三七总皂甙对糖尿病早期大鼠肾脏转化生长因子β1及ET的影响

2016-10-27 09:13王卫娜
生物技术世界 2016年3期
关键词:总皂苷皂苷肾小球

王卫娜

(南阳医学高等专科学校 河南南阳 473000)

三七总皂甙对糖尿病早期大鼠肾脏转化生长因子β1及ET的影响

王卫娜

(南阳医学高等专科学校 河南南阳 473000)

目的:探讨三七总皂苷对糖尿病大鼠肾组织形态学及相关因子的影响。方法:将SD雄性大鼠随机分为:对照组、糖尿病模型组、三七总皂甙治疗组。三七总皂甙治疗组分别给与低、中、高剂量灌胃,对照组、和模型组灌等体积的生理盐水,利用放免法测定血NO、TGF-β1、ET含量。结果:结论:能够一定程度的改善DN模型大鼠肾脏病理变化,抑制肾脏TGF-β表达和舒张血管是其部分作用机制。

糖尿病肾病 肾脏 三七总皂甙

糖尿病肾病(Diabeticn ephropathy, DN)已经成为导致慢性肾功能衰竭的最常见原因之一,发病机制可能与肾脏组织细胞中的自由基或氧化应激水平异常相关[1],目前对糖尿病肾病的治疗仍然缺乏有效的手段,因此探讨糖尿病肾病的治疗,提高患者的生存质量,延长寿命,意义重大。三七总皂苷是三七的主要活性成分,有化瘀止血、活血定痛、补虚强壮的功效。本实验拟通过观察三七总皂苷对糖尿病大鼠肾脏TGF-β1、ET的表达,以探讨三七总皂苷防治DN的可能作用机制。

1 材料与方法

1.1 实验动物

选择3月龄SD大鼠,清洁级,雄性,35只,体重150-200g,郑州大学实验动物中心提供。大鼠饲养于清洁级动物室,室温21-25℃。

1.2 试剂

链脲佐菌素(STZ)美国Sigma公司;血栓通胶囊,龙江珍宝岛制药有限公司产品,规格:每粒含三七总皂苷100mg;尿蛋白测定试剂盒、血糖测定试剂盒购至南京建成生物工程公司。

2.1 分组、模型制作与给药方法

按数字随机表法,将大鼠分为正常组、模型组、三七总皂甙治疗组。以传统方法制备糖尿病大鼠模型,三七总皂甙治疗组以三七总皂甙100 mg/kg/d腹腔注射;正常组、模型组给予等量生理盐水。

1.3 观察指标及测定

大鼠取血检测血尿指标: 用氧化酶法测定血糖(BS);血尿肌酐采用自动生化仪测定,取肾测定肾脏指数,肾脏组织经多聚甲醛固定,以HE染色,经肾小球图像统计软件分析肾小球系膜基质(ECM)增生程度。酶联免疫法测定TGF-β1;放免法测定一氧化氮(NO)、内皮素(ET)的含量血尿肌酐采用自动生化仪测定

1.4 统计学处理

采用SPSS18.0软件进行统计分析,计量资料用均数±标准差(±s)表示,多组间比较采用方差分析,两两组间比较采用LSD-t检验。

表1 三七总皂苷对糖尿病模型组大鼠ET水平、NOS活性等的影响

表2 三七总皂苷对DN大鼠TGF-β及尿量的影响

图1 各组大鼠肾小球病例形态学变化(苏木精-伊红染色,×400)

2 结果

2.1 三七总皂苷治疗对实验大鼠肾脏形态学的影响

如图所示,光镜下,正常组大鼠肾脏基底膜无明显增厚,系膜细胞及内皮细胞无增多,糖尿病大鼠系膜区基质增生明显,肾小球体积增大成分叶状,肾小球系膜基质与肾小球面积的比值增高。三七总皂苷治疗后肾小球体积减小,病理改变减轻。

2.三七总皂苷对糖尿病模型组大鼠和NO水平、NOS活性的影响

与正常组比较,糖尿病模型组大鼠NO水平、NOS活性、肾脏肥大指数显著增大(P<0.05),ET水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,治疗组NO水平、NOS活性、肾脏肥大指数显著降低(P<0.05),ET水平显著增大(P<0.05)见表1。(±s)

2.2 三七总皂苷治疗对实验大鼠尿量及血清TGF-β 1的影响

与正常组比较,糖尿病模型组大鼠NO水平、NOS活性、肾脏肥大指数显著增大(P<0.05),ET水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,治疗组NO水平、NOS活性、肾脏肥大指数显著降低(P<0.05),ET水平显著增大(P<0.05)见表1。(±s)

讨论

糖尿病肾病作为糖尿病的严重微血管并发症之一,早期的肾脏损害主要表现为肾脏肥大,既往许多研究已揭示高糖、TGF-β等与糖尿病肾脏肥大形成可能有关[1]。肾小球高滤过和高功能是糖尿病早期的病理生理状态[2],作为作用最强的血管舒张与收缩因子,NO和ET是今年被发现,随着糖尿病进展糖基化终末产物、氧自由基及多元醇通路的代谢产物增加,NOS的合成增加活性升高,NO产生增多[3]。NO影响肾脏滤过效率及肾皮质血流量,是具有舒血管作用的活性因子。糖尿病时NO增多,促进炎症产生与发展、对肾细胞产生毒性作用[4]。可见,NO作为血管活性物质参与了肾小球高灌注高滤过的发生发展和肾细胞的损伤。

研究表明,三七总皂苷可以抑制TGF-β的表达,减轻DN大鼠的肾脏肥大指数,在一定程度上改善DN模型大鼠肾脏病理变化,具有保护肾脏的作用。

[1]钱军;黄平绞股蓝皂甙对早期糖尿病肾病大鼠肾脏TGF-β1蛋白含量影响的研究[期刊论文]-中国中医药科技2007(04)

[2]Elmarakby A A,Sullivan J C.Relationship between oxidative stress and inflammatory cytokines in diabetic nephropathy.[J]Cardiovascular Ther,2012,30(1):49.

[3] 贾育新,杨中高.醒胰降糖灵对试验性糖尿病大鼠NO与ET-1的影响[J].中国实验方剂学杂志,2010,16(9):166.

[4] 张翊玲,张旭华.被动吸烟对大鼠肺组织、肺泡灌洗液、血清中NO及NOS的影响[J].广东医学,201l,32(3):296.

R587

A

1674-2060(2016)03-0006-01

南阳市科技局科技攻关项目 2012GG069,2014GG040。南阳医学高等专科学校自然科学项目 12NYYZ2004。

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