妊娠湖羊补充L-Arg和Se对初乳及羔羊初生重的影响

杨 洁， 王连群 *， 侯 芳， 马 林， 张俊瑜， 柳柏年

（1.塔里木大学动物科学学院，新疆阿拉尔 843300；2.新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室，新疆阿拉尔 843300；3.玛纳斯县乐土驿镇兽医站，新疆玛纳斯 832207；4.新疆畜牧科学院饲料研究所，新疆乌鲁木齐 830000；5.玛纳斯县凉州户镇兽医站，新疆玛纳斯 832219）

幼畜机体新陈代谢活动旺盛，体内的氧化还原反应相对较快，如果没有充足的抗氧化物质，氧化还原反应生成的自由基就会蓄积，导致机体产生氧化应激，造成机体损伤。Se能够提高家畜的抗氧化能力，减少机体性氧化应激反应（袁施彬，2007）。初乳是新生羔羊最佳日粮，初乳组成及IgG水平直接影响新生羔羊的健康和成活率。已有研究表明，日粮Se能够提高母羊初乳的IgG水平，并通过初乳增加了羔羊血清IgG的水平（Stewart等，2013）。本试验拟通过妊娠湖羊补充L-Arg和Se来研究外源性的L-Arg和Se对初乳的组成、抗氧化性、IgG水平及羔羊初生重的影响，并对二者进行比较。旨在为生产中提高初乳的各营养成分含量、抗氧化性、IgG水平及羔羊的初生重提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物 试验选用20只体况良好、平均体重为（41.38±2.13）kg的同期发情处理的已孕湖羊母羊。

1.2 试验设计 试验采用多因素完全随机区组试验设计，将体重相近的20只同期发情处理的已孕湖羊母羊随机分为4组，每组5个重复，每个重复1只湖羊。将添加Se日粮和静脉注射L-Arg及二者互作的因素随机分配给4组湖羊，即Se组（于妊娠期的50 d至分娩饲喂Se含量为0.3 mg/kg的日粮）、Arg组（于妊娠期的130 d至分娩每天静脉注射70 mg/kg体重的 L-Arg）、AS组 （于妊娠期50 d至分娩每天饲喂Se含量为0.3 mg/kg的日粮结合妊娠期130 d至分娩静脉注射70 mg/kg体重的L-Arg）、对照组，各组羊只的基础日粮相同。基础日粮组成及营养水平见表1。

表1 基础日粮组成及营养水平（风干基础）

1.3 饲养管理 各组母羊分栏饲喂，自由采食，自由饮水。粗饲料（玉米秸秆）经饲料粉碎机粉碎后与精料（Se组和AS组在精料中添加亚硒酸钠）混合均匀，添加水使整个混合日粮的水分达到40%左右，每天饲喂两次（11∶30 和 18∶30），每天要求剩料量在10%左右。Arg组和AS组分别于妊娠期的130 d至分娩的每天早上10∶30静脉注射盐酸精氨酸[盐酸精氨酸注射液（L-型）上海信谊金朱药业有限公司]，注射剂量为每天每只70 mg/kg体重。

1.4 样品采集与指标测定

1.4.1 饲料样品 试验开始前收集饲料样品，测定常规养分。干物质采用GB 6435-86方法测定；粗蛋白质采用GB/T 6432-94方法测定；中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维依据范氏洗涤纤维分析法测定；钙和磷采用原子吸收法测定，Se采用2，3-二氨基萘荧光法（GB/T 13883-92）测定（王加启，2004）。

1.4.2 初乳样品 试验羊只在分娩后羔羊未吃初乳前立即采集初乳样品，于-20℃冷冻保存，待测定乳常规成分、IgG和抗氧化性指标。

初乳在室温下解冻后，乳常规成分通过乳成分分析仪（FOSS，FT 120）测定，初乳中的 IgG 采用琼脂糖单向免疫扩散法测定。初乳中的抗氧化性指标采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒进行分析，初乳中的丙二醛（MDA）含量测定采用硫代巴比妥酸法，超氧化物歧化酶（SOD）活力测定采用黄嘌呤氧化法，谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力测定采用DTNB显色法，总抗氧化能力（T-AOC）测定采用比色法。

1.5 数据处理 试验数据利用Excel 2003进行初步整理，统计分析利用SAS软件包（The SAS System for Windows 9.0）中的ANOVA过程进行多因素方差分析和F检验。差异显著性采用Duncan’s法进行多重比较，所有数据均以“平均值±标准差”表示，以ALPHA=0.05为显著性检验和判断标准。

2 结果与分析

2.1 L-Arg和Se对初乳组成及羔羊初生重的影响 由表2可知，虽然各组羔羊的初生重和初乳组成无显著变化（P＞0.05），但是，Arg组和AS组羔羊的初生重和初乳蛋白质含量比对照组分别提高了16.2%、11.3%和15.8%、13.3%，乳糖含量略有降低。

表2 L-Arg和Se对初乳组成及羔羊初生重的影响

2.2 L-Arg和Se对初乳抗氧化性及IgG含量的影响 由表3可知，Se组、AS组的SOD活性较对照组和Arg组分别提高30.2%、23.3%和 39.0%、31.6%（P＜0.05）。 Se组、Arg组和 AS组的 GSHPx活性较对照组分别提高24.5%、20.7%和30.1%（P ＜ 0.05），但三组间差异均不显著（P ＞ 0.05）。各组间的T-AOC、MDA和IgG水平差异均不显著（P＞0.05），但与对照组比较，试验组的T-AOC和IgG水平有上升的趋势。

表3 L-Arg和Se对初乳抗氧化性及IgG含量的影响

3 讨论

3.1 L-Arg和Se对初乳组成及羔羊初生重的影响 通常，母羊分娩后1周内分泌的乳汁称为初乳，在这1周内，随着泌乳时间和挤奶次数增加，初乳中的干物质、乳蛋白、乳脂肪含量均呈现递减的态势，而乳糖含量呈现递增的趋势（娜日娜等，2005），不仅如此，初乳的组成还会随着妊娠期或泌乳期的营养而改变 （O’Doherty和 Crosby，1997）。本研究表明，虽然各处理组的各乳成分含量均未达到显著水平（P＞0.05），但是，与对照组比较，单独进行静脉注射L-Arg或与日粮补充Se联用分别使初乳蛋白质含量增加了15.8%和13.3%，乳糖含量略有下降。Vicini等（1988）研究报道，给泌乳期为73～87 d的奶牛静脉注射LArg没有影响乳成分。江雪梅（2011）在妊娠母猪日粮中添加L-Arg增加了初乳中大部分氨基酸的浓度，显著提高了初乳中缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、酪氨酸和Arg的浓度（P＜0.05）。初乳中这些氨基酸浓度的提高有利于乳蛋白的合成。Arg还可通过鸟氨酸循环和三羧酸循环转变为其他氨基酸，这将为乳蛋白的合成提供更为丰富的氨基酸原料。本研究通过日粮补充Se未对湖羊初乳组成产生显著影响（P＞0.05），这与Swanson等（2008）的研究结果一致。

本研究表明，虽然各组羔羊初生重均未达到显著差异（P＞0.05），但是，与对照组比较，静脉注射L-Arg或与日粮补充Se联用使羔羊初生重分别提高了16.2%和11.3%。Lassala等（2011）通过静脉注射L-Arg提高了羔羊的初生重，这与Arg在体内的代谢有关。多胺能够调节DNA的表达和蛋白质的合成，从而对细胞的增殖和分化进行调节（Flynn等，2002）。本研究通过日粮给妊娠湖羊补充Se并未影响羔羊的初生重，这与Swanson等（2008）给妊娠母羊补充富硒酵母对羔羊初生重的影响结果一致，然而，曹贵东和武晓英（2012）却通过纳米硒显著提高了110 d妊娠母羊的胎儿体重 （P＜0.05），这一差异可能是日粮硒源不同的结果。

3.2 L-Arg和Se对初乳抗氧化性及IgG含量的影响 本研究通过日粮补充Se或与静脉注射LArg合用显著提高了湖羊初乳中SOD和GSH-Px的活性（P＜0.05），初乳中T-AOC的水平有上升的趋势（P=0.08），单独进行静脉注射L-Arg仅提高了GSH-Px的活性（P＜0.05），由此表明，妊娠湖羊补充Se和L-Arg提高了初乳的抗氧化性。郑萍等（2010）研究表明，外源性的Arg具有提高机体抗氧化性的作用。妊娠母羊补充L-Arg后血清中半胱氨酸的水平显著增加 （P＜0.01）（Lassala等，2011），半胱氨酸是GSH合成所需的主要限制性氨基酸（Wu等，2004）。在本研究中，初乳GSHPx活性的提高可能源于血液为乳腺提供了更为充足的半胱氨酸所致。Se是GSH-Px活性中心的必需元素，因而，在机体的抗氧化物酶系统中具有很重要的作用。王连群（2008）在泌乳奶牛日粮中添加亚硒酸钠提高了常乳中SOD的活性 （P=0.08）。李星（2009）研究表明，与亚硒酸钠比较，硒代蛋氨酸使母猪初乳具有更高的SOD、GSH-Px、T-AOC水平和更低的MDA水平（P＜0.05）。

初乳中足够的免疫球蛋白能够使新生羔羊获得较为理想的被动免疫，从而提高新生羔羊的抗病力和成活率。Stewart等（2013）给妊娠母羊提供Se，提高了初乳中IgG的水平。彭易柱（2013）给妊娠獭兔补充不同水平的L-Arg，结果各组初乳中的IgG水平均高于未补充L-Arg的对照组，其中，最高量的L-Arg补充组显著高于对照组（P＜0.05），由此说明初乳中IgG的浓度与补充LArg的水平有关。在本研究中，妊娠母羊补充Se和L-Arg在一定程度上提高了初乳中的lgG水平。其中未显著提高初乳中IgG的浓度 （P＞0.05），其原因可能与L-Arg的补充量有关，这需要进一步研究。

4 结论

妊娠湖羊补充Se和L-Arg均能够提高初乳的抗氧化性，单独补充L-Arg或与Se联用，在一定程度上提高了初乳中乳蛋白、IgG含量和羔羊的初生重，单独补充Se在一定程度上能够提高初乳中IgG的水平。

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