低、产生抗体活性降低、IgM抗体水平下降或产生时间较晚有关[9]。

不同性别患者病原体总检出率差异并不明显，仅RSV及MP检出率有明显差异，其中男性RSV检出率高于女性，MP则相反。可能与不同性别间免疫状态有关，其详细机制有待研究。

本研究主要为定性分析，无法确定病原体的含量，且只检测IgM抗体，对IgM阴性的患者，需要连续监测其特异性IgG抗体滴度的升高倍数方可确定是否感染某种病原体。但因本研究为回顾性分析，无法进一步追踪，因此存在一定的漏诊可能。

综上所述，呼吸道病原体的流行具有明显的年度性和季节性特征，而且不同年龄组患者常见的病原体谱也存在较大的差异。