富硒米糠代替有机硒对实验仔兔生长性能和抗氧化功能的影响

韩志刚，何明忠，何丽雯，曹科，谭毅，谭冬梅

(重庆医科大学实验动物中心， 重庆 400016)

硒是家兔繁育、生长必不可少的一种微量元素，且不能在动物体内合成，必须通过食物摄入。缺硒会严重影响家兔的繁殖，阻碍幼兔的生长发育，甚至造成死亡[1]。在饲料中添加无机硒(如亚硒酸钠)或有机硒(如酵母硒)，均能有效促进家免的生长发育，并提高其免疫力[2-3]。然而，无机硒却存在毒性大、吸收率低、使用剂量不易掌握的缺点，而有机硒虽毒性小、生物利用率高，但价格较昂贵[4]。作者所在地区盛产富硒大米，其米糠中硒含量也较高，而且价格低廉。本研究用富硒米糠代替实验仔兔饲料中有机硒的添加，研究其对实验仔兔生长性能及抗氧化功能等的影响，旨在明确富硒米糠作为兔饲料硒来源的可行性，并为其在仔兔饲料生产中的推广应用提供实验基础。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物

普通级新西兰断奶仔兔60 只，35日龄，雌雄各半，由重庆市中药研究院实验动物研究所提供【SCXK(渝)2017-0003】。动物实验在重庆医科大学实验动物中心普通动物实验室进行【SYXK(渝)2017-0023】。

1.1.2 实验日粮

富硒米糠(硒含量1.00 mg/kg)和普通米糠(硒含量0.606 mg/kg)由江津区农委提供。酵母硒(法国乐斯福工业公司)由四川省医学科学院动物所提供，其硒含量为0.3%。米糠、饲料和组织中的硒含量以及饲料营养成分的检测均委托重庆出入境检验检疫局检验检疫技术中心完成。

按实验兔营养需求配制，经检测，符合GB 14924.3-2010要求。普通米糠饲料、有机硒饲料和富硒米糠饲料配方和营养成分分别见表1、表2。

表1 三组饲料主要配方表(每100 kg配方)Table 1 Rabbit feed formula in different groups (per 100 kg)

1.1.3 实验试剂

血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量测定所用的试剂盒，由南京建成生物研究所提供。

1.1.4 实验仪器

全自动生化分析仪及配套试剂盒(IDEXX Catalyst Dx Analyzer，美国)；全波长酶标仪(Multiskan GO，Thermo Fisher，美国)。

1.2 实验方法

1.2.1 实验分组及饲养管理

将60只仔兔随机分成3组：普通米糠组、有机硒组、富硒米糠组，每组20只，雌雄各半，分别饲喂普通米糠饲料、有机硒饲料、富硒米糠饲料。适应性饲养5 d后，每天定量投食，自由采食、饮水，实验周期30 d。

1.2.2 生长性能指标检测

实验开始前称量每只兔初重，并于实验第5、10、15、20、25、30天称量各组兔的体重。每日投食前称量前日所剩饲料量，准确记录各组饲料的消耗量。平均日增重=试验期间总增重/试验天数；料重比=总饲料消耗量/总增重量。在实验第30天，将兔安乐死，取其肝、脾、肾分别称重，脏器指数(mg/g)=脏器重/活兔重。

1.2.3 血清抗氧化指标及生化指标测定

实验第30天，兔耳缘静脉采血，3000 r/min，离心10 min，分离血清，并按说明书进行谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量检测，用全自动生化分析仪测定血糖(GLU)、尿酸(UA)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)、白蛋白/球蛋白比。

1.2.4 肾硒含量检测

实验第30天，从三组实验兔中，各随机抽取8只，雌雄各半，检测肾组织的硒含量。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 三组实验仔兔的生长性能情况

由表3和图1可知，实验期间，富硒米糠组和有机硒组的仔兔体重增长规律几乎完全一致，但与普通米糠组比较，富硒米糠组和有机硒组仔兔的平均日增重、平均日消耗饲料量与料重比差异均无显著性(P> 0.05)。从表4可知，三组实验仔兔的肝指数、脾指数和肾指数差异均无显著性(P> 0.05)。

图1 三组兔体重增长曲线Figure 1 Weight gain curves of the rabbits in different groups

组别 Groups 数量(n) Number平均日增重(g)Daily weight gain平均日耗料(g)Daily feed consumption 料重比Feed conversion ratio普通米糠组Rice bran group1825.65 ± 0.6287.46 ± 1.343.44 ± 0.08有机硒组Selenium-enriched yeast group19 26.14 ± 1.0289.44 ± 0.723.52 ± 0.14富硒米糠组Selenium-enriched rice bran group18 25.93 ± 0.8985.15 ± 1.283.33 ± 0.09

表4 三组兔组内脏器指数检测结果Table 4 Organ indexes of the rabbits in different ± s)

2.2 三组实验仔兔的抗氧化功能情况

三组兔血清GSH-Px、SOD、CAT活性和MDA含量检测结果见图2。与普通米糠组比较，富硒米糠组的GSH-Px和SOD活性分别有显著和极显著增加(P< 0.05，P< 0.01)，而CAT活性差异无显著性(P> 0.05)，MDA含量也有明显降低(P< 0.05)；有机硒组GSH-Px和CAT的活性明显高于普通米糠组，MDA含量明显低于普通米糠组，差异均有极显著性(P< 0.01),而SOD活性无明显改变(P> 0.05)。

与有机硒组比较，富硒米糠组的GSH-Px活性较低，但差异无显著性(P> 0.05)，MDA含量则较高，差异有显著性(P< 0.05)；富硒米糠组的SOD活性明显较高，但CAT活性明显较低，差异均有极显著性(P< 0.01)。

2.3 三组实验仔兔血清生化功能情况

三组实验仔兔的血清生化指标GLU、TP、ALB、GLOB、ALB/GLOB和UA检测结果见表5。与普通米糠组比较，有机硒组和富硒米糠组的各血液生化指标均无显著差异(P> 0.05),与有机硒组比较，富硒米糠组的各血液生化指标也均无显著差异(P> 0.05)。

2.4 三组实验仔兔肾硒含量情况

普通米糠组、有机硒组、富硒米糠组的肾硒含量检测结果分别为(0.99 ± 0.07)mg/kg、(1.25 ± 0.08)mg/kg、(1.11 ± 0.07)mg/kg。与普通米糠组比较，有机硒组和富硒米糠组的肾硒含量均有增加，但其差异均无显著性(P> 0.05)。有机硒组的肾硒含量高于富硒米糠组，但其差异也无显著性(P> 0.05)。

表5 三组兔血清GLU、TP、ALB、GLOB、ALB/GLOB比值及UA含量Table 5 Blood biochemical indexes and blood glucose of the rabbits in different ± s)

图2 三组兔组内血清GSH-Px、SOD、CAT活性和MDA含量(*P < 0.05，**P < 0.01)Figure 2 Activity of serum GSH-Px, SOD and CAT and MDA content of the rabbits in different groups(*P < 0.05，**P < 0.01)

3 讨论

硒是动物必需的微量元素之一，不同形式的硒大部分在十二指肠被吸收并转化，主要以硒代氨基酸、含硒蛋白质和硒蛋白两类有机硒化合物的形式分布于全身组织细胞中，最后通过粪、尿或呼吸的形式排出体外[5]。硒在体内的主要生物学作用包括抗氧化、促生长、增强机体免疫和提高动物繁殖性能等生物学功能[6-17]。家兔硒缺乏会出现被毛稀疏或无毛，食欲减退，成年兔体重下降，幼兔生长发育迟缓、精神不振，对外界刺激明显反应迟钝[1]，而硒过量则会引起急性中毒等不良后果。

家兔需要的硒来源于饲料，目前饲料中添加的硒有无机硒，如亚硒酸钠和有机硒，如酵母硒等。研究表明，饲料中添加0.15 ～ 0.3 mg/kg的硒有促进仔兔生长，增加GSH-Px、SOD、CAT的活性和降低MDA含量的作用，还能增强兔病毒性出血症灭活疫苗接种后的抗体产生等，且有机硒的效果优于无机硒[4,18-19]。我国实验动物国家标准《实验动物 配合饲料营养成分》GB14924.3-2010中规定，生长、繁殖饲料中的硒添加量为0.1 ～ 0.2 mg/kg[20]。富硒酵母常作为美国和欧盟动物饲料的商品硒源。硒酵母中70% ～ 90%的硒以硒代蛋氨酸(SeMet)形式存在[21]。目前，我国实验动物饲料中硒的添加也以酵母硒为主。

作者所在地区有丰富的富硒资源，如富硒大米、富硒玉米等。经过检测，加工富硒大米产生的米糠也有1 mg/kg或以上的硒含量，且米糠有供应充足、价格低廉和就地取材方便等优点。因此，本研究充分利用当地资源优势，用富硒米糠代替饲料有机硒的添加，研究其对实验仔兔生长性能、抗氧化功能和血清生化指标的影响。

实验发现：与有机硒组比较，富硒米糠组有相似的平均日增重、料重比、脏器指数等生长性能指标。与普通米糠饲料比较，富硒米糠组和有机硒组的平均日增重、料重比、脏器指数并没有表现出明显的优势，这与前述的文献报道不一致，分析原因可能与普通米糠饲料的含硒量较高有关。为了保证本实验有良好的对比性，我们选择了富硒地区非富硒地生产的普通米糠作为对照，尽管其土壤没有进行硒化处理，但因气候、水源流动等因素，使得这类土壤中也有一定的硒含量，因此，普通米糠饲料的硒含量达到0.118 mg/kg。进一步的抗氧化指标检测发现，与普通米糠组比较，富硒米糠组的GSH-Px和SOD活性均有显著增加(P< 0.05)，MDA含量也有明显降低(P< 0.05)；富硒米糠组与有机硒组比较，二者GSH-Px活性相当(P> 0.05)，富硒米糠组的SOD活性明显高于有机硒组(P< 0.01)，但CAT活性明显低于有机硒组(P< 0.01)。这与硒提高实验兔抗氧能力的报道一致。以上研究也提示，0.1 mg/kg的有机硒即能提高实验仔兔的生长性能，但0.2 mg/kg的有机硒更能提高动物的抗氧化能力。

本研究还对三组兔血清TP、ALB、GLU、UA、GLOB含量及ALB/GLOB比值进行了测定，各指标在各组间均未发现显著差异(P> 0.05)，其原因也可能与普通米糠组的硒含量较高有关。

有研究证实：不同形式的硒被机体吸收、转化，并以有机硒的形式存储，且肾、肝和肌肉中含量较高[22]。因此，本研究对各组肾组织中的硒含量进行了测定，结果发现，有机硒组的肾硒含量较富硒米糠组稍高(1.25 ± 0.23)mg/kgvs.(1.11 ± 0.19)mg/kg，但二者差异无显著性(P> 0.05)，普通米糠组肾硒含量也达到了(0.99 ± 0.21)mg/kg， 提示在农作物上进行硒的生物有机化，不仅降低了硒的毒性，还有较高的吸收和生物转化。

总之，富硒米糠对仔兔生长性能和抗氧化功能的促进作用与有机硒相当，可代替有机硒作为仔兔生长的硒源，这为富硒米糠在仔兔饲料生产中的推广应用提供实验基础。