大肠埃希氏菌的临床分布和耐药性分析

文/田永侠，陈名霞

大肠埃希菌是院内感染致病菌之一，在革兰阴性菌中，大肠埃希菌所致院内感染的占比最高，引起全身各个系统感染[1]。细菌耐药性已成为临床广泛关注的问题，对于大肠埃希菌更是如此，由于高等级以及广谱抗菌药的滥用，导致大肠埃希菌感染和耐药菌现象日益增多，可导致临床抗感染效果不佳，甚至造成病患。目前我国微生物学检测技术不断发展，及时准确的检验结果，可以为大肠埃希菌的诊断、治疗和预防提供科学依据[2]。由于不同地区大肠埃希菌的分布及耐药特征存在差异，并且大肠埃希菌的耐药细菌谱有所改变，尚未形成统一结论[3]。为进一步验证，本次研究中分析大肠埃希菌的分布特点与耐药性变化如下。

1 资料与方法

1.1 检测样本来源

选取2022 年 1 月1 日至2022 年12 月31 日东南大学附属中大医院接受送检的各类标本2673 份，所有检测标本为不同患者非同一部位分离。本次研究经医学伦理部门的审查通过。

1.2 标本处理

按第四版《全国临床检验操作规程》中检验操作规程，对标本进行分离、培养及菌种鉴定、药敏试验。

（1）标本采集。标本采集取材后使用培养瓶或无菌试管盛放。血液采用无菌穿刺抽取，成人8～10ml/瓶，儿童3～5ml/瓶；脑脊液采用无菌穿刺抽取，2～3 ml/瓶；痰及其他呼吸道分泌物，采用诱导咳痰，取适量；咽、鼻拭子可使用拭子采集；尿液标本采集无菌清洁中段尿10 ml；脓液、烧伤创伤感染分泌物首先用75%酒精擦拭表面，取分泌物或脓物；穿刺液胸腔积液、腹水胆汁、心包积液、关节液、鞘膜液；常规消毒，使用注射器抽取或引流；粪便标本采用自然排便；生殖道分泌物采用无菌拭子；组织标本无菌操作留取标本于无菌杯中送检。

（2） 质控菌株肺炎克雷伯菌ATCCBAA-1705(KPC 型碳青霉烯酶阳性株)、肺炎克雷伯菌ATCCBAA-2146(NDM 型金属B 内酰胺酶阳性株)、肺炎克雷伯菌ATCC BAA- 2524(OXA-48 型碳青烯酶阳性株);肺炎克雷伯菌ATCCBAA-1706（非产碳青烯酶株）购自浙江康泰生物技术有限公司，铜绿假单胞菌ATCC27853、金黄色葡萄球菌ATCC25923 和大肠埃希菌ATCC25922 均购自江苏省临检临床检验中心，所有质控菌株由本实验室保存。

（3）仪器与试剂。VITEK Compact 60 全自动微生物分析仪及配套的鉴定卡和药敏卡（法国梅里埃公司）,药敏纸片（英国Oxoid 公司），替加环素标准肉汤微量稀释板条（温州市康泰生物科技有限公司），碳青霉烯酶检测卡试剂盒（北京金山川科技发展有限公司），安图MS1000 全自动微生物质谱系统。

（4）标本分离、培养及鉴定。将标本接种于培养基中，置于恒温箱中孵育，进行增菌培养。观察菌落形态，使用接种环挑取新鲜培养的单个菌落，制备细菌悬液，采用全自动微生物分析仪及鉴定卡进行鉴定。

（5）药敏试验。以《美国临床实验室标准化委员NCCLS》第31 版公布标准，作为药物敏感性试验的判定标准。采用全自动微生物分析仪及配套的药敏卡片，检验人员培养细菌进行药敏试验，以各药物最小抑菌浓度（MIC）值判读。

2 结果

2.1 不同标本大肠埃希菌

表1 可见。本次检出大肠埃希菌568 株，为21.25%。最高的标本是羊水56.25%，其次脓液（52.60%）、组织（47.80%）、宫颈口分泌物（45.98%）、阴道分泌物（37.98%）、分泌物（29.59%）。

表1 不同标本大肠埃希菌检出

2.2 不同病区大肠埃希菌

表2 可见。肛肠科大肠埃希菌检出率最高，为46.79%，其次普外科（45.37%）、内分泌科（42.31%）、妇科（42.14%）、产科（41.75%），其中568 株大肠埃希菌样本中，检出9 例CRE，分布在肾内科3 例、妇科2 例、普外科2 例、康复医学科1 例、重症医学科1 例。

表2 不同病区大肠埃希菌检出

2.3 大肠埃希菌的耐药情况

表3 可见，发现568 株大肠埃希菌临床分离株对氨苄西林的耐药率最高（71.37%），对哌拉西林耐药率45.45%，对复方新诺明耐药率为41.62%，对头孢唑林、头孢呋辛、环丙沙星、头孢噻肟、左氧氟沙星、头孢吡肟的耐药率分别39.15%、33.51%、33.33%、33.1%、32.39%、31.16%，对氨曲南、头孢他啶、庆大霉素耐药率分别29.81%、28.57%、25.85%，而对头孢西丁、哌拉西林他唑巴坦、阿米卡星、亚胺培南耐药性均不高，耐药率分别为7.73%、3.52%、1.23%、1.23%。大肠埃希菌的敏感性分析：替加环素、呋喃妥因的敏感性最高，为100.00%，由于米诺环素的实验数较少，故排除，其次亚胺培南（98.77%）、美罗培南（98.77%）、哌拉西林他唑巴坦（96.30%）、阿米卡星（97.52）、头孢霉素类-头孢西丁（92.09%）。

表3 568 株大肠埃希菌的耐药情况

3 讨论

大肠埃希菌是肠道菌群的组成部分，可维持肠道菌群的生理稳定，在机体免疫力低下、肠道缺乏刺激等因素下，大肠埃希菌会离开肠道的寄生部位，转移至肠道外部位，如胆囊、尿道、膀胱、阑尾等，引发其他脏器感染。临床上大肠埃希菌感染多见于老人、婴幼儿等易感人群，由于本致病菌具有很强的传染性和流行性，可导致院内感染流行。因此大肠埃希菌目前被列为重要的卫生指标菌之一[4]。《中国细菌耐药监测报告》中指出分离菌株中，大肠埃希菌的检出率最高，约为19%。而本次研究中送检2673份标本，大肠埃希菌检出568 份，占21.25%，高于平均水平，表明本地区的大肠埃希菌检出形势严峻，需要引起足够的重视[5]。

本次研究中568 例大肠埃希菌样本中羊水最多，约为56.25%，其次为脓液（52.60%）、组织（47.80%）、宫颈口分泌物（45.98%）、阴道分泌物（37.98%）。其中多数大肠埃希菌主要以免疫力低下、妇产女性及新生儿多见[6]。另外大肠埃希菌是肠道中存在的正常菌群，大多数大肠埃希菌首先定居于直肠，当肠道出现问题时，才会引发肠道外感染。而肛肠科内以肠道疾病最多见，这也为大肠埃希菌的传播提供了更多途径[7]。本次大肠埃希菌标本，在肛肠科中大肠埃希菌检出率最高，因此肛肠科中大肠埃希菌的检出率为46.79%。其次为普外科（45.37%）、内分泌科（42.31%）、妇科（42.14%）、产科（41.75%）。分析如下：普外科中以手术为主，较大的切口、大出血及长时间手术、术后恢复都会增加大肠埃希菌转移或感染的概率。内分泌科中糖尿病老年患者最常见，妇科、产科中以免疫力低下的女性多见，当机体免疫力不足时，无法有效地抵抗致病菌感染，因此有更大的概率出现大肠埃希菌感染[8]。可以看出，免疫力低下和手术患者是大肠埃希菌感染检出的主要群体。另外本次568 例大肠埃希菌样本中检出9 例CRE，检出率相对低，这也导致碳青霉烯类中比罗培南和美罗培南的敏感率高，为98.77%。

临床上抗菌药物是治疗大肠埃希菌的主要手段，通过敏感性高的抗生素来杀灭或抑制致病菌，然而细菌耐药性已成为影响效果的不良因素。临床实际应用时，需要避免一些耐药性高的抗菌药物，尽可能选用高敏感性抗菌药物。因此治疗大肠埃希氏菌感染，尤其要重视药敏实验及抗菌药物管理，减少耐药情况的出现。本次大肠埃希菌样本中替加环素、呋喃妥因的敏感性最高，为100.00%，而氨苄西林的耐药性最高，为71.38%、其次为哌拉西林（45.45%）。需要加强大肠埃希菌的微生物检测力度，对耐药性高的大肠埃希氏菌可以选用替加环素为基础的联合用药、呋喃妥因等敏感性高的抗菌药物。

综上，大肠埃希菌的检出率较高，主要见于羊水、脓液、组织、宫颈口分泌物、阴道分泌物，主要分布于肛肠科、普外科、内分泌科、妇科、产科等科室。应加强大肠埃希菌的耐药性检测力度，选用替加环素、呋喃妥因等敏感性高的抗生素。面对日益严重的细菌多重耐药性问题，临床治疗多重耐药细菌感染时，应当依据药敏试验结果，选择合适的抗菌药物，避免抗感染治疗的失败，并能有效采取感染预防措施，控制和减少医院内多重耐药菌感染的发生。