AMI患者血中EMPs、sICAM-1、Cys-C水平与冠脉病变的相关性

王爱国，程彩霞，蒋翔宁，王 磊，蒋赵明，张 婷

(1.黄山首康医院检验科，安徽 黄山 245000; 2.黄山市人民医院检验科，安徽 黄山 245000;3.黄山首康医院心内科，安徽 黄山 245000)

急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)发展过程中，细胞因子能加剧心肌细胞的氧化应激性损伤，增加冠状动脉粥样斑块的形成速度[1-2]。血内皮微粒(endothelial microparticles,EMPs)的表达变化，能够反应冠状动脉内皮细胞的功能及其损伤程度和凋亡水平[3]；血清可溶性细胞间黏附分子-1(serum soluble intercellular adhesion molecule-1，sICAM-1)可加速趋化因子在冠状动脉内皮细胞的沉积，进而促进冠状动脉的损伤，导致血管的粥样硬化性病变；胱抑素C(cystatin C，Cys-C)能够通过诱导氧化自由基的释放，增加冠状动脉血管的脆性，促进心肌细胞的缺血缺氧性损伤[4]。为了揭示血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C的表达与AMI发生发展的关系，本研究选取急性心肌梗死患者90例，探讨了血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C的表达与患者的病情及经皮冠脉介入术(PCI)后复流程度的关系，为评价急性心肌梗死患者的症状提供临床参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取经冠脉造影检查确诊的AMI患者90例为AMI组，患者入组时间2016年7月～2017年12月，另选取90例健康对象作为对照组。

AMI组，年龄范围52～77岁，平均(65.2±7.8)岁，男55例、女35例，体质量指数(BMI)23.1±2.0 kg/m2；其中冠脉单支病变23例、双支病变39例、三支病变28例；合并高血压59例、糖尿病23例、血脂异常38例；吸烟34例、饮酒27例。对照组，年龄范围46～79岁，平均(64.4±8.0)岁，男50例、女40例，BMI 22.9±2.4 kg/m2；吸烟30例、饮酒25例。AMI组和对照组基线资料均衡可比(P>0.05)，见表1。

纳入标准：(1)AMI的诊断标准参考《中国急性心肌梗死诊断和治疗指南》中的标准[5]；(2)研究对象年龄均≤79岁；(3)所有患者均经过冠脉造影或者血管内超声检查确诊；(4)对照组为经体检健康的体检人员；(5)研究方案获得医学伦理委员会批准，实施前与研究对象签署相关知情同意协议。

排除标准：(1)阿尔茨海默病；(2)精神疾病；(3)基线资料缺失；(4)脑卒中等脑血管病史；(5)合并创伤、恶性肿瘤；(6)风湿、免疫系统疾病患者。

表1 两组研究对象的一般资料对比

1.2 血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C检测方法

住院第二天，收集患者肘关节静脉血4 mL，自然凝固收集上层清液，-20 ℃存放。Cys-C的检测运用上海宇庭生物科技有限公司生产的全自动生化检测仪(Biotetic-2008)及配套试剂，按照说明书和试剂盒的相关流程使用；采用ELISA法检测sICAM-1。

采集入院后静脉血，加入枸橼酸钠抗凝，通过离心方法获取血小板贫瘠血浆，收集50 μL的血小板贫瘠血浆，加入CD42-PE+CD31-FUTC抗体，采用流式细胞技术检测EMPs(FACS calibur流式细胞仪购自美国BD公司，流式细胞抗体购自罗氏检测公司)。

1.3 Gensini评分及PCI术后冠脉病变程度的判断标准

冠脉病变程度评价采用Gensini评分，(1)根据冠状动脉的狭窄程度：病变冠脉管腔狭窄<25%评分为1分，病变冠脉管腔狭窄25%～49%评分为2分，病变冠脉管腔狭窄50%～74%评分为4分，病变冠脉管腔狭窄75%～90%评分为8分，病变冠脉管腔狭窄90%～99%评分为16分，如果病变冠脉管腔的狭窄达到100%评分为32分；(2)依据冠状动脉的病变部位：病变靶血管为左主干则评分5分，病变靶血管为左前降支或回旋支则评分为2.5分，病变靶血管为左前降支中段则评分为1.5分，病变靶血管为左前降支远段则评分为1.0分，右冠状动脉、左回旋支中、远段三个部分均为1.0分，其他的小分支病变则为0.5分。总分=部位评分+狭窄程度评分。

对AMI患者PCI前后的梗死血管TIMI血流分级进行评价：TIMI 0级：血管完全闭塞，闭塞处远端血管无前向血流充盈；TIMI 1级：可观察到少量对比剂通过血管闭塞部位，远端血管少部分显影，血管充盈不全；TIMI 2级：部分对比剂能够完全充盈冠状动脉远端，但对比剂前向充盈及排空速度显著的缓慢与正常冠脉；TIMI 3级：冠脉完全再管注，3个心动周期内对比剂完全充盈或排空。TIMI≤1级判断为无复流。

1.4 统计学方法

2 结 果

2.1 两组血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平

AMI组患者的血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平显著高于对照组(表2)。

表2 AMI组和对照组的血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平比较

2.2 不同冠脉病变支数的AMI患者血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平

血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C在不同冠脉病变支数(单支、双支、三支)患者中比较，方差分析显示，组间对比差异具有显著性(表3)。

表3 不同冠脉病变支数的AMI患者血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平比较

2.3 PCI术后不同TIMI分级与血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平

90例AMI组患者PCI术后共有TIMI≥2级患者73例，TIMI≤1患者17例，TIMI≥2级患者的血浆EMPs、血清sICAM-1低于TIMI≤1患者(P<0.01)；TIMI≥2级与TIMI≤1患者Cys-C水平差异无统计学意义(P>0.05，表4)。

表4 PCI术后不同TIMI分级的AMI患者的血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平

2.4 不同冠脉病变支数的AMI患者Gensini评分

单支、双支、三支冠脉病变的AMI组患者的Gensini评分组间呈现逐渐升高的趋势，且差异具有显著性，任意两组间对比差异均显著(P<0.05，表5)。

表5 不同冠脉病变支数的AMI患者Gensini评分比较 (分)

2.5 相关性分析

AMI组患者的Gensini评分与血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C水平均呈显著的正相关关系(P<0.01，表6)。

表6 相关性分析结果

3 讨 论

冠状动脉粥样硬化的患者中AMI的发病率逐年上升[6]。临床血清学指标评价AMI患者病情的依据较少。临床上采用心肌酶谱相关指标评估AMI患者的一致性率不足35%，其对于患者冠状动脉损伤评估的价值较低[7]。血浆EMPs是冠状动脉内皮细胞损伤过程中释放的囊泡颗粒，能够反应内皮细胞的凋亡程度。在内皮细胞炎症性损伤或者氧化应激性损伤过程中，血浆EMPs的表达可显著的上升。血浆EMPs能够提高炎性细胞的激活，加剧冠状动脉病变速度的进程[8]；血清sICAM-1是粘附分子相关家族成员，其能够通过诱导下游炎症性因子的激活，增加肿瘤坏死因子或者补体成分C3的富集，加剧冠状动脉的痉挛，导致心肌细胞的缺血性损伤[9]；Cys-C是胱氨酸及胱抑素代谢相关指标，其通过参与游离自由基的释放，提高氧自由基对于心肌细胞膜的损伤程度[10]。文献报道，AMI患者血清sICAM-1、Cys-C的表达可明显上升[11-12]，但对于EMPs的表达与冠状动脉病变程度的关系分析不足。

本研究发现，AMI患者EMPs、sICAM-1、Cys-C水平明显升高，提示了血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C的高表达与AMI的病情进展过程密切相关。揭示了不同细胞因子对AMI的病情影响程度，主要与下列几个方面的作用有关[13-14]：(1)高水平的血浆EMPs表达不仅反映了冠状动脉内皮细胞的损伤程度，同时还能够提高中性粒细胞酶的激活程度，增加其对于心肌组织的浸润和损伤；(2)血清sICAM-1的表达上升能够提高趋化因子的富集，增加自身免疫性复合物在心肌组织的沉积，而Cys-C的上升能够引起心肌细胞线粒体的损伤，导致心肌细胞收缩功能的障碍。不同冠状动脉病变数量的患者，随着冠状动脉病变数量增加，血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C的表达浓度逐渐的上升，提示这些细胞因子的表达与促进泡沫细胞在内皮下的富集，引起冠状动脉血管病变数量的增加有关。本组研究还发现，TIMI≥2级患者的血浆EMPs、血清sICAM-1低于TIMI≤1患者；TIMI≥2级与TIMI≤1患者Cys-C水平差异无统计学意义，表明血浆EMPs、血清sICAM-1还与PCI术后复流有关，而Cys-C则无明显相关。Gensini法是评估患者冠状动脉血管狭窄程度的指标，本研究发现Gensini评分与AMI患者的血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C密切相关，进一步提示了血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C与冠状动脉血管病变的关系。临床上可以检测相关细胞因子，进而评估冠状动脉的累及程度。

综上所述，血浆EMPs、血清sICAM-1、Cys-C的表达与AMI患者的冠状动脉病变程度密切相关。Cys-C的表达与冠状动脉PCI术后复流的情况关系不大。