肿瘤浸润性树突状细胞在结肠癌组织中的密度及临床意义

孙志娟，张俊毅赤峰学院国际教育学院教务办，内蒙古赤峰024000

2赤峰学院附属医院病理科，内蒙古赤峰024000 0

结肠癌是中老年人较常见的恶性肿瘤之一，且近些年有年轻化趋势。虽然随着胃肠镜技术的发展，结肠癌早期确诊率有所提高，使得病死率有所下降，但是部分结肠癌患者仍可在早期即可通过淋巴液、血液等方式转移，肿瘤细胞的转移是结肠癌患者预后不良最重要的影响因素[1-2]。目前研究已证实，免疫系统在肿瘤细胞的生长和转移中发挥了重大作用，而多种途径均可诱导肿瘤细胞对机体免疫耐受，从而大量增殖并转移。CD4+T细胞和CD8+T细胞等已被证实与肿瘤细胞的生长和转移有关[3]。树突状细胞（dendritic cell，DC）是机体的一种抗原呈递细胞，在肿瘤患者中，主要将肿瘤细胞表面分子标志物和代谢产物等呈递给细胞毒性T细胞等，进而杀伤肿瘤细胞[4-5]。但目前关于肿瘤浸润性树突状细胞（tumor infiltrating dendritic cell，TIDC）在结肠癌组织中的表达和临床意义尚不清楚。为此，本研究探讨TIDC在结肠癌组织中的密度及临床意义。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2016年1月至2017年1月赤峰学院附属医院收治的117例结肠癌患者为研究对象。纳入标准：①确诊为结肠癌；②接受手术治疗；③年龄≥18岁且≤70岁。排除标准：①术前曾接受放化疗或分子生物治疗等特殊治疗；②复发性结肠癌；③溃疡性结肠炎、克罗恩病等重大胃肠道疾病；④合并其他恶性肿瘤，肝肾等脏器功能不全；⑤既往患心肌梗死、脑卒中等重大心血管疾病，急性或慢性感染期，6个月内曾接受免疫调节剂等治疗；⑥原位癌。117例患者中，男性79例，女性38例；年龄≥60岁63例，﹤60岁54例；肿瘤直径≥5 cm 67例，﹤5 cm 50例；腺癌75例，非腺癌42例；分化程度：中低分化59例，高分化58例；TNM分期：Ⅱ期78例，Ⅲ期39例。所有患者对本研究均知情同意并签署知情同意书，本研究通过医院伦理委员会批准。

1.2 研究方法

所有患者入院后完善相关检验检查，择期行结肠癌切除术，取术中标本，检测结肠癌组织（结肠癌组织中心部位）和癌旁组织（距离肿瘤边缘5 cm以上）中主要组织相容性复合体Ⅱ（major histocompatibility complexⅡ，MHC-Ⅱ）和 CD54的表达情况。同时收集患者年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤细胞类型、分化程度、TNM分期等临床特征，分析结肠癌组织中TIDC的密度、TIDC的MHC-Ⅱ和CD54表型与患者临床特征的关系。

1.3 检测方法

取术中组织标本进行免疫组化染色后，在400倍镜下随机取5个视野进行TIDC计数，取平均值。取组织使用胰蛋白酶消化后制成细胞悬液，使用流式细胞仪检测TIDC细胞的MHC-Ⅱ和CD54表型阳性表达情况。

1.4 统计学分析

采用SPSS 22.0软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用两独立样本t检验或配对t检验。以P﹤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 结肠癌组织与癌旁组织中TIDC密度及MHC-Ⅱ、CD54阳性表达情况的比较

结肠癌组织中TIDC密度及MHC-Ⅱ、CD54阳性表达率均明显低于癌旁组织，差异均有统计学意义（P﹤0.01）。（表1）

表1 结肠癌组织与癌旁组织中TI-DC密度及MHC-Ⅱ、CD54阳性表达情况的比较（± s）

表1 结肠癌组织与癌旁组织中TI-DC密度及MHC-Ⅱ、CD54阳性表达情况的比较（± s）

组织类型结肠癌组织（n=117）癌旁组织（n=117）t值P值TIDC密度9.93±2.25 12.97±2.89 9.588 0.000 MHC-Ⅱ阳性（%）6.62±2.04 12.16±2.34 18.567 0.000 CD54阳性（%）7.58±2.74 11.98±2.24 14.384 0.000

2.2 不同临床特征的结肠癌患者肿瘤组织中TIDC密度及MHC-Ⅱ、CD54阳性表达情况的比较

不同年龄、性别、肿瘤直径和肿瘤细胞类型的结肠癌患者肿瘤组织中TIDC密度及MHC-Ⅱ、CD54阳性表达率比较，差异均无统计学意义（P﹥0.05）。中低分化的结肠癌患者肿瘤组织中TIDC密度明显低于高分化的结肠癌患者肿瘤组织，差异有统计学意义（t=7.574，P﹤0.01）；TNM分期为Ⅲ期的结肠癌患者肿瘤组织中TIDC密度及MHC-Ⅱ、CD54阳性表达率均明显低于TNM分期为Ⅱ期的结肠癌患者肿瘤组织，差异均有统计学意义（t=8.845、3.278、5.750，P﹤0.01）。（表2）

表2 不同临床特征结肠癌患者肿瘤组织中TIDC密度及MHC-Ⅱ、CD54阳性表达情况（ n=117）

3 讨论

中老年人群中最常见的恶性肿瘤是结肠癌，结肠癌在早期可通过淋巴结、血液循环等转移，严重危害了中老年人群的身心健康[6-7]。根据目前的相关研究证实，免疫功能对结肠癌的转移有着重要的影响，特别是肿瘤微环境下的免疫功能[8-9]。肿瘤患者中的DC通常作为一种抗原呈递细胞，通过对细胞毒性T细胞的刺激进行增殖，达到对肿瘤细胞的杀伤作用。但是在特定环境下DC细胞可以表现为免疫抑制作用，这部分DC细胞由分化异常或不成熟的DC细胞组成，主要表现为CD54和MHC-Ⅱ阳性表达率下降[10-12]。本研究中结肠癌组织TIDC的CD54和MHC-Ⅱ阳性表达率均较癌旁组织下降，说明结肠癌组织中TIDC不成熟细胞比例增加。2015年张子杰[13]研究显示结肠癌组织、外周血中DC细胞显著减少，但该研究未探讨结肠癌组织中TIDC与患者临床特征的关系。尹文功[14]研究则显示结肠癌组织中的TIDC的密度与临床分期、分化程度和淋巴结转移有关，与年龄、性别和肿瘤病理组织学类型无关。该研究同样支持本研究，不过本研究还同时探讨了TIDC细胞的分型，发现肿瘤组织中成熟TIDC细胞比例下降，因此本文具有一定的临床意义。TIDC细胞是一种抗原呈递细胞，在肿瘤的免疫中发挥重要作用，TIDC水平降低将导致机体对肿瘤降解产物的呈递能力降低，无法有效刺激细胞毒性T细胞的大量增殖，进而导致肿瘤细胞对机体的免疫耐受[15-16]。另外，本研究显示结肠癌组织中成熟TIDC细胞比例下降，不成熟的TIDC细胞具有免疫抑制作用，可以分泌多种免疫抑制细胞因子，而促进Th1/Th2细胞免疫向Th2免疫漂移[17-18]。目前，关于TIDC在结肠癌中的作用尚处于研究阶段。2015年Radej等[19]研究显示，结肠癌细胞降解产物可以刺激TIDC细胞增殖和成熟。但DC细胞在结肠癌中的价值为以后的研究提供了新方向，为临床治疗提供了更多的治疗靶点。DC-CIK治疗即是学者根据免疫功能在肿瘤发生中的重要作用提出的新疗法，或许可以在结肠癌患者中应用，但目前仍缺乏研究证实。

综上所述，TIDC在结肠癌组织中密度降低，不成熟的调节性TIDC比例增加，可能与肿瘤细胞生长、转移有关。