一株产细菌素植物乳酸杆菌YJG发酵液对蛋鸡生产性能以及蛋品质的影响

韩冰 邓凯 张日俊

植物乳酸杆菌是定植于动物肠道的益生菌群之一[1]，是保护动物肠道的天然屏障[2]。目前，已发现的植物乳酸杆菌广泛存在于各种环境中，比如蔬菜、水果、啤酒、肉制品、作物等。像其他乳酸菌一样，植物乳酸杆菌也能产生乳酸、细菌素及其它代谢产物。目前已经发现的一些植物乳酸杆菌细菌素，对食品中的腐败菌——单核李斯特氏菌有很好的抑制作用[3－4]，但是通常抑菌谱较窄。本研究中提到的由植物乳杆菌YJG产生的细菌素，与以前发现的植物乳杆菌细菌素相比，抑菌范围明显扩大，对一些动物肠道致病菌，如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌有较好的抑菌作用，基于这方面的考虑，将其作为饲料添加剂，添加到蛋鸡饲料中，研究其对蛋鸡生产性能等方面的影响，为饲料添加剂的开发提供了新的理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

菌株 YJG是由本实验室从健康鸡肠道分离，并通过生理和16S rRNA鉴定为植物乳酸杆菌，于－20℃保存。

1.2 方法

1.2.1 发酵液的制备

植物乳酸杆菌YJG于37℃培养48 h,离心(12000×g，10 min)，保留上清液。

1.2.2 发酵上清液活性测定

发酵上清液活性用琼脂扩散法来测定。上述发酵上清液用NaOH调pH值至4。用二倍稀释法测定上清液效价[5]。

1.2.3 试验分组

试验选用232日龄的产蛋率、体重相近，健康状况良好的海兰灰蛋鸡225只，采用单因子完全随机试验设计，试验共分5个处理，每个处理5个重复，每个重复9只鸡，预试期10 d，正试期24 d。试验组1为基础日粮，即对照组；试验组2为每千克基础日粮中添加500 AU植物乳酸杆菌细菌素；试验组3为每千克基础日粮中添加1500 AU植物乳酸杆菌细菌素；试验组4为每千克基础日粮中添加2500 AU植物乳酸杆菌细菌素；试验组5为每千克基础日粮中添加3500 AU植物乳酸杆菌细菌素。

1.2.4 饲养管理

采用密闭式鸡舍，四层立体笼养，同一行连着3个笼（45 cm×40 cm）为一个重复，每笼饲养3只鸡。采用自动照明控制系统，自然光照不足时补充光照。饲用干粉料，自由采食和自由饮水（乳头式饮水器），每天早上8点准时喂料一次并定时对水槽进行清理和消毒。按照常规程序进行防疫和鸡舍消毒。

1.2.5 样品采集

试验开始后每天上午8点准时进行喂料并记录每个重复的喂料量，每天早上6点、8点、下午3点进行匀料，并观察鸡只的健康状况，及时淘汰重伤和病弱的鸡只。每天下午2点半拣蛋。每天以重复为单位，记录产蛋量、总蛋重、破壳蛋数、畸形蛋数、死亡淘汰数，试验完成后称量每个重复的剩料量，并分别统计每个重复的平均日采食量、产蛋率、平均蛋重、料蛋比等。

1.2.6 数据处理

采用SPSS 11.5对数据进行方差分析，采用DUNCAN氏多重比较，以P＜0.05为差异显著性判断标准，P＜0.01作为差异极显著判断标准。

2 结果与分析

2.1 效价

通过二倍稀释法，测得上清液的效价为320 AU/ml。

2.2 细菌素上清液对蛋鸡生产性能的影响(见表1)

表1 植物乳酸杆菌细菌素对蛋鸡生产性能的影响

日粮中细菌素添加组的产蛋率与对照组相比，均有极显著提高。日粮中添加500 AU/ml的细菌素与其他组相比，可以显著提高平均蛋重，日采食量也有提高的趋势。与对照组相比，日粮中添加细菌素上清液能显著降低料蛋比（P＜0.05），其中1500 AU/kg和3500 AU/kg添加组能极显著降低产蛋鸡料蛋比（P＜0.01）。

2.3 细菌素上清液对蛋品质的影响(见表2)

细菌素添加组对蛋壳强度、蛋形指数、蛋黄色泽、哈氏单位均有不同程度的改善，但是差异均不显著；各组之间蛋壳厚度没有明显的差异。

表2 植物乳酸杆菌细菌素对蛋鸡蛋品质的影响

3 讨论

乳酸菌是肠道益生菌群的一种，它能很好地定植于肠道，并对肠道微生态起到调节作用。而由本研究中的植物乳酸杆菌产生的抗菌物质——细菌素，对一些肠道致病菌，如金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等起到明显的抑制作用，这样在一定程度上缓解肠道疾病的发病频率。本试验通过在产蛋鸡日粮中添加不同水平的植物乳酸杆菌细菌素，研究其对蛋鸡生产性能和蛋品质的影响，并找出其在蛋鸡日粮中的最佳用量。结果表明：日粮中添加500 AU/kg植物乳酸杆菌细菌素对蛋鸡的产蛋率和平均蛋重的提升有显著影响，对降低料蛋比也有显著的效果；另外对平均日采食量、蛋黄色泽、哈氏单位、蛋壳强度和蛋形指数都有不同程度的改善。本试验添加的细菌素，有可能也是通过调节肠道的微生态平衡，进一步影响动物的生产性能。将细菌素作为饲料添加剂用于动物试验也有其他相关报道，其中单胃动物的研究较多。在蛋鸡日粮中添加0.2%和0.4%的乳酸杆菌素可显著提高产蛋率和降低料蛋比（P＜0.05）[6]。仔猪日粮中添加0.4%的乳酸菌素酸化粉，断奶仔猪日增重提高10.1%，腹泻率比对照组降低34.9%，结果表明，乳酸菌素酸化粉对断奶仔猪生产性能和腹泻率，有良好改善[7]。在断奶仔猪日粮中添加0.4%乳酸菌素，仔猪日增重提高19.5%(P＜0.01)，料肉比下降 7.1%(P＞0.05)，并可有效降低仔猪腹泻率(P＜0.01)[8]。从报道中发现，添加植物乳酸杆菌细菌素通过调节胃肠道菌群平衡，改善肠道微生态环境，保护和促进有益菌的生长，可以有效的降低腹泻等肠道疾病的发生，改善动物的生产性能，并且，根据细菌素的特点，其产生菌对细菌素本身具有免疫耐受性。除了改善动物肠道，饲料中添加细菌素也可以防止饲料被大肠杆菌等致病菌的污染。

4 结语

目前，饲料添加剂种类繁多，其中微生物饲料添加剂（乳酸菌、芽孢杆菌等）的应用较为广泛，它不仅可以抑制有害菌繁殖，保持肠道菌群正常，还可以起到免疫等其他作用。而由益生菌产生的同样具有抑菌作用的细菌素，是一种蛋白或多肽类物质，对动物也不会造成任何残留，具有作为开发成饲料添加剂的潜力。

[1]Vries M C de,Vaughan E E,Kleerebezem M,et al.Lactobacillus plantarum—survival,functional and potential probiotic properties in the human intestinal tract.International Dairy Journal,2006,16(9):1018－1028.

[2]Gagnon M,Zihler A,Chassard C,et al.Ecology of Probiotics and Enteric Protection.Biomedical and Life Sciences,2011,2:65－85.

[3]Atrih A,Rekhif N,Moir A J,et al.Mode of action,purification and amino acid sequence of plantaricin C19,an anti－Listeria bacteriocin produced by Lactobacillus plantarum C19.Int J Food Microbiol,2001,68(1－2):93－104.

[4]Enan G,Alalyan S,Abdel－salam H A,et al.Inhibition of Listeria monocytogenes LMG10470 by plantaricin UG1 in vitro and in beef meat.Nahrung,2002,46(6):411－414.

[5]Xie J,Zhang R,Shang C,et al.Isolation and characterization of a bacteriocin produced by an isolated Bacillus subtilis LFB112 that exhibits antimicrobial activity against domestic animal pathogens.African Journal of Biotechnology,2009,8(20):5611－5619.

[6]孙汝江,张日俊.大豆肽和植物乳酸杆菌细菌素对蛋鸡生产性能和血液生化指标的影响[D].北京:中国农业大学,2008.

[7]李广运.乳酸菌素酸化粉饲喂仔猪试验[J].养殖技术顾问,2005(11):17.

[8]陈红梅,赵恒寿,韩彦珍,等.乳酸菌素对仔猪生产性能、饲料养分表观消化率及粪大肠杆菌数量的影响[J].养猪,2006(04):3－5.