蛭龙活血通瘀胶囊对风痰瘀阻型急性缺血性脑卒中患者外周血TNF-α、IL-1β、IL-6及神经功能的影响

简晓莉，刘 超，尹思源，张德绸

(1西南医科大学附属中医医院神经内科；2泸州市纳溪区人民医院耳鼻喉科；3西南医科大学教务处，四川泸州 646000)

蛭龙活血通瘀胶囊是我院自制的纯中药院内制剂，前期研究证明蛭龙活血通瘀胶囊能够降血脂、改善血液流变学、脑保护、具有免疫调节等作用[5-6]。本研究拟探讨蛭龙活血通瘀胶囊对风痰瘀阻型脑卒中患者外周血TNF-α、IL-1β、IL-6 及NIHSS 评分，BI评分的影响，通过上述指标变化，初步探讨该药在脑卒中治疗中的机理。

1 材料与方法

1.1 病例来源

选取对象为2018 年10 月至2019 年8 月入住西南医科大学附属中医医院心脑病科的急性缺血性脑卒中且辨证属风痰瘀阻型的60例患者作为病例组。将60 例病例随机分组为蛭龙组30 例，非蛭龙组30例。

1.2 纳入及排除标准

1.2.1 纳入标准

①符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018》[7]AIS诊断标准；②符合《中药新药临床研究指导原则》[8]中风病诊断标准；③经头颅CT/MRI显像证实有新鲜梗死灶，且为24 小时内首次发病的患者；④年龄在18～80岁以下。

1.22 排除标准

①有短暂性脑缺血发作、脑出血，或由外伤、颅脑占位、血液代谢疾病、静脉病变引起的神经功能障碍患者；②患有免疫性疾病，平素在服用免疫制剂、激素等药物；③合并严重慢性疾病，严重感染者；④既往有脑梗死病史者；⑤患者或家属不同意参加。

1.3 实验试剂、仪器及药物

1.3.1 实验试剂及仪器

TNF-α分析药盒（北京北方生物技术研究所）；IL-6测定试剂盒、IL-1β测定试剂盒（英国SHDPL公司）；全自动脱帽离心机（长沙鑫奥）；2～8℃冰箱（星星集团）。

肋骨骨折是胸部创伤最严重的表现形式，是仅次于颅脑创伤致死的第二大病因，其死亡率在2%～20%[1]。肋骨骨折的诊断主要靠影像学检查，而骨折的定位和诊治往往涉及到肋骨的分段。为此，临床提出了肋骨的“解剖学分段”，而影像也提出了肋骨的“影像学分段”。我院从2015年CT运行以来便开始总结并提出了“肋骨CT四段法”。本研究通过对肋骨CT分段的应用，以及对各区段肋骨骨折发生率和临床术后诊断符合率的统计分析，来探讨肋骨的CT分段在肋骨骨折诊治中的应用价值。

1.3.2 实验药物

蛭龙活血通瘀胶囊（西南医科大学附属中医医院制剂室，批号：Z20070528）；拜阿司匹林肠溶片（德国拜尔医药公司）；阿托伐他汀钙片（北京嘉林药业公司）。

1.4 方法

1.4.1 干预方法

两组患者均予以基础治疗：二级预防（口服拜阿司匹林肠溶片100 mg qd+阿托伐他汀钙片40 mg qn）+康复治疗，蛭龙组在基础治疗上加用蛭龙活血通瘀胶囊1.6 g tid 口服治疗。治疗过程中当注意控制血压、血糖、脑水肿等。

1.4.2 指标检测

在第1、3、7 d，抽取患者空腹静脉血5 mL，4 000 r/min 离心10 min 分离保存血清，采取放免法检测血清TNF-α，化学发光法检测IL-1β、IL-6；所有指标在西南医科大学附属中医医院实验室检验。由同一名经专业培训医师评估患者NIHSS评分、BI评分。

1.5 统计学方法

实验数据应用SPSS 21.0 进行统计学处理。主要采用k-s检验；对于正态分布的数据，采用均值加减标准差来表示，检验不同组的差异用独立样本t检验或单因素方差分析；对于非正态数据，检验不同组的差异用u 检验或H 检验；其中检验水准为α=0.05，当P ＜0.05代表差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料

在治疗过程中，蛭龙组1 例病人因要求自动出院未能完成本研究；非蛭龙组1 例病人在治疗过程中因病情较重死亡，1例病人要求转院而未能完成本研究。故再次选择3 例合格病例按照随机分组以补充。最终病例组为60例。蛭龙组、非蛭龙组两组研究对象在年龄、性别、吸烟、饮酒、高血压病、糖尿病、高脂血症差异无统计学意义（P ＞0.05），见表1。

表1 两组研究对象一般资料

2.2 蛭龙组与非蛭龙组患者血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平变化

第1 d，2 组患者外周血TNF-α、IL-1β、IL-6 差异无统计学意义（P ＞0.05）。治疗后，2 组患者TNF-α、IL-1β、IL-6 均 逐渐降低；蛭龙组血清TNF-α、IL-1β、IL-6 水平明显降低（P ＜0.05），且较非蛭龙组显著降低（P ＜0.05），见表2-4。

表2 两组患者不同时间TNF-α 水平比较(pg/mL，)

表2 两组患者不同时间TNF-α 水平比较(pg/mL，)

注：蛭龙组组内比较aP ＜0.05；与非蛭龙组比较bP ＜0.05

表3 两组患者不同时间IL-1β 水平比较(ng/mL，)

表3 两组患者不同时间IL-1β 水平比较(ng/mL，)

注：蛭龙组组内比较aP ＜0.05；与非蛭龙组比较bP ＜0.05

表4 两组患者不同时间IL-6水平比较(ng/mL，)

表4 两组患者不同时间IL-6水平比较(ng/mL，)

注：蛭龙组组内比较aP ＜0.05；与非蛭龙组比较bP ＜0.05

2.3 蛭龙组与非蛭龙组患者NIHSS评分及BI评分比较

第1d，2 组患者NIHSS 评分及BI 评分比较差异无统计学意义（P ＞0.05）。治疗后，2患者NIHSS评分降低，BI 评分升高（P ＜0.05）；第7 d，蛭龙组NIHSS评分明显低于非蛭龙组，BI评分明显高于非蛭龙组，差异有统计学意义（P ＜0.05）。见表5-6。

表5 两组患者不同时间NIHSS水平比较()

表5 两组患者不同时间NIHSS水平比较()

注：组内比较aP ＜0.05；组间比较bP ＜0.05

表6 两组患者不同时间BI水平比较()

表6 两组患者不同时间BI水平比较()

注：组内比较aP ＜0.05；组间比较，第7 dbP ＜0.05

3 讨论

“中风”之名始于《黄帝内经》，其有“大厥、偏枯、偏风”等记载，是对中风症状的早期认识[9]。东汉张仲景在《金匮要略》中首次提出了“中风”病名，同时确立了“内虚邪中”理论[10]。综合当代对中风病的认识，指出本病以突然昏仆、半身不遂、肢麻、舌强语謇等为主要临床表现[11]；基本病机是脏腑失调，气血逆乱，痰瘀兼杂互结，从而导致脑部脉络痹阻[8]；病因以风、火、痰、瘀、虚为多见，认为气虚为本，痰浊瘀血为标，急性期又以风、痰、瘀多见[12]；治以祛风化痰、活血通络。中医玄府理论认为脑病为“脑玄府郁闭、气血不畅、神机失用”所致，故当“补气、化瘀、除痰、通络”。蛭龙活血通瘀胶囊是我院研发的纯中药制剂，方由黄芪、水蛭、地龙、桂枝等药物组成，其强调“重用补气、辅以化痰通络，佐以祛风”[5]。基于“脑之玄府-血脑屏障”理论，临床用于风痰瘀阻型脑卒中患者适宜。董丽、王蔚等[6，13]在AIS临床及大鼠模型中研究指出，蛭龙活血通瘀胶囊对AIS 患者有脑保护作用，能够改善脑出血大鼠血脑屏障的通透性，对血脑屏障起保护作用。其他相关动物研究还显示，蛭龙活血通瘀胶囊能降低大鼠血清IL-6、TNF-α及CRP，上调血管内皮生长因子，具有一定的抗炎和免疫调节作用[14]。

TNF-α在脑缺血早期主要由激活的小胶质细胞、神经元生成，后期主要由巨噬细胞分泌[15]。TNF-α的释放为双相模式，在缺血后1 h即表达于脑梗死组织内，第一个峰在1～3 h，第二个峰在24～36 h，后逐渐下降[16]。TNF-α可增加细胞内钙浓度，刺激谷氨酸释放，引起神经胶质增生和释放神经毒性介质破坏血脑屏障，导致脑水肿。激活免疫系统并促进白细胞向病灶转移从而加重局部免疫炎症反应，刺激内皮细胞凋亡，增加脑梗死体积[17]。

IL-1β在脑缺血早期主要由激活的小胶质细胞生成，其次为星形胶质细胞、神经元和内皮细胞，后期主要由巨噬细胞分泌[18]。IL-1β的释放亦为双相模式，在缺血30 min内即以前体形式（Pro-IL-1β）表达于梗死的脑组织，第一个峰值在再灌注后1 h，第二个峰值在6～24 h，后逐渐下降[16]。脑缺血后，IL-1β在外周及中枢浓度均升高，其作为内热原，通过多条促炎机制而加重脑卒中后病理过程，可促进小胶质细胞活化，增加TNF-α、IL-6 表达，协同作用于脑梗死部位而加重神经炎症反应，进而损伤血脑屏障，加重脑水肿[19]。脑梗死周围神经元因缺血时间过长未得到血液供应，IL-1β可通过激活氨基酸介导的兴奋性毒性及启动凋亡级联反应而促进细胞凋亡[20]。

IL-6 在脑缺血早期可由激活的小胶质细胞、星形胶质细胞、神经元产生，后主要由巨噬细胞、血管内皮细胞产生[18]。急性脑缺血后，血液和脑脊液中IL-6 表达水平均增高，在脑卒中后4 h 即可检测到，在1 d 后达到峰值浓度，后逐渐下降，并可持续14 d内[18]。IL-6作为内热原，在各种炎性反应中发挥多重效应，可吸引T 淋巴细胞聚集，诱导巨噬细胞表达TNF-α，从而加重炎症反应[21]。

在AIS 的早期，脑梗死部位血流被阻断导致脑组织缺血、缺氧而出现损伤、坏死，损伤或坏死的神经元释放损伤相关分子模式（damage associated mo⁃lecular patterns，DAMPs）导致小胶质细胞的激活。受损神经元和激活的小胶质细胞释放炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6及黏附分子[22]，相应因子使外周血中大量的循环炎症细胞通过受损的血脑屏障到达缺血性脑区[23]，几小时内局部脑组织出现免疫炎症过度反应，使得TNF-α、IL-1β、IL-6 等促炎细胞因子进一步增加。同时，脑卒中后，损伤的脑组织引起神经源性通路的激活，通过下丘脑-垂体-肾上腺轴、交感神经支配和副交感神经支配这3种途径导致免疫抑制，而免疫抑制可减轻脑卒中局部免疫炎症反应，使得TNF-α、IL-1β、IL-6 等炎性因子分泌减少。本研究结果显示，AIS 后1～7 d，脑卒中患者血清TNF-α、IL-1β、IL-6 在第1 d 最高，后逐渐降低，这与此前免疫因子在脑卒中后先升高后降低相一致。

此外，蛭龙组患者血清TNF-α、IL-1β、IL-6 较非蛭龙组患者更低，结合此前对蛭龙活血通瘀胶囊的相关研究可知，其可促进AIS 患者的免疫抑制而减轻免疫炎症反应，对脑组织有保护作用。经治疗后，两组患者NIHSS 评分均降低，BI 评分均升高；在第7 d，蛭龙组NIHSS、BI评分较非蛭龙组变化明显。本研究选择风痰瘀阻型AIS 患者，经蛭龙活血通瘀胶囊治疗患者其在肢体功能活动上改善明显，结合AIS患者在急性期以风、痰、瘀多见，而蛭龙活血通瘀胶囊可活血化瘀、祛风通络，故经治疗后蛭龙组患者NIHSS评分、BI评分较基础组改善明显。由此可证明蛭龙活血通瘀胶囊可改善AIS 患者神经功能缺损，提高患者的日常生活能力，对患者的预后有益。

4 结论

经该研究可知，蛭龙活血通瘀胶囊可降低AIS患者外周血中TNF-α、IL-1β、IL-6 水平，降低患者NIHSS 评分，升高BI 评分。其可减轻免疫炎症反应，保护脑组织，促进患者神经功能的恢复及日常生活能力的提高，改善患者的预后。