CMIA和TRUST在梅毒血清学检测中的应用价值

瞿莉

【摘要】目的：探讨梅毒检测中化学发光微粒子免疫法（CMIA）和甲苯胺不加热试验（TRUST）在梅毒血清学中的应用价值。方法：选取2021年6月—2022年1月在南京市妇幼保健院进行梅毒检测的人群240例为研究对象，以CMIA和TRUST法对患者血清中梅毒抗体进行检测，梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）检验结果作为金标准，对比两种检验的结果。结果：研究对象经TPPA检出176例阳性，64例阴性。CMIA检出 230例阳性，10例阴性，阳性率为 95.83% ；TRUST检测出阳性63例，阴性 177例 ，阳性率26.25%。CMIA检测的准确率 73.33% ，灵敏度97.16% ，特异度 7.81%；TRUST检测的准确率52.91% ，灵敏度35.80%，特异度 100% 。CMIA的准确率和灵敏度远高于TRUST，但特异度远低于TRUST，且差异有统计学意义（P<0.05）。结论：CMIA法较TRUST灵敏度和准确度高，但允许一定的假阳性率。在臨床试验中， 为了提高检测结果的准确率， 必须辅以TPPA法对可疑标本进行二次确证复查[1]。CMIA更适合作为梅毒血清学初筛方法推广使用。TRUST有相对较高特异性，可以指导临床根据滴度对梅毒的治疗效果进行评价。

【关键词】梅毒；化学发光微粒子免疫法（CMIA）；甲苯胺不加热试验（TRUST）；梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）

Application value of CMIA and TRUST in serological detection of syphilis

QU Li

Maternity Hospital affiliated to Nanjing Medical University （Nanjing Maternal and Child Health Care Hospital）， Nanjing， Jiangsu 210004， China

【Abstract】Objective：To investigate the application value of Chemiluminescence microparticle immunoassay（CMIA） and toluidine unheated test （TRUST） in syphilis serology. Methods：Selection in June 2021 to January 2022 in nanjing maternity and child care for syphilis detection population 240 cases as the research object，CMIA and TRUST methods were used to detect syphilis antibody in serum of patients. Treponema pallidum gelatine agglutination test （TPPA） was used as the gold standard to compare the results of the two tests.Results：176 patients were positive and 64 negative for TPPA. CMIA detected 230 cases positive， 10 cases negative， the positive rate was 95.83%. TRUST was detected in 63 cases and 177 cases， with a positive rate of 26.25%. The accuracy， sensitivity and specificity of CMIA were 73.33%， 97.16% and 7.81% respectively. The accuracy， sensitivity and specificity of TRUST detection were 52.91%， 35.80% and 100%.The accuracy and sensitivity of CMIA were much higher than TRUST， but the specificity was much lower than TRUST， and the difference was statistically significant （P<0.05）.Conclusions：CMIA method is more sensitive and accurate than TRUST， which can improve the accuracy and positive detection rate of treponema pallidum specific antibody screening test， but allow a certain false positive rate. In clinical trials， in order to improve the accuracy of test results， TPPA method must be supplemented to conduct a second confirmatory review of suspicious specimens[1]. CMIA is more suitable for use as a serological screening method for syphilis. TRUST has relatively high specificity and can guide clinical evaluation of the therapeutic effect of syphilis according to titer.

【Key Words】Syphilis； Chemiluminescence microparticle immunoassay（CMIA）； Toluidine red unheated test （TRUST）； Treponema pallidum gelatin agglutination test （TPPA）

梅毒是主要通過与感染者的黏膜病损直接接触（通常是性接触）传染。当病原体在血液播散时，患者的其他体液也具有传染性。近2020年来，梅毒的感染率上升趋势严峻。而且梅毒还会导致不可逆的视力丧失等严重并发症，所以临床实践中应警惕这类性传播疾病。本研究我院选取门诊及住院进行梅毒检测的240位研究对象，本文主要对ARCHITECT 全自动化学发光免疫检测仪在筛查梅毒抗体的运用与研究进行阐述，以CMIA进行初筛，TRUST试验进行复检，TPPA作为确证试验，探讨多种梅毒检测方法的临床诊断与研究，以提高实验室对于梅毒的检出率和准确率，现对比研究如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2021年6月—2022年1月在南京市妇幼保健院进行梅毒检测的人群240例为研究对象，其中女性患者228 例，男性患者12例，年龄19～73岁 ，平均年龄（37.64±12.39）岁.

1.2 仪器和试剂

仪器：ARCHITECT 全自动化学发光免疫检测仪（美国雅培公司生产）；恒温箱为新苗三用恒温水箱，其型号为H.SWX-600BS；生物安全柜型号为ESCO-A2型。所用仪器设备的检测性能均能满足实验要求。

试剂：CMIA是由美国雅培原装进口的配套试剂；TRUST是英科新创（厦门）科技有限公司生产的梅毒甲苯胺红不加热血清试验诊断试剂盒；TPPA是由日本富士瑞必欧株式会社体外诊断用医药品梅毒螺旋体抗体诊断试剂。上述试剂盒均在有效期内。

1.3 方法

患者均于清晨采集静脉血至少2mL，采血前避免剧烈运动，采集完成进行离心后取上清液进行检测，分别利用化学发光微粒子免疫法（CMIA）、甲苯胺红不加热试验（TRUST）和梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）进行检测，所有检测遵循试剂盒说明书进行。

1.4 观察指标

以TPPA结果作为金标准，计算CMIA和TRUST的准确率、灵敏度、特异度并进行比较。

1.5 统计学方法

采用SPSS 25.0统计学软件进行数据分析。计数资料采用（%）表示，进行χ2检验，计量资料采用（χ±s） 表示，进行t检验，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

研究对象经TPPA检测出阳性176例，阴性64例。CMIA检出阳性230例，阴性10例，阳性率95.83% ；TRUST检测出阳性63例，阴性177例，阳性率26.25%。CMIA检测的准确率 73.33% ，灵敏度97.16%，特异度 7.81% ；TRUST检测的准确率52.91%，灵敏度35.80%，特异度 100% 。详细数据见表1、表2。

3 讨论

目前临床上检出梅毒螺旋体的方法包括：暗视野显微镜检查病损、直接荧光抗体检测或聚合酶链反应。上述检测方法应用范围并不广泛，所以目前诊断主要依靠血清学检查。首先进行梅毒螺旋体筛选试验，如酶免疫试验（EIA）或化学发光免疫分析（CLIA）、电化学发光法（ECLIA）等。若筛选试验为阳性，再进行确证性试验通常为梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）。若两项试验均为阳性，可确诊梅毒感染。此后，通过甲苯胺红不加热试验（TRUST）（一种定量的非螺旋体试验）用于检测疾病活动和评估疗效。 在本次研究中，CMIA初筛试验共检出230份阳性标本，在230份初筛阳性结果中，TRUST检出63份阳性标本，167份阴性标本，两种方法检出率差异较为显著.化学发光微粒子免疫法（CMIA）是近年来实验室新进用于检测TP的一项技术，全自动化程度，流程简易，检测速度较快，可避免交叉污染，是血清免疫分析技术发展的风向标。梅毒螺旋体筛选试验往往最先有反应，通常在硬下疳出现 2 周内检测阳性[2]。然而，对于检测结果阴性的表现有梅毒样症状或有高风险接触者，应当在2～4周后再次进行检测。甲苯胺红不加热试验（TRUST）试验可在硬下疳出现后长达 4 周仍为阴性，因此一期梅毒患者该项检测常为阴性，而二期梅毒患者中该项检测的敏感性可达98%～100%。然而，由于 TRUST是一项非特性组织损伤检测方法，所以除了梅毒以外还有其他原因导致检测结果阳性，如风湿性心脏病、钩端螺旋体病、肝硬化、麻风等。TRUST价格经济、操作简单，可通过检测抗体的滴度来了解疾病的活动度。故TRUST在梅毒感染的临床诊断中准确性及敏感性较低，不适用于早期感染的诊断。TPPA试验准确度和灵敏度都很高，但是操作所需手工设备复杂， 收费价格高， 且操作较为繁琐，耗时长达2h，结果判定需依靠肉眼主观判断，人为因素的影响较大，从而无法进行大规模筛查标本。CMIA与TPPA相比自动化程度高， 检测流程简便 ，时间短并且手工环节更少，人工干扰因素较少， 数据的重复性和一致性较高，结果数值具稳定性，适用于基层大规模的标本筛查[3]。实验室推荐用CMIA法检测以确保检验结果的及时性和可靠性[4]。但CMIA作为初筛试验，特异度为7.81%，存在一定的假阳性。若对这些假阳性结果不加以重视就随意发出报告，容易导致医患纠纷，对患者和家属也易造成无法挽回的伤害[5]。所以若ARCHITECT梅毒螺旋体抗体项目的检测结果与临床症状不符时，为了指导临床医生正确判读患者感染的真实情况，实验室需制订CMIA检查需要通过附加其他血清学来验证检测结果。

综上所述，CMIA在临床梅毒检测中，CMIA法较TRUST灵敏度和准确度高，但允许一定的假阳性率。在临床试验中， 为了提高检测结果的准确率， 必须辅以TPPA法对可疑标本进行二次确证复查[6]。 CMIA更适合作为梅毒血清学初筛方法推广使用。TRUST有相对较高特异性，可以指导临床根据滴度对梅毒的治疗效果进行评价。

参考文献

[1] 邵淑丽，李秋静，耿建利，等.全自动粒子化学发光法在梅毒抗体筛查中的应用与分析[J].国际检验医学杂志，2020，41（2）：138-140，145

[2] 谢芳钰，钟贞玲.酶联免疫吸附法与TRUST检测梅毒螺旋体感染的价值分析[J].基层医学论坛，2020，24（32）： 4664-4665.

[3] 杜静，张泽芸，周薇，等.化学发光微粒子免疫分析法检测梅毒螺旋体特异性抗体的应用与评价[J].广东医学，2012，33（8）：1100-1102.

[4] 甘钊杏，黎丽红，何景英.梅毒螺旋体抗体的CMIA法与TPPA检测比较[J].临床医学工程，2011，18（8）：1262-1263.

[5] 张薇，车玉传.雅培ARCHITECT i2000SR在梅毒实验室诊断中的临床应用和评价[J].检验医学与临床，2018，15（24）：3721-3725.

[6] 任晖晖，益西措姆，次仁央金，等.CMIA法筛查梅毒抗体[J].基础医学与临床，2018，38（2）：235-236.