昆明地区猪戊型肝炎病毒感染的血清学调查

严玉霖,高 洪,李文贵,陈 玲,高利波,赵 汝

(云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201)

戊型肝炎(Hepatitis E,HE)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)引起的急性病毒性肝炎,该病主要经粪-口途径传播,也有报道可以通过口-鼻和血液传播,有流行和散发两种形式,HE的病死率较甲型、乙型、丙型和丁型肝炎高,孕妇的病死率可高达21%。自1995年印度由于水污染发生了第一次HE大暴发流行以来,先后在印度、尼泊尔、苏丹、吉尔吉斯斯坦等国有流行。我国自1980年以来,新疆、辽宁、吉林、内蒙古和山东等省均有HE的流行。近年来,HE的发病率呈现不断上升的趋势,作为一种重要的人兽共患病,HE已在动物中广泛存在,尤其是在家畜中的分布,是不可回避的事实[1]。在20世纪90年代早期,Balayan和其同事首先报道了前苏联猪、羊和鼠中的HEV感染[2-3]。1997年美国Meng等由美国本土的一头猪身上分离出1株野生型HEV病毒,发现其与人类HEV具有极高的同源性,并发现其可感染黑猩猩和恒河猴,从而首次证实了HEV种间传播的可能性[4-5]。世界上其他地区猪HEV的陆续分离及血清学调查,表明猪的HEV感染是一种普遍存在的现象[6]。为了解昆明地区猪HEV感染情况,本研究对昆明地区的12个规模化养猪场和部分散养户的270只不同月龄段的生猪进行了HEV血清学调查,以期为猪戊型肝炎的防控提供资料。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 血清样本 2008年从昆明市及周边地区(包括五区一市八县)的12个规模化养猪场及部分散养户随机采集猪血清样品270份,其中规模化猪场血清235份、散养户血清35份;仔猪血清92份、育肥猪血清108份、后备种猪血清70份。血清样品于—20℃保存备用。

1.1.2 检测试剂 猪HEV IgG抗体检测试剂盒(ELISA)购自北京万泰生物药业股份有限公司。

1.2 方法

1.2.1 检测方法 间接ELISA方法,按照检测试剂盒的说明书进行操作,通过配制洗涤液,稀释样品,加样,温育,洗板,加酶标二抗,显色,终止等操作步骤,最后于450 nm处测定孔的A值。

1.2.2 结果判定 以空白孔调零,当阳性对照孔平均值A450≥0.8,阴性对照孔平均值A450≤0.1时试验成立。被检血清样品A450≥0.2时判为阳性,A450＜0.2时判为阴性。

1.2.3 统计分析 不同时间或不同分组间抗体阳性率的比较采用Pearson χ2检验,以P＜0.05时差异显著,P＜0.01差异极显著,统计分析使用SPSS10.0。

2 结果

2.1 HEV的感染情况调查结果

由表1可知,2008年从昆明市的12个规模化养猪场共采集的235份血清样本,通过间接ELISA方法检测,检出HEV抗体阳性血清139份,阳性率为59.15%。在被检的35份散养猪群的血清样本中,检出HEV抗体阳性血清26份,阳性率为74.29%。统计结果表明,规模化猪场HEV感染阳性率显著低于散养户HEV感染阳性率(P＜0.01)。

表1 规模化猪场与散养户猪群HEV的感染情况Table 1 HEV infection in scale pig farm and scatter-feed pigs

2.2 不同年龄段猪HEV的感染情况

由表2可知,在采集的270份血清样品中,仔猪血清92份,其中HEV抗体阳性血清56份,阳性率为60.87%;育肥猪血清108份,其中HEV抗体阳性血清81份,阳性率为75%;后备种猪血清70份,其中HEV抗体阳性血清28份,阳性率为40%。统计结果表明,不同年龄阶段猪感染HEV的阳性率差异显著(P＜0.01或P＜0.05),育肥猪阳性检出率最高,其次是仔猪,后备种猪阳性率相对较低。

表2 不同年龄段猪HEV的感染情况T able 2 HEV infection in different age pig

3 讨论

目前尚未见到关于昆明地区猪HEV感染情况的报道,本研究通过2008年的血清学调查发现,昆明地区规模化猪场HEV抗体阳性率高达59.15%,饲养条件和卫生条件相对较差的散养户猪群中HEV抗体的阳性率更高,为74.29%,两者差异显著(P＜0.01),这可能与猪戊型肝炎的流行规律有关,HEV感染的猪群通过粪便、分泌物等污染周围的饲料及饮水,从而通过消化道感染健康猪群[7-8]。目前没有相应的猪用HEV疫苗问世,因此本文所测得抗体阳性的猪群是由野毒自然感染所引起,其抗体总阳性率高达61.11%,表明昆明地区猪HEV的自然感染普遍存在且情况较为严重,应当引起有关部门和养猪场的高度重视,必须尽快制定并采取有效措施进行预防和控制。

根据不同年龄段猪HEV的感染情况(表2),表明昆明地区仔猪和育肥猪的HEV感染率较高,这与在美国、台湾地区和日本报道的大多数猪在2月龄～3月龄感染HEV结果一致[9-12]。育肥猪HEV抗体的阳性率显著高于仔猪(P＜0.05),表明此年龄段猪群较易感。此次调查结果与人类戊型肝炎的发病特点相一致,即人类的HEV感染与年龄有关,幼年时感染HEV多为亚临床型,青壮年时期感染HEV多为临床型,且较易感[13-14]。

猪HEV的感染不仅影响了猪只的生长性能,给养猪业带来直接的经济损失,而且还对动物性食品安全和公共卫生安全带来隐患。已有研究表明,与猪密切接触的职业人群血清HEV抗体高于非职业人群[6,7],猪HEV与人源HEV在基因序列上具有高度的同源性[10-11],且猪HEV引起的组织病理学病变与人类HEV引起的病变类似[15]。提示HE是一种重要的人兽共患病,猪源HEV可能是引起人类HEV感染的主要病原,与猪密切接触的职业人群应定期进行HEV抗体及肝功能的检测。中国人传统的饮食习惯在肉食品方面主要以猪肉及其内脏为主,因此有必要深入研究猪HEV的分子流行病学特点和猪HEV的致病机理,在此基础上研发相应的猪用HEV疫苗,定期监测猪群HEV抗体,对于保障动物性食品安全和公共卫生安全,有效预防和控制猪戊型肝炎具有重要意义。

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