E2F2在肝细胞肝癌组织中的表达及临床意义

王小平，谢秋莉，薛晨

(郑州大学第一附属医院 感染科，河南 郑州 450052)

肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)在全球常见癌症中排名第6位，在每年发生癌症相关死亡原因中居第3位，死亡人数每年达100万。治疗HCC的常用方法是手术，包括肿瘤切除和肝脏移植，但术后复发率和死亡率仍居高不下[1]。因此，有必要从分子水平阐明参与HCC发生和发展的信号通路，为HCC患者的早期准确诊断和靶向治疗提供新的方向。E2F早期因其可以与腺病毒的E2启动子区结合并促进相关基因转录而被广泛研究，是一组在高等真核生物中编码转录因子的基因家族，目前已有8种基因(E2F1～E2F8)被认定属于该家族。E2F2是E2F转录因子家族的成员之一，在哺乳动物中主要以细胞周期依赖性的模式对下游细胞的细胞周期和增生相关蛋白的表达进行调控，对细胞的增殖、分化和凋亡等相关细胞功能有一定的影响。研究表明，E2F2具有强大的致癌能力，可与P53蛋白共同维持细胞的稳态，对细胞转化和细胞周期进展起精准调控作用，相关因素导致该稳态的失衡是一些肿瘤发生的机制之一[2]。目前对E2F2的研究主要集中在胃癌、肺癌和脑胶质瘤等。因此，本研究分析E2F2在肝细胞肝癌组织中的表达及临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料在癌症基因组图谱(the cancer genome atlas，TCGA)(下载自https://tcga-data.nci.nih.gov/tcga/)中选取肝细胞肝癌的高通量测序表达谱数据，数据时间截止至2017年5月。运用R软件(http://www.r-project.org/)对数据进行整理，剔除基因表达情况、一般资料、临床病理特征或预后情况不完整的个体资料，得到345例有完整数据的病例(包含43例配对的癌旁组织数据)。

1.2 研究方法依据研究对象的性别、年龄、血清AFP水平、TNM分期、病理学分级及无进展生存期(progress free survival，PFS)等资料的不同等级进行分类预处理。筛选后共得到345例HCC组织(包含43例配对的癌旁组织数据)，根据癌组织中E2F2的中位表达水平6.57，将HCC组织分为低表达组(173例)和高表达组(172例)。

2 结果

2.1 E2F2在HCC组织和癌旁组织中表达水平E2F2在HCC组织和癌旁组织中的表达水平分别为6.46±0.08、3.34±0.17，E2F2在HCC组织中的表达水平高于癌旁组织，差异有统计学意义(P<0.05)。

2.2 E2F2表达水平与HCC患者的一般资料及临床病理特征的相关性血清AFP水平高的HCC患者E2F2表达水平高于血清AFP水平低的HCC患者，差异有统计学意义(P<0.05)；病理学分级中Ⅲ～Ⅳ级HCC患者E2F2表达水平高于Ⅰ～Ⅱ级HCC患者，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 E2F2表达水平与HCC患者一般资料及临床病理特征的相关性分析

2.3 E2F2表达水平与HCC患者预后的关系E2F2高表达组患者整体生存率低于E2F2低表达组，差异有统计学意义(P<0.05)。见图1。

图1 E2F2表达水平与HCC患者整体生存率的相关性分析

3 讨论

TCGA是一个涵盖33种肿瘤的基因组学数据和研究样本的一般资料、病理和病程资料的共享数据集[3]。TCGA可供研究者在RNA、蛋白质等分子水平挖掘相关基因在癌症中的表达情况及其与患者一般资料、临床病理特征、预后情况之间的相关性，对发现诊断癌症的肿瘤标志物和治疗癌症的靶向药物有重大意义。本研究旨在通过挖掘TCGA数据库中有关E2F2在HCC和癌旁组织中表达水平的信息，推断E2F2与患者一般情况和临床病理特征的相关性及其对HCC患者预后的影响，进而为阐明HCC发生发展的分子机制，制定新的HCC临床治疗方案，改善HCC患者预后提供新的方向。

哺乳动物的转录因子E2F家族位于细胞周期信号级联的下游，在细胞的增殖、凋亡、分化、衰老、DNA损伤等过程中通过调节与哺乳动物细胞周期进程相关基因来调节细胞周期，并能对损伤DNA进行修复[4]。E2F2作为E2F转录因子家族的重要成员之一，以转录激活因子的身份激活与细胞周期相关基因的转录来促进细胞的有丝分裂，在控制哺乳动物细胞周期中G1/S转换和DNA复制过程中起关键作用[2]。研究表明，E2F2是多种癌症如肺癌、骨肉瘤、卵巢癌和神经胶质瘤的致癌基因，与这些癌症的发生和发展密切相关[5-8]。此外，Wang等[9]报道E2F2可通过被miR-31抑制参与胃癌的发生发展。另有研究表明，E2F2可能作为miR-365的直接靶基因被miR-365负向调控，导致胃癌细胞的侵袭能力和转移能力增强[10]。最新研究表明，miR-936可以在转录后水平靶向抑制E2F2的表达，进而抑制非小细胞型肺癌癌细胞的增殖、侵袭和转移[5]。关于人脑胶质瘤中E2F2的研究发现，敲低E2F2的表达后，细胞增殖能力较对照组下降，证实了E2F2可能通过增强胶质瘤细胞的代谢能力促进肿瘤的生长[8]。

本研究首次利用TCGA数据库中E2F2基因在HCC中的表达情况，剖析E2F2的表达水平与HCC患者的一般资料、临床病理特征和预后的相关性，发现E2F2在HCC组织中的表达水平高于癌旁组织，提示E2F2可能参与了HCC的发生发展过程，并起促进癌症发展的作用。E2F2表达水平与HCC患者血清AFP水平和TNM分级呈正相关，TNM分级、血清AFP水平越高，E2F2的表达水平就越高，提示E2F2可以作为临床上早期诊断HCC的肿瘤分子标志物。E2F2高表达组患者整体生存率低于E2F2低表达组。以上结果均表明E2F2基因有希望成为新的HCC预后判断因子。

综上，本研究首次利用TCGA以及相应个例的一般资料、临床病理特征和预后情况，报道了E2F2可能在HCC的发生发展过程中起促进作用，有望成为新的HCC肿瘤标记物和预后判断因子，进而提高HCC患者的早期诊断率，改善预后。本研究收集的临床资料来自于公共数据库，数据客观完整可靠，研究具备一定的临床意义。然而本研究偏向于数据库挖掘分析，缺乏具体的分子水平实验研究，对于E2F2的表观遗传调控的具体机制尚不明确，故在后续研究中有必要深入探讨E2F2在肝细胞肝癌发生发展中的具体分子机制和功能。