草鱼中兽药残留硝基呋喃代谢物检测的研究

◎ 饶玲玲

（湖南省分析测试中心有限公司，湖南 长沙 410000）

水产养殖产业的迅猛发展，为我国农村经济的进步提供关键性支撑。在养殖业发展进程中，因养殖密度、环境污染等因素，导致各类水产品病害严重，兽药的科学应用能够有效降低水产养殖的发病率及死亡率，保障养殖者的利益。然而，因部分养殖者缺乏相关用药知识及科学的指导，出现抗生素、药物添加剂滥用的问题，导致水产品兽药残留严重，成为社会大众关注的焦点。兽药残留是指动物产品的可食用部分中所有与药物有关的物质残留，是药物原型或其所有代谢物的总和[1-4]。水产品在使用药物之后，包括药物原型在内的相关产物、杂质等，都会在水产品的组织、细胞及各种器官中进行积累，不仅不利于生态环境，也会通过食物链进入人体，引发人类身体健康问题。兽药滥用的问题非常普遍，严重影响了我国水产品食用的安全性。因此，对水产品中的药残进行检测在保障食品安全方面意义重大[5]。鱼类是CS 地区重要的食用水产品，尤其是草鱼，受到当地人民的广泛喜爱。因此，强化对草鱼水产品安全的监管，对于当地经济、产业、新农村建设、提升当地农民收入，具有重要现实意义。基于此，本研究依据GB 31656.13—2021 《食品安全国家标准 水产品中硝基呋喃类代谢物多残留的测定 液相色谱－串联质谱法》，对草鱼中的4 种硝基呋喃代谢物的含量进行了测定，同时开展了测定方法的评价，期望可以为水产品农残的测定提供一定参考依据。

1 实验部分

1.1 实验材料

（1）材料。实验用草鱼：来自SC 水产养殖基地。

（2）试剂。4 种硝基呋喃代谢物标准和内标物质；甲醇、乙酸乙酯、乙酸铵、二甲亚砜、2-硝基苯甲醛（以上均为色谱纯）；盐酸、无水磷酸氢二钾；水（超纯水）。

（3）实验仪器。液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）；组织捣碎机；恒温振荡器等；分析天平；氮吹仪；离心机；涡旋混合器。

1.2 样品前处理

参照GB 31656.13—2021 《食品安全国家标准水产品中硝基呋喃类代谢物多残留的测定 液相色谱－串联质谱法》。

1.3 仪器条件

1.3.1 色谱条件

色谱柱：Waters C18（Xbridge BEH 2.5 μm）；柱温：30 ℃；进样量：10μL；流速：0.35 mL·min-1；流动相：溶剂A 为2 mmol·L-1的乙酸铵溶液，溶剂B 为甲醇。梯度洗脱程序见表1。

表1 流动相及梯度洗脱程序表

1.3.2 质谱条件

离子源：EI（ESI+）；扫描方式：SRM；离子喷雾电压：4 500 V；离子传输管温度：300 ℃；蒸汽温度：350 ℃；鞘气流速：30 Arb；辅助气流速：15 Arb。

2 试验分析

2.1 标准工作曲线

配制了6 个点的标准溶液，浓度分别为 0.50、1.00、2.00、5.00、10.0、20.0 ng·mL-1，内标浓度为 2.00 ng·mL-1，建立标准工作曲线，得到线性回归方程和相关系数，见表2。

表2 4 种硝基呋喃代谢物的线性方程及R2 值表

由表2 可见，在0.5～20.0 ng·mL-1线性范围内，4 种硝基呋喃代谢物的标准线性方程相关系数处于0.999 2～0.999 8，说明其线性关系表现良好。

2.2 加标回收实验

各称取草鱼样品2 g，分别添加硝基呋喃代谢物（AHD、AOZ、SEM、AMOZ）标准物质0、5、5、10 ng，并定容至1 mL，计算其分析结果及回收率，具体见表3。

表3 硝基呋喃代谢物加标回收实验结果表

由表3 可知，4 种硝基呋喃代谢物的加标回收率处于91.8%～107%，代表该检测方法具备较高的准确度，可以满足检测要求。

2.3 样品检测及结果

依据上述方法对草鱼样品中含有的4 种硝基呋喃代谢物进行检测，检测结果见表4。

表4 草鱼样品中硝基呋喃代谢物检测结果表

由表4 可知，通过对SC 水产养殖基地选取的具有代表性的3 个养殖点中的草鱼开展检测。结果显示，该养殖基地的草鱼样品中除SEM 未检出外，样品中均有AMOZ、AOZ、AHD 残留，其中AMOZ 含量处于5.28～5.38 μg·kg-1，AOZ 含量处于2.52～2.58 μg·kg-1，AHD 含量处于2.56～2.59 μg·kg-1，且检出值均高于该检测方法的定量限（0.50 μg·kg-1）。

3 结果与讨论

本研究在对仪器的工作条件进行优化后，开展了硝基呋喃代谢物加标回收实验。结果显示，4 种代谢物处于0.05～20.0 ng·mL-1浓度范围内时，其线性关系表现良好，相关系数处于0.999 2～0.999 8，4 种代谢物加标回收率处于91.8%～107%。结果表明，该检测方法准确度较高、简单、可靠，能满足草鱼中不科学应用硝基呋喃类药物的检测监控要求，为相关人员开展水产品硝基呋喃类药残检测提供方法参考。

水产品中检测出的硝基呋喃代谢物，不仅源自养殖者在饲养过程中不科学地使用药物，也与环境污染具有较大的关系。对于本实验样品草鱼中检测出来的AMOZ、AOZ、AHD 3 种硝基呋喃代谢物，其来源还有待进一步研究。