谷胱甘肽S-转移酶M1和T1基因多态性与白癜风易患性关系的Meta分析

李泽华，胡志奇，胡艺觉，王 瑾，张桃花

白癜风是一种常见的后天获得、非接触传染的色素减退性皮肤病，其特征是局限性或泛发性色素脱失，初步统计世界各国有0.1%～8.8%的发病率[1]。皮肤关键部位的白癜风尤其对女性的生活质量造成极大影响[2]。白癜风的发病与遗传、环境和免疫等相关，近年来研究表明氧化应激和自由基累积可能在白癜风的发病中发挥重要作用[3]。谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase，GST)是一种可缓解氧化应激作用的解毒酶家族，能通过结合各种毒物使其水溶性增加而排出体外[4]。人GST有GSTM、GSTT、GSTP、GSTA和GSTS五种，其中研究最深入的是GSTM1、GSTT1基因[5]。近期研究表明，GSTM1和GSTT1空白基因型导致缺乏GST酶活性，致使机体清除毒物和缓解氧化应激能力降低，从而导致白癜风发生[6-9]。但目前研究缺乏一致性结论，单个研究往往样本量相对较少，统计效力较低。为此，本研究搜集现有文献进行Meta分析，期望较全面地认识GSTM1、GSTT1基因多态性与白癜风易患性间的关系。

1 资料与方法

1.1 文献检索策略 以“glutathione S-transferase”或“GSTP”或“GSTM1”或“GSTT1”、“polymorphism”、“vitiligo”为检索词计算机检索Pubmed、Embase数据库，以“GST”或“GSTP”或“GSTM1”或“GSTT1”、“白癜风”为检索词计算机检索中国知网(CNKI)、万方、维普等数据库，收集国内外公开发表的关于GST基因多态性与白癜风易患性关系的文献。通过参考文献回溯法获取更多相关文献。所有检索更新至2013年3月。

1.2 文献纳入和排除标准 (1)纳入标准：①关于GSTM1、GSTT1基因多态性与白癜风易患性关系的病例对照研究；②研究数据齐全，有各基因型在病例组和对照组的分布频数；③各研究方法相似，统计方法应用恰当，数据质量可靠；④对照组基因型分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。(2)排除标准：①试验设计不严谨的文献；②未提供充足原始数据的文献；③重复发表的文献，Meta分析或综述类文献；④其他不符合Cochrane系统评价标准的文献。

1.3 质量评价 参考英国牛津循证医学中心文献严格评价项目(Oxford critical appraisal skill program，OxfordCASP，2004)评价纳入病例对照研究的质量，具体分为A、B、C三部分来评价文献质量：A、试验结果是否有效；B、结果的可信度评价；C、结果是否对本系统综述有帮助。共分为11个问题来对病例分析质量进行评价。如文献在A、B、C三部分总体评价都给出“YES”的评价，则表明文献质量合格，可纳入本Meta分析。11个问题中最重要的为以下几个：(1)样本量是否充分；(2)诊断标准交待是否清楚；(3)分组匹配情况；(4)对照组是否与病例组具有可比性；(5)基因检测方法是否合理；(6)数据是否充分等。由第一作者与第二作者商议评分及是否纳入，如存在争议，通过与第三作者讨论解决分歧。

1.4 统计学方法 采用Review Manager 5.0.0(Cochrane网提供)进行Meta分析。各研究间的异质性采用Q检验和I2检验来评价。如I2<50%，表明异质性尚可，选用固定效应模型进行Meta分析；如I2>50%，表明异质性大，采用随机效应模型进行Meta分析，同时采用敏感性分析排除异质性最大的研究，再采用固定效应模型比较Meta分析的结果。采用漏斗图来评价发表偏倚。

2 结果

2.1 文献检索结果 最终纳入4篇文献，全部为英文文献，纳入研究的病例组均为白癜风患者，对照组均为健康人群，所有研究的对照组均服从Hardy-Weinberg定律。根据OxfordCASP评价标准，所有4篇文献对A、B、C三部分的评价都是“YES”，符合质量评价标准。累计样本量为2 781例，其中病例组1 218例，对照组1 563例(见表1、2)。

2.2 Meta分析结果

2.2.1 GSTM1的Meta分析结果 对纳入研究的GSTM1空白基因型对GSTM1非空白基因型(GSTM1 Null vs.Present)进行Meta分析，检验结果显示Q=7.74，P=0.05，I2=61%，异质性大，遂采用随机效应模型运用MH法合并OR值为1.50〔95%CI(1.12，2.02)〕，总体效应检验Z=2.70，P=0.007(见图1)。采用敏感性分析进一步分析构成该Meta分析的异质性，发现Uhm等[9]的研究为异质性主要因素，经去除该研究后再行Meta分析显示：Q=0.35，P=0.84，I2=0%，异质性可，采用固定效应模型得到OR=1.27〔95%CI(1.06，1.52)〕，Z=2.59，P=0.010(见图2)，表明采用敏感性分析去除主要异质性来源的研究后，结果仍有统计学意义。漏斗图评价敏感性分析后纳入的文献，未见明显发表偏倚(见图3)。

表1 分别研究GSTM1和GSTT1的文献的基本特征

Table1 Baseline characteristics and data of included studies on GSTM1 and GSTT1

文献序号第一作者年份地区病例组例数对照组例数GSTM1空白白癜风对照GSTT1空白白癜风对照1Bassiouny[6]2013埃及101101574731232Guarneri[7]2011地中海58150358222373Liu[8]2009中国7497634263973532954Uhm[9]2007韩国310549212282165289

注：GST=谷胱甘肽S-转移酶

表2 纳入研究GSTM1/GSTT1的文献的基本特征

Table2 Baseline characteristics and data of included studies on GSTM1/GSTT1

文献序号第一作者年份地区病例组例数对照组例数GSTM1/GSTT1空白白癜风 对照1Bassiouny[6]2013埃及101101 19 82Guarneri[7]2011地中海 58 150 14 18 4Uhm[9]2007韩国310549114157

图1 GSTM1多态性与白癜风相关性的森林图(随机效应模型)

图2 GSTM1多态性与白癜风相关性的森林图(敏感性分析)

Figure2 Forest plot of GSTM1 polymorphism and vitiligo (sensitivity analysis)

图3 漏斗图评价纳入GSTM1文献的发表偏倚

2.2.2 GSTT1的Meta分析结果 对纳入研究的GSTT1空白基因型对GSTT1非空白基因型(GSTT1 Null vs.Present)进行Meta分析，检验结果示Q=4.87，I2=38%，异质性可，采用固定效应模型合并OR值为1.30〔95%CI(1.12，1.52)〕，总体效应检验Z=3.36，P=0.0008(见图4)。漏斗图未见明显发表偏倚(见图5)。

图4 GSTT1多态性与白癜风相关性的森林图

图5 漏斗图评价纳入GSTT1文献的发表偏倚

2.2.3 GSTM1/GSTT1的Meta分析结果 对纳入研究的GSTM1和GSTT1同时空白的基因型对GSTM1/GSTT1非空白基因型〔GSTM1/GSTT1 Null/Null vs.GSTM1/GSTT1(Null/Present+Present/Null+Present/Present)〕进行Meta分析，检验结果示Q=2.66，P=0.26，I2=25%，异质性可，采用固定效应模型合并OR值为1.62〔95%CI(1.25，2.11)〕，总体效应检验Z=3.62，P=0.0003(见图6)。漏斗图未见明显发表偏倚(见图7)。

图6 GSTM1/GSTT1多态性与白癜风相关性的森林图

图7 漏斗图评价纳入GSTM1/GSTT1文献的发表偏倚

Figure7 Evaluation of publication bias through funnel plot for GSTM1/GSTT1

3 讨论

本研究利用了Meta分析来评价GSTM1、GSTT1基因多态性与白癜风易患性的关系。GST能催化谷胱甘肽与多种亲电子底物结合而发挥解毒功能。GSTM1在解毒过程的第2阶段和维持基因组的完整性方面起着重要的作用。在GSTMl位点有a、b、null 3个等位基因，其中表示空白基因的Null的多态性最为重要，因为具有GSTM1空白基因的个体在体内不能表达GSTM1，从而使GSTM1在解毒链上缺失，不能发挥GSTM1的解毒作用[5]。针对GSTM1基因多态性与白癜风的Meta分析显示，OR值为1.50〔95%CI(1.12，2.02)〕，但由于异质性较大采用随机效应模型。分析异质性主要来自Uhm等[9]的文献，去除该研究后异质性I2=0%，采用固定效应模型得到OR=1.27〔95%CI(1.06，1.52)〕。随机效应模型和固定效应模型OR值与95%CI差别不大，皆说明GSTM1基因多态性与白癜风有关，而GSTM1空白基因型有可能是白癜风发病的危险因素之一。

GSTT是GSTM的同工酶，其作用机制与GSTM类似，都是通过与谷胱甘肽作用从而发挥解毒作用，且GSTT1也具有空白基因型[5]。本Meta分析显示，GSTT1与白癜风发病相关。理论上说当GSTT1和GSTM1都空白时，机体在体内不能表达GSTT1和GSTM1，从而谷胱甘肽的解毒效应会进一步受抑制，即比单独缺失GSTM1或GSTT1时白癜风发病的可能性更大。本Meta分析表明，GSTM1/GSTT1都空白时，OR=1.62〔95%CI(1.25，2.11)〕，OR值较单独缺失GSTM1或GSTT1更大，而两者95%CI范围相近，与理论一致，表明GSTM1空白基因型与GSTT1空白基因型对增加白癜风发病可能具有协同作用。

白癜风按型别分为寻常型和节段型，寻常型又分为局限型、散在型、泛发型和肢端型[10]。流行病学显示，皮肤颜色深的人种(如印度人)较皮肤颜色浅的人种更易患白癜风[1]。白癜风易患性不仅与基因多态性相关，更与种族、地区、环境因素都密切相关，且不同的白癜风型别之间发病机制也不完全相同[11]。因此不难理解Uhm等[9]的研究对象为韩国人的文章异质性大。针对GST基因多态性与白癜风关系的研究数量较少，本Meta分析纳入的研究数量较小，样本量相对较小，虽然Meta分析是可以综合各项研究来得到一个更可靠结论的统计学方法，但仍不能避免各研究的异质性和发表偏倚对Meta分析结果的影响。故本结论有待更多设计合理的随机对照临床研究证实。

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