过敏性紫癜患儿的尿液LXA4、TNF-α 水平及其临床意义

黄赛平 李映林 吴国媛 朱凯 詹志健

过敏性紫癜(henoch-schonlein purpura,HSP)是小儿常见免疫性疾病,以全身广泛性小血管炎为主要特征,以4～6 岁为高发年龄,发病率约为15/10 万［1］。一旦发生HSP,患儿可表现出非血小板减少性皮肤紫癜,伴或不伴血便、腹部绞痛、蛋白尿等,约有30%患儿合并肾损害,称为紫癜性肾炎(henoch-schonlein purpura nephritis,HPSN),严重者可发展为慢性肾病,进而增加病死率。HSP 的发病机制复杂,普遍认为与多种免疫功能失衡包括炎症介质、免疫紊乱、凝血及纤溶紊乱等密切相关［2］。肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是一种炎症因子,可对其他炎症因子合成及释放产生诱导,在局部组织炎症发生、发展过程中起到重要作用［3］。脂氧素A4(lipoxinA4,LXA4)是脂氧素(lipoxins,LXs)家族最具特征性的一员,可抑制核因子-κB 亚基p65 亲和肽(NF-κBp65)亚基活化,以发挥出抗炎作用［4］。本次选取2020 年1 月～2022 年1 月本院收治的71 例首发HSP 患儿,研究HSP 患儿尿液LXA4、TNF-α 表达及其临床意义,报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2020 年1 月～2022 年1 月本院收治的71 例首发HSP 患儿作为HSP 组,按是否存在肾脏损害分为肾损害组(35 例)与无肾损害组(36 例)；同期选取30 例健康体检儿童作为对照组,均无哮喘家族史,无过敏性疾病及呼吸道疾病。对照组中男18 例、女12 例；年龄2～15 岁,平均年龄(7.66±2.47) 岁。HSP 组中男41 例、女30 例；年龄3～15 岁,平均年龄(7.52±2.39)岁。HSP 组和对照组的性别、年龄等一般资料比较,差异无统计学意义(P＞0.05),具有可比性。所有患儿家长知情同意,本研究经医学伦理委员会批准。

1.2 纳入及排除标准 纳入标准：①HSP 患儿均符合《诸福棠实用儿科学》中HSP 诊断标准,肾损害患儿,符合《紫癜性肾炎诊治询证指南》中HPSN 诊断标准；②HSP 患儿均为首次发病；③近期未用过肾上腺皮质激素、抗组胺药物及免疫抑制剂治疗；④患儿病历等资料完整。排除标准：①既往有自身免疫性疾病病史者；②既往有过敏性疾病病史者；③合并精神系统疾病者；④继发性肾病者。

1.3 治疗方法 HSP 组给予综合治疗,维生素C(海南国瑞制药有限公司,国药准字H20065393)1.0 g/d,静脉滴注；孟鲁司特钠颗粒(长春海悦药业股份有限公司,国药准字H20183273)4 mg/d,口服；西咪替丁氯化钠注射液(山西诺成制药有限公司,国药准字H20030076)10 mg/kg,静脉滴注；10%葡萄糖酸钙注射液(吉林百年汉克制药有限公司,国药准字H20053961)1 ml/kg,静脉滴注；低分子肝素钙注射液(深圳赛保尔生物药业有限公司,国药准字H20060190)60～80 μg/kg,皮下注射；连续治疗14 d。

1.4 观察指标及判定标准 比较对照组与HSP 组患儿的尿液LXA4、TNF-α 水平,肾损害组与无肾损害组患儿的尿液LXA4、TNF-α 水平；统计HSP 组患儿的疗效；比较HSP 组不同疗效患儿的尿液LXA4、TNF-α 水平,HSP 组治疗有效患儿恢复早期和急性期的尿液LXA4、TNF-α 水平,肾损害组治疗有效患儿急性期和恢复早期的尿液LXA4、TNF-α、β2-MG、MA 水平。

1.4.1 疗效判定标准 有效：蛋白尿、血尿及腹部绞痛等症状明显好转或有所好转,治疗14 d 内未见复发；无效：症状未见好转甚至加重,治疗14 d 内出现复发。

1.4.2 检测方法 起病2 周为急性期,以关节肿痛、非血小板减少性紫癜、腹痛、关节炎及胃肠道出血等为主要表现,治疗后上述症状消失3 d 为恢复早期。HSP 组分别于病情急性期、恢复早期,对照组于体检当日,留取晨尿8 ml,离心(转速3000 r/min,时间20 min)取上清液保存于-80℃冰箱中待检；设备选用Alisei 型全自动酶标分析仪,以双抗体夹心酶联免疫吸附法测定尿液LXA4、TNF-α、β2-MG、MA 水平。试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司提供,以上检测均严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.5 统计学方法 采用SPSS23.0 统计学软件对数据进行处理。计量资料以均数±标准差()表示,采用t检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对照组与HSP 组患儿的尿液LXA4、TNF-α 水平比较 HSP组尿液LXA4、TNF-α水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 对照组与HSP 组患儿的尿液LXA4、TNF-α 水平比较()

表1 对照组与HSP 组患儿的尿液LXA4、TNF-α 水平比较()

注：与对照组比较,aP＜0.05

2.2 肾损害组与无肾损害组患儿的尿液LXA4、TNF-α 水平比较 无肾损害组患儿的尿液LXA4水平高于肾损害组,TNF-α 水平低于肾损害组,差异有统计学意义(P＜0.05)。见表2。

表2 肾损害组与无肾损害组患儿的尿液LXA4、TNF-α 水平比较()

表2 肾损害组与无肾损害组患儿的尿液LXA4、TNF-α 水平比较()

注：与无肾损害组比较,aP＜0.05

2.3 HSP 组患儿的疗效及不同疗效患儿的尿液LXA4、TNF-α 水平比 较 HSP 组患儿 治疗后有效66 例(92.96%),无效5 例(7.04%)。HSP 组治疗有效患儿的尿液LXA4水平高于治疗无效患儿,TNF-α 水平低于治疗无效患儿,差异均有统计学意义(P＜0.05)。见表3。

表3 HSP 组不同疗效患儿的尿液LXA4、TNF-α 水平比较()

表3 HSP 组不同疗效患儿的尿液LXA4、TNF-α 水平比较()

注：与无效比较,aP＜0.05

2.4 HSP 组治疗有效患儿恢复早期和急性期的尿液LXA4、TNF-α 水平比较 HSP 组治疗有效患儿急性期尿液LXA4水平低于恢复早期,TNF-α 水平高于恢复早期,差异有统计学意义(P＜0.05)。见表4。

表4 HSP组治疗有效患儿恢复早期和急性期的尿液LXA4、

2.5 肾损害组治疗有效患儿急性期和恢复早期的尿液LXA4、TNF-α、β2-MG、MA 水平比较 肾损害组治疗有效患儿31 例,其急性期的尿液LXA4、TNF-α、β2-MG、MA 水平分别为(495.26±98.84)pg/ml、(1.99±0.48)μg/L、(0.59±0.22)mg/L、(18.66±5.21)mg/L,恢复早期的尿液LXA4、TNF-α、β2-MG、MA 水平分别为(846.29±22.29)pg/ml、(1.11±0.12)μg/L、(0.29±0.08)mg/L、(10.26±1.49)mg/L；肾损害组治疗有效患儿恢复早期的尿液TNF-α、β2-MG 和MA 水平均低于急性期,LXA4水平高于急性期,差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表5。

表5 肾损害组治疗有效患儿急性期和恢复早期的尿液LXA4、TNF-α、β2-MG、MA 水平比较(,n=31)

表5 肾损害组治疗有效患儿急性期和恢复早期的尿液LXA4、TNF-α、β2-MG、MA 水平比较(,n=31)

注：与急性期比较,aP＜0.05

3 讨论

HSP 是以小血管炎为主要病变的一种常见变态反应性疾病,病变累及毛细血管壁后可增加其脆性、渗透性,出现反复发作的皮肤紫癜,30%可导致肾脏损害,即HSPN。虽然HSP 发病较为急促,但病程具有自限性特点,可反复发病,对患儿身心健康产生严重影响［5］。HSP 病理改变为血管性炎性反应,发病机制尚未完全明确,研究认为它是一系列复杂的炎性反应、免疫反应多因素导致的结果,涉及多种异常细胞因子表达,可能与激活补体与免疫复合物沉积于肾小球系膜密切相关,炎性反应可损伤血管内皮,导致血管痉挛甚至血栓形成［6-8］。

脂氧素(LXs)产生于机体发生过敏、炎症反应及血管病变时,是一类内源性抗炎介质,LXA4是家族中一员,具有促进炎症消退的作用,可通过不同方式对多种验证信号通路产生抗炎活性［9］。既往研究发现,TNF-α 与HSP、HSPN 发生及发展密切相关。TNF-α由内皮细胞、单核巨噬细胞等分泌,是一种多肽调节因子,与机体炎症反应、免疫调节等有着直接关系［10-12］。本研究发现,HSP 组尿液LXA4、TNF-α 水平均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05)。无肾损害组患儿的尿液LXA4水平高于肾损害组,TNF-α水平低于肾损害组,差异有统计学意义(P＜0.05)。HSP组患儿治疗后有效66 例(92.96%),无效5 例(7.04%)。HSP 组治疗有效患儿的尿液LXA4水平高于治疗无效患儿,TNF-α 水平低于治疗无效患儿,差异均有统计学意义(P＜0.05)。HSP 组治疗有效患儿急性期尿液LXA4水平低于恢复早期,TNF-α 水平高于恢复早期,差异有统计学意义(P＜0.05)。提示TNF-α 可能参与HSP 发病,且与病变程度密切相关,而LXA4可能有抗炎作用。分析原因,LXA4与肾脏疾病发生、发展密切相关,在多种肾脏炎性疾病、肾脏纤维化及肾脏缺陷-再灌注损伤中均起到肾保护作用。一项研究发现,在急性肾损伤中LXA4起到保护作用的部分机制在于,对核因子κB(NF-κB)激活产生抑制作用,以减轻炎性细胞浸润,达到降低炎性因子表达的目的［13］。也有研究发现,HSP 患儿处于病情急性期时血清中LXA4水平可见明显升高,而处于恢复早期时可进一步增高,且相较于仅有皮肤紫癜的HSP 患儿,HSPN 患儿血清LXA4水平更低,提示LXA4可能有抗炎作用,且可对肾脏产生保护作用,推测LXA4可能通过增加合成达到促进炎症消退的目的［14,15］。由此,LXA4有望成为预测HSP 患儿肾损伤是否发生及其严重程度的重要指标,且相较于血液含量监测,监测尿液更为便捷,具有无创伤性、操作简便等优势,可减轻患儿痛苦。TNF-α是一种促炎性反应因子,可对免疫活性细胞产生白细胞介素等炎性因子产生刺激作用,也可诱导血管内皮细胞过度表达粘附分子,达到促进血管内皮损伤的目的。TNF-α 具有双重生物学作用,一方面是机体免疫防护的一个重要介质,另一方面又可参与免疫病理损伤。研究发现,HSPN 患者肾损害程度、预后等均与TNF-α 水平密切相关,在严重肾损害时可作为疾病活动的一项重要监测指标。一项研究发现,HSP 患儿入院治疗时尿β2-MG 与MA 已处于较高水平,表明HSP患儿肾小球通透性增高,提示早期肾损伤迹象已客观存在［16］。本研究发现,肾损害组治疗有效患儿恢复早期的尿液TNF-α、β2-MG 和MA 水平均低于急性期,LXA4水平高于急性期,差异具有统计学意义(P＜0.05)。提示LXA4、TNF-α 水平可反映炎症严重程度,且LXA4水平可准确反映肾损害程度,一旦LXA4不足可能加重机体肾脏损伤。随着TNF-α 水平升高、LXA4水平降低,患儿病情不断加重,对HSP 患儿的病情判断、预后评估及疗效观察具有着指导意义。

综上所述,TNF-α 水平可于某种程度上反映HSP肾脏病理损伤程度,而LXA4可能具有抗炎作用。